黄小琴
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 刚地弓形虫多表位抗原基因在转基因番茄中的表达研究被引量：8
- 2008年
- 目的获得稳定表达弓形虫多表位抗原基因(Tg-MAG)的转基因番茄植株。方法用植物组成型启动子E35S、番茄果实特异性E82.2启动子以及E35S-E81.1复合式启动子驱动弓形虫Tg-MAG的植物表达载体pC35MG、pCE2MG与pC35E1MG,以农杆菌介导的T-DNA转化法转化番茄子叶和下胚轴;经芽诱导、伸长以及生根的连续性抗性筛选和培育,获得Tg-MAG转基因番茄植株,练苗后移栽花盆中培育至开花、结果。用PCR、RT-PCR、蛋白质印迹(Western blotting)分别对Tg-MAG转基因植株进行DNA、RNA、蛋白水平的鉴定。结果获得的Tg-MAG转基因番茄植株经PCR和RT-PCR鉴定,得到预期360bp的Tg-MAG片段,经Western blotting筛选获得能正确表达预期相对分子质量(Mr)为11900的Tg-MAG重组蛋白,且8株具有免疫反应性,其中有2株于番茄果实中所表达的重组蛋白能与抗弓形虫速殖子主要表面抗原1(SAG1)单克隆抗体K7H3发生强免疫反应。结论获得Tg-MAG转基因番茄株系,在其果实中成功表达具有良好免疫反应性的Tg-MAG重组蛋白。
- 周晓红黄小琴钟任佳朱巧珍赵莹郭瑜琪陈晓光
- 关键词：刚地弓形虫转基因番茄
- 构建医学寄生虫学素质教育新体系的探索被引量：1
- 2008年
- 以激励学生成才为宗旨,在引导学生认知基础上将科学与人文精神相互渗透,重视生命体验,寓素质教育于医学专业知识教育中。教学中强化三方面有效整合：牢固把握课堂师生互动,审慎选择以建构立体化教学内容,精心组合教学手段。教学效果受到学生和教学督导团专家高度评价,也呈示医学生对渗透人文关怀的医学课程素质教育的渴求。
- 周晓红黄小琴李华王春梅陈晓光
- 关键词：医学寄生虫学教学方法素质教育医学生
- 番茄遗传转化筛选及其子代选育体系的优化研究被引量：8
- 2008年
- 目的以弓形虫多表位抗原基因(MAG)和截短的速殖子主要表面抗原1(tSAG1)为插入子建立优化的番茄遗传转化筛选及其子代选育体系。方法从培养基激素配方、番茄外植体选择等方面进行番茄再生体系的优化。自番茄品种、外植体选材、培养温度、培养基激素配方以及在共培养时是否加入乙酰丁香酮(AS)等进行以农杆菌介导的番茄基因组稳定转化体系的优化。采用不同浓度卡那霉素抗性压力对转基因小苗进行根筛选诱导的比对。转基因番茄幼苗练苗移栽开花结果后收集种子,以无菌播种卡那霉素抗性筛选法进行番茄转基因植株子代的选育。结果子叶较下胚轴具有更强的再生能力,在优化的番茄再生培养基ZB3中,番茄子叶可达到98%(59/60)的高频再生芽萌发率。番茄的转化体系优化,培养基激素配方、培养温度是番茄转化芽诱导过程中的关键影响因素,(23±1)℃能显著提高转化芽的萌发率,AS的施加亦能显著提高番茄转化芽萌发率,Zhongshu No.5番茄子叶于ZB2培养基和(23±1)℃的条件下转化芽萌发率为35%(28/81)。80mg/L卡那霉素抗性进行HK种番茄转化小苗根的筛选诱导比较适宜,生根率为48%(31/65)。抗性苗移栽成活,正常开花结果的转化植株117株。无菌播种,卡那霉素浓度≥100mg/L时能显著抑制非转基因番茄种子的发育尤其是根的萌发与植株的伸长,根出现紫化且无侧根生长;将转基因番茄种子置于150mg/L卡那霉素抗性浓度下培养,能有效进行转基因植株后代遗传分离的选育。结论成功建立番茄高频再生体系以及优化的番茄转化、抗性筛选及其转基因植株子代的选育体系。
- 应彩云黄小琴郭瑜琪钟莉莉刘艳黎事伦顾晓敏周晓红
- 关键词：转基因番茄弓形虫
