马魁
- 作品数:8 被引量:7H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建及其在AD-293细胞中的表达
- 参考GenBank发表IL-15mRNA序列设计引物,用RT-PCR方法扩增猪IL-15基因,并克隆到pMD18-T载体中,通过PCR、酶切和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质...
- 陈豪罗满林房红莹张欣马魁
- 关键词:真核表达载体RT-PCR检测
- 文献传递
- 鸭白细胞介素-2基因在毕赤酵母中的表达被引量:2
- 2008年
- 根据GenBank中登录的鸭IL-2基因序列设计并合成了1对特异性引物,以经ConA诱导的广州鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上。酶切鉴定、PCR鉴定及序列测定结果表明,获得了鸭IL-2成熟蛋白基因的完整克隆。测序结果表明,该成熟蛋白基因由360个核苷酸组成,共编码119个氨基酸。克隆的鸭IL-2基因与GenBank上序列号为AY173028及AF294322的鸭IL-2基因的同源性高达99.4%。将目的基因克隆至真核表达载体pPICZαC上,构建了重组质粒pPICZαC-DuIL-2。酵母转化子经甲醇诱导发酵分泌表达了鸭IL-2基因。SDS-PAGE分析证实,鸭IL-2基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达成功,表达的重组蛋白的分子质量约为14.3 ku。
- 张欣崔敏罗满林贺东生黄毓茂房红莹陈钜豪马魁
- 关键词:毕赤酵母
- 牛IFN-γ基因的原核表达及单克隆抗体的研制
- 干扰素(interferon,IFN)是在特定的诱生剂作用下,由细胞产生的一种具有高度生物活性的糖蛋白,在同种动物细胞上具有广谱抗病毒活性。根据IFN-γ蛋白的氨基酸序列、细胞来源以及它们所结合受体的不同,将其分为Ⅰ型I...
- 马魁
- 关键词:干扰素基因克隆单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 猪胸膜肺炎放线杆菌Apx毒素的研究进展
- 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆茵(Actinobaeillus pleuropneumoniae APP)引起的细菌性呼吸道传染病,该病的流行给世界养猪业带来了巨大的经济损失,Apx(aetinbaeiilus pl...
- 张欣罗满林马魁
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌APX毒素
- 文献传递
- 牛IFN-γ基因的原核表达及单克隆抗体的研制
- 本研究参考GenBank中牛IFN-γ的cDNA基因序列,设计合成了一对含酶切位点的引物,PCR扩增出不含信号肽的IFN-γ基因,克隆进pMD18-T Simple Vector,将测序正确的目的基因插入表达载体pET-...
- 马魁房红莹周荣罗满林张欣陈钜豪崔敏
- 关键词:干扰素牛血清IFN-Γ基因单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 猪胸膜肺炎放线杆菌Apx毒素的研究进展
- 2006年
- 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的细菌性呼吸道传染病。Apx毒素(actinbacillus pleuropneumoniae toxin)是由胸膜肺炎放线杆菌分泌的一类溶血毒素,在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中,Apx毒素起了重要的作用。
- 张欣马魁罗满林
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌APX毒素
- 猪胸膜肺炎放线杆菌Apx毒素的研究进展
- 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(ActinobacilluspleuropneumoniaeAPP)引起的细菌性呼吸道传染病,该病的流行给世界养猪业带来了巨大的经济损失,Apx(actinbacilluspleur...
- 张欣罗满林马魁
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌APX毒素
- 文献传递
- 牛分枝杆菌ESAT-6基因和CFP-10基因在大肠杆菌中的融合表达被引量:5
- 2008年
- 以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得了ESAT-6和CFP-10两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)将ESAT-6基因和CFP-10基因通过(G1y4Ser)3接头连接,得到了融合基因。将融合基因片段先克隆于pMD18-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a(+)中,通过限制性内切酶消化、菌液PCR鉴定、序列分析证实得到含预期序列的重组质粒pET-ESAT-6-CFP-10;该质粒转化BL21(DE3);经IPTG诱导,表达出了40ku的融合蛋白;用Ni螯合层析方法纯化该蛋白,经SDS-PAGE检测,出现了清晰的单一条带;Western-blotting试验结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应。结果表明,ESAT-6基因和CFP-10基因在大肠杆菌中融合表达成功并具有良好的反应原性。
- 房红莹马魁张欣崔敏陈钜豪蒋启荣刘付启荣罗满林
- 关键词:牛分枝杆菌