高丰厚
- 作品数：51 被引量：124H指数：6
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 冬凌草甲素对神经母细胞瘤抗肿瘤的作用研究被引量：3
- 2016年
- 目的在体内体外水平探讨冬凌草甲素(oridonin)对神经母细胞瘤的抗肿瘤作用。方法 CCK-8法检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;AO/EB双荧光染色后荧光显微镜观察细胞凋亡情况;免疫印迹检测细胞内活化的caspase-3和剪切的PARP表达水平;构建SHSY-5Y神经母细胞裸鼠异种移植瘤模型,Ki-67免疫组化染色分析冬凌草甲素对肿瘤组织增殖的影响。结果冬凌草甲素作用HSY-5Y和SK-N-MC细胞24h后,可以剂量依赖性抑制细胞增殖。不同浓度冬凌草甲素处理24h后AO/EB双荧光染色显示,随着药物浓度增加细胞凋亡明显增多。免疫印迹结果证实冬凌草甲素可以浓度依赖性增加活化的caspase-3和剪切的PARP蛋白的表达。冬凌草甲素处理组裸鼠移植瘤体积增量显著小于对照组,Ki-67免疫组化显示冬凌草甲素处理组肿瘤组织增殖细胞比率较对照组显著降低。结论冬凌草甲素可以抑制SHSY-5Y和SK-N-MC细胞增殖并诱导其凋亡,并在动物水平抑制裸鼠移植瘤的生长。
- 张李迪高丰厚姜斌
- 关键词：冬凌草甲素神经母细胞瘤
- 脂联素受体2在糖尿病大鼠肝脏中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的探讨脂联素受体2在1型和2型糖尿病大鼠肝脏中的表达差异以及与糖尿病发病的可能机制的关系。方法 30只SD大鼠分为3组:对照组(con),腹腔注射等体积量枸橼酸缓冲液;1型糖尿病组(1-DM):一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素60 mg/kg;2型糖尿病组(2-DM):大鼠高脂饲料喂养1个月,禁食12 h后腹腔注射低剂量链脲佐菌素35 mg/kg,继续高脂饮食喂养。采用ELISA试剂盒检测血清胰岛素和脂联素水平,免疫组化法分析肝脏脂联素受体2(Adipo R2)的表达,HE染色观察各组肝脏病理改变。结果糖尿病组大鼠血糖均高于对照组,与con组(8239±2259)ng/ml比较,1-DM组血清脂联素降低[(5266±1985)ng/ml,P<0.05],肝Adipo R2表达无明显改变[(13.39±3.09)%,(11.92±5.62)%,P﹥0.05];与con组(8239±2259)ng/ml和1-DM组(5266±1985)ng/ml比较,2-DM组血清脂联素(3533±1048)ng/ml降低(P<0.05),肝Adipo R2表达升高(69.76±10.8)%,P<0.01,且有脂肪变性等损伤。结论肝Adipo R2在1-DM大鼠肝脏的表达与正常组无异,在2-DM大鼠肝脏高表达,与2-DM肝脏的损伤和脂代谢异常相关。
- 郭竹英王世婷陈雯婷徐芒华高丰厚
- 关键词：脂联素受体脂联素1型糖尿病2型糖尿病
- NVP-BEZ235联合用药抗肿瘤的研究进展被引量：4
- 2016年
- NVP-BEZ235是ATP竞争性的PI3K/m TOR双靶点抑制剂,可以通过周期阻滞和凋亡诱导作用在体外水平有效抑制肿瘤细胞的增殖。然而,临床前动物实验发现NVP-BEZ235单药治疗的抗肿瘤效果并不理想。但是,NVPBEZ235与多种抗肿瘤药物联合应用时可以产生强大的协同效应,以NVP-BEZ235为基础的联合化疗方案可能成为肿瘤治疗的新策略。
- 张李迪刘珍姜斌高丰厚
- 关键词：联合化疗肿瘤
- Polo样蛋白激酶1参与有丝分裂调控的研究进展被引量：3
- 2015年
- 作为细胞周期的关键环节,有丝分裂过程受到严格而精细的调控,随着对有丝分裂调控的探讨与拓展,也逐渐加深了人们对生命本质的理解。研究发现Polo样蛋白激酶1(PLK1)参与细胞有丝分裂调控的各环节,该文拟归纳总结Plk1在有丝分裂中诸如CDK1-Cyclin B复合物的激活、纺锤体形成、染色体分离和胞质分裂这些过程中的研究进展,并描绘PLK-1在有丝分裂调控中的作用与意义,为进一步深入探讨PLK-1与有丝分裂调控指出可能的发展方向。
- 赫玮高丰厚
- 关键词：有丝分裂
- 非小细胞肺癌细胞中TrxR1的表达及其效应被引量：9
- 2015年
- 目的探讨硫氧还蛋白还原酶-1(thioredoxin reductase-1,TrxR1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,及其在干预肺癌细胞中所产生的效应。方法应用免疫组化法检测118例NSCLC和27例正常肺组织中TrxR1的表达,并分析其与NSCLC临床病理参数的关系;应用半定量RT-PCR法检测13例NSCLC和4例正常肺组织中TrxR1 mRNA的水平。Western blot法检测正常肺上皮细胞和不同肺癌细胞中TrxR1蛋白的水平;半定量RT-PCR法检测正常肺上皮细胞和不同肺癌细胞中TrxR1 mRNA的水平。沉默A549细胞中TrxR1的表达,并比较沉默前后细胞的增殖情况。结果 NSCLC的免疫组化及半定量RT-PCR结果显示TrxR1在癌细胞中过表达(P<0.05);使用shRNA沉默肺癌细胞中TrxR1的表达后,细胞增殖明显降低。结论 TrxR1 mRNA和蛋白在NSCLC中过表达,提示TrxR1有可能是NSCLC的靶标分子。
- 冉冬梅高丰厚
- 关键词：肺肿瘤非小细胞肺癌细胞增殖
- 氯沙坦改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的机制研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨氯沙坦改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的主要作用机制。方法以地塞米松诱导3T3-L1脂肪细胞,建立胰岛素抵抗细胞模型,根据细胞模型添加干预药物的不同分为模型对照组(不添加任何药物)、氯沙坦组(分别给予1、10、100μmol/L氯沙坦干预48 h)和wortmannin+氯沙坦组,wortmannin+氯沙坦组以100 nmol/L的磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin预处理20 min后再加入100μmol/L氯沙坦干预48 h。观察脂肪细胞体积的变化,采用葡萄糖氧化酶法检测细胞培养上清液中葡萄糖的浓度,采用Western blotting分析脂肪细胞中PI3K和胰岛素受体底物1(IRS-1)的表达以及IRS-1丝氨酸磷酸化水平。结果与模型对照组比较,氯沙坦组脂肪细胞体积明显缩小(P<0.01),细胞培养上清液中葡萄糖的浓度显著降低(P<0.01),PI3K和IRS-1表达明显上升(P<0.01),IRS-1丝氨酸磷酸化水平显著下降(P<0.01)但可被wortmannin阻断。结论氯沙坦可使3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的细胞体积缩小,并增加细胞对葡萄糖的利用,其机制可能与PI3K信号通路有关。
- 刘晓莉潘瑜束金莲高丰厚金惠敏
- 关键词：氯沙坦脂肪细胞胰岛素抵抗
- Wnt3a影响神经干细胞分化的体外研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨Wnt3a对胚胎大鼠海马神经干细胞(NSCs)体外分化的影响。方法采用机械分离、无血清传代培养法从胎鼠海马中获得NSCs,使用免疫荧光法对其干细胞特性及其受体Fzd3蛋白表达进行鉴定,观察Wnt3a对NSCs体外分化的影响。结果海马NSCs表达特异性标志物巢蛋白及胞膜蛋白Fzd3;体外诱导分化,Wnt3a处理组神经元及星形胶质细胞分化的比例分别为11.25%±0.62%和56.26%±4.82%,而对照组则为8.54%±0.48%和68.42%±5.54%;组间分化差异具有统计学意义(P<0.05)。结论体外环境下Wnt3a能够促进NSCs向神经元分化,并抑制其向星形胶质细胞分化。
- 王永志陈二涛高丰厚冯东福毕永延
- 关键词：神经干细胞海马体外培养WNT3A分化
- 去细胞羊膜负载毛囊干细胞修复裸鼠全层皮肤缺损被引量：3
- 2010年
- 目的利用去细胞羊膜负载毛囊干细胞修复裸鼠全层皮肤缺损。方法体外分离和培养人毛囊干细胞,取经慢病毒介导的绿色荧光蛋白(pGC FU-GFP-Lentiviru)标记后第4代毛囊干细胞接种于去细胞羊膜上;负载后第7天,HE染色光学显微镜观察细胞黏附生长情况。于18只C57BL/6裸鼠背部制作全层皮肤缺损创面,并根据不同的处理方式分为实验组(将负载毛囊干细胞的去细胞羊膜植入裸鼠全层皮肤缺损创面)、去细胞羊膜移植+干细胞注射组(将去细胞羊膜覆盖创面后羊膜下注射5×106毛囊干细胞)和去细胞羊膜移植组(去细胞羊膜单独移植),每组6只。分别于移植后第7、14、21、28天,测量各组创面面积并计算创面收缩率。移植后第28天,荧光显微镜观察创面组织绿色荧光蛋白(GFP)表达,HE染色光学显微镜观察新生皮肤结构特征。结果去细胞羊膜负载毛囊干细胞后第7天,HE染色光学显微镜观察发现,细胞连接成片状覆盖于去细胞羊膜表面。实验组和去细胞羊膜移植+干细胞注射组移植后各时点的创面收缩率均显著小于去细胞羊膜移植组(P<0.05)。移植后第28天,荧光显微镜观察显示实验组创面表皮层GFP表达阳性;HE染色光学显微镜观察发现实验组创面组织表皮层明显增厚,有类似毛囊样结构生成。结论去细胞羊膜负载毛囊干细胞可用于修复裸鼠全层皮肤缺损。
- 胡孝辉杨鹏高高丰厚方勇
- 关键词：毛囊干细胞羊膜皮肤缺损毛囊干细胞羊膜皮肤缺损
- 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对脂多糖致大鼠急性肺损伤的保护作用被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠急性肺损伤模型,随机分为对照组、rhTNFR:Fc组、LPS组和rhTNFR:Fc+LPS组。给药后记录各组大鼠死亡情况,测定肺组织湿重/干重比,HE染色观察肺组织病理学改变,检测血清TNF-α含量及其生物活性。结果:LPS注射后大鼠死亡率及肺湿重/干重比显著高于对照组(P<0.05),HE染色可见大鼠肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,血清TNF-α含量及生物活性增高;rhTNFR:Fc+LPS组大鼠死亡率降低,肺组织病理损伤明显减轻,血清TNF-α生物活性显著低于LPS组(P<0.05)。结论:rhTNFR:Fc通过中和TNF-α,降低TNF-α生物活性,有效减轻LPS引起的大鼠急性肺损伤。
- 王世婷郭竹英徐芒华矫强高丰厚
- 关键词：脂多糖急性肺损伤肿瘤坏死因子-ΑFC
- 中波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞衰老及机制研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨中波紫外线(UVB)对人皮肤成纤维细胞的诱导衰老作用及可能机制。方法使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,通过观察不同剂量UVB照射后的细胞形态学改变以及β-半乳糖苷酶(β-gal)细胞衰老染色情况,确定后续实验诱导皮肤成纤维细胞衰老的UVB单次照射剂量。于经确定剂量UVB照射后的不同时点(12、24、48、72h)收集细胞及其细胞培养上清液,Western blotting检测诱导衰老的皮肤成纤维细胞衰老相关蛋白P16表达;ELISA法检测诱导衰老细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1、3(MMP1、MMP3)表达。结果经40mJ/cm2 UVB单次照射的人皮肤成纤维细胞呈现典型的衰老细胞形态学改变,β-gal细胞衰老染色阳性细胞百分比为(88.75±5.32)%,确定诱导衰老UVB单次照射剂量为40mJ/cm2。Western blotting显示,诱导衰老皮肤成纤维细胞P16蛋白表达随UVB照射时间的延长而明显升高;ELISA法检测发现诱导衰老细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达随UVB照射时间的延长而明显减少,MMP1和MMP3表达则随UVB照射时间的延长而显著增加。结论 UVB照射能诱导人皮肤成纤维细胞发生衰老,其机制可能与细胞胶原合成减少而降解增加有关。
- 胡孝辉高丰厚方勇
- 关键词：人皮肤成纤维细胞中波紫外线
