阮系真
- 作品数:9 被引量:13H指数:2
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金浙江省科技厅创新团队建设与人才培养项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 微生物蛋白质组学研究现状被引量:1
- 2014年
- 随着人类基因组的绘制成功,标志着后基因组时代的到来.由于基因的功能主要是通过其表达的蛋白质来实现,要了解该基因的全部信息,必须对其编码的蛋白质进行深入研究.蛋白质组学分析为研究微生物的生命活动和细胞功能提供了广阔的视野.因此,蛋白质组学在生命科学研究中具有十分重要的位置,随着研究的不断深入,蛋白质组学必将对人类的生活和生产带来十分重大的影响.本文主要就目前微生物蛋白质组学的研究现状进行简要阐述.
- 金玉兰邢刚阮系真
- 关键词:蛋白质组学微生物人类基因组后基因组时代细胞功能生命活动
- 狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒系统的表达及鉴定被引量:1
- 2012年
- 为了建立狂犬病毒磷蛋白(phosphoprotein,P)的体外表达系统,本研究将RT-PCR扩增的狂犬病病毒ERA株P蛋白基因克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTA,构建重组质粒pFastBacHTA-P,并转染昆虫细胞Sf9包装形成重组杆状病毒。SDS-PAGE分析显示重组质粒pFastBacHTA-P转染的Sf9细胞中出现了分子量约为42 kDa的蛋白条带,Western blot证实分子量约为42 kDa的蛋白能与抗His的单克隆抗体发生特异性反应,间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)分析进一步显示Sf9细胞表达的P蛋白与抗P蛋白单克隆抗体能特异性结合。这些实验证明,狂犬病病毒P蛋白不仅在Sf9细胞中获得表达,而且具有良好的免疫反应性。狂犬病病毒P蛋白杆状病毒表达体系的建立,为蛋白结构的解析和诊断试剂的研制奠定了基础。
- 许运斌徐洁萍张金阳昝洁阮系真周继勇
- 关键词:狂犬病病毒杆状病毒表达系统
- 鸡白细胞介素2 ELISA检测技术研究
- 白细胞介素2(Interleukin2,IL-2)是在分裂素或特异性抗原刺激下,主要由激活的T淋巴细胞或T淋巴细胞系产生的一类具有广泛生物学活性的细胞因子。在养禽业中,一些病原如传染性法氏囊病毒等感染后,可引起免疫抑制,...
- 阮系真
- 关键词:白细胞介素2杆状病毒
- 猪圆环病毒2型高繁殖力毒株构建及其疫苗研制与应用
- 周继勇金玉兰颜焰邢刚阮系真廖敏郑肖娟李守军李宝臣王蕾徐龙涛张海燕郁宏伟刘爵郑育良
- 课题来源与背景:课题来源于浙江省重大科技攻关项目“猪主要病毒免疫抑制性疫病防控关键技术研究与应用(2003C12012)”、浙江省重大科技专项重点农业项目“高复制能力猪圆环病毒2疫苗技术开发及产品研制(2011C1200...
- 关键词:
- 关键词:猪圆环病毒病基因工程养猪
- 两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒检测效果比较被引量:1
- 2014年
- 为研究比较国内市售两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒(ZJ-ELISA、HB-ELISA)的检测效果,以期为猪群PCV2抗体监测选择试剂盒提供参考。首先通过间接免疫荧光方法(IFA)测定44份猪血清的PCV2抗体滴度,并以此为标准,判定猪血清中PCV2抗体的阴阳性,然后利用两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒分别测定上述血清的OD值,并判定PCV2抗体阴阳性。通过计算各种试剂盒检测结果与IFA检测结果的符合率以及配对卡方检验及Kappa检验,判定最优检测试剂盒。结果表明,国内市售两种PCV2抗体检测试剂盒与IFA检测结果的总符合率均为86.36%(38/44),配对卡方检验及Kappa检验表明国产试剂盒与IFA检测结果差异不显著。
- 邢刚邱小伙阮系真金玉兰
- 家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法
- 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒,再利用显微注射转基因家蚕技术将...
- 钟伯雄周继勇庄兰芳阮系真危浩颜焰
- 家蚕丝腺生物反应器表达狂犬病病毒核蛋白被引量:3
- 2013年
- 【目的】采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统,尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白(RVNP)的技术体系,为生产基因工程疫苗奠定基础。【方法】通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列,采用家蚕丝胶蛋白基因(Ser1)启动子为特异性启动子,将RVNP构建到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体(pBA3EGFP)中,并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。【结果】G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个,蛾圈阳性率为59.09%。PCR实验证实RVNP已经整合到家蚕基因组中,Western blot分析表明RVNP蛋白可能附着于丝胶蛋白并随家蚕吐丝行为分泌到蚕茧中。【结论】获得了能够表达外源的RVNP蛋白的转基因家蚕品系,该系统有望成为高效、低廉、稳定地生产狂犬病基因工程疫苗的技术体系之一。
- 尤征英危浩阮系真叶露鹏王少华周继勇钟伯雄
- 关键词:狂犬病PIGGYBAC家蚕
- 猪圆环病毒2型抗体胶体金免疫层析方法的建立被引量:7
- 2014年
- 为建立一种猪圆环病毒2型(PCV2)抗体检测方法,以胶体金标记PCV2dcap蛋白(PCV2dcap蛋白为cap蛋白去除N端信号肽的截短蛋白)包被检测线、PCV2dcap蛋白的单克隆抗体包被质控线。用制备的试纸条分别检测了PCV2、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、甲型流感病毒(H3N2)的标准阳性血清以及浙江省不同猪场的479份临床血清,并同瑞普(保定)生物药业有限公司生产的ELISA试剂盒的检测结果进行了比较;制备了5个不同批次试纸条,通过批内和批间差异试验数据来衡量试纸条的稳定性。结果显示,该试纸条仅同PCV2的阳性血清有反应性,同上述常见猪病病毒的阳性血清没有交叉反应性;该方法同ELISA的阳性符合率为99.57%,阴性符合率为100%,总符合率为99.58%;试纸条的批内变异系数小于2.50%,批间变异系数小于7.60%。结果表明,该方法可用于PCV2相关疾病的快速诊断、流行病学调查以及疫苗免疫效果的评估,对PCV2相关疾病的监测和预防具有重要意义。
- 宋万杰胡伯里金玉兰阮系真邵敬霞周继勇
- 关键词:猪圆环病毒2型胶体金免疫层析技术
- 家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法
- 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒,再利用显微注射转基因家蚕技术将...
- 钟伯雄周继勇庄兰芳阮系真危浩颜焰
- 文献传递