丁涛
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会科技发展基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SiRNA干扰Notch信号通路胞外分子β1,3-N-乙酰糖基转移酶对哮喘时T细胞分化的影响被引量：1
- 2011年
- 目的在支气管哮喘大鼠模型中采用siRNA干扰肺CD4+T细胞β1,3-N-乙酰糖基转移酶(Fringe)亚型Rfng基因的表达,探讨Rfng对哮喘T细胞分化的影响。方法用卵白蛋白(OVA)致敏并激发建立哮喘大鼠模型。提取哮喘大鼠肺T细胞,并用免疫磁珠分离纯化CD4+T淋巴细胞。用Rfng特异的siRNA片段干扰哮喘大鼠CD4+T淋巴细胞高表达的Rfng基因。定量PCR和Western blot检测Rfng的表达。定量PCR检测Th1/Th2型细胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-5,以及核转录因子T-bet、GATA3。ELISA检测细胞培养上清液中的Th1/Th2型细胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-5。结果 siRNA干扰哮喘大鼠肺CD4+T淋巴细胞后,定量PCR和Western blot检测发现siRNA干预组中RfngmRNA和蛋白表达明显降低。在siRNA干预组中,Th1型细胞因子IFN-γ、IL-12以及上游核转录因子T-bet的mRNA表达明显升高,Th2型细胞因子IL-4、IL-5以及上游核转录因子GATA3的mRNA表达明显降低。ELISA检测细胞培养上清液中IFN-γ、IL-12明显升高,IL-4、IL-5明显降低。结论 Rfng基因表达的改变影响了T细胞的分化,可能与支气管哮喘的发病有关。
- 顾问郭雪君丁涛
- 关键词：哮喘CD4+T细胞
- 哮喘大鼠β1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶的表达与Tregs
- 目的研究支气管哮喘大鼠肺CD4T细胞β1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶的表达以及调节性T细胞的一些相关指标,探讨Fringe基因、Tregs与哮喘发病的关系。Notch信号通路高度保守广泛存在。编码β1,3-N-乙酰葡萄...
- 顾问郭雪君丁涛
- 文献传递
- Notch信号通路胞外调控分子Fring对哮喘T细胞分化的影响
- 研究背景Notch是一个单次跨膜受体蛋白,研究表明Notch信号通路在T细胞分化和发育的各个阶段均发挥重要作用。我们研究小组前期研究显示Notch1的mRNA和蛋白在哮喘病人和动物模型中均有异常高表达,但我们对Notch...
- 顾问郭雪君丁涛
- 文献传递
- 哮喘大鼠肺T细胞中组蛋白去乙酰基酶1的表达及对组蛋白修饰的影响被引量：2
- 2010年
- 目的明确哮喘大鼠肺T淋巴细胞中的组蛋白去乙酰基酶1(HDAC1)蛋白表达水平及组蛋白整体乙酰化和甲基化水平,探讨其在哮喘发病机制中的作用。方法 16只Wistar大鼠随机分为对照组和哮喘组(每组8只),用卵白蛋白(OVA)致敏并激发建立哮喘大鼠模型。通过哮喘临床表现、气道高反应性测定、肺组织HE染色、血清和BALF中细胞因子IL-4、γ干扰素(IFN-γ)及IgEELISA测定,判断哮喘大鼠模型是否成功。分离肺T细胞并进行纯度鉴定。Western blot检测肺T细胞HDAC1蛋白表达水平,组蛋白H3、H4整体乙酰化,以及H3k9整体二甲基化水平。结果与对照组比较,哮喘组HDAC1蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),组蛋白H3、H4整体乙酰化水平和H3k9整体二甲基化水平差异均无统计学意义。结论肺T细胞HDAC1可能参与了支气管哮喘的发病环节,组蛋白整体乙酰化和甲基化水平与哮喘发病无明显相关性,HDAC1对组蛋白修饰作用可能是一个基因转录特异性事件。
- 李成业郭雪君甘丽杏丁涛顾问
- 关键词：哮喘T细胞组蛋白乙酰化组蛋白甲基化
- 哮喘大鼠β1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶的表达与Tregs
- 目的：本研究通过检测支气管哮喘大鼠模型中Radical Fringe的表达以及一些Tregs的相关指标，探究Notch的胞外调节分子Fringe是否与Tregs有一定关系，旨在阐明哮喘的发病机理。方法：1.哮喘大鼠模型建...
- 顾问郭雪君丁涛
- 关键词：哮喘发病机理
- 哮喘大鼠肺CD4^+T细胞Notch1基因启动子甲基化的研究被引量：6
- 2011年
- 目的研究支气管哮喘模型大鼠肺CD4+T细胞中的Notch1基因mRNA表达水平、Notch1基因启动子区DNA甲基化水平及其甲基化改变的位点。方法 20只Wistar大鼠随机分为对照组和哮喘组(每组10只),哮喘组用卵白蛋白(OVA)致敏并激发的方法建立哮喘大鼠模型。免疫磁珠分离肺CD4+T细胞并进行纯度鉴定。Real-time PCR检测肺CD4+T细胞Notch1基因mRNA表达水平,重亚硫酸盐测序检测Notch1基因启动子区DNA甲基化水平。结果哮喘组大鼠肺CD4+T细胞中Notch1基因mRNA表达水平为对照组的(2.254±0.403)倍(P<0.01)。哮喘组大鼠肺CD4+T淋巴细胞Notch1基因启动子区DNA 10个位点整体甲基化水平低于对照组(0.150±0.108比0.300±0.667,P<0.01)。结论哮喘大鼠肺CD4+T细胞Notch1基因DNA低甲基化可能参与了Notch1基因的转录调控,增高了Notch1基因的表达量,从而参与了哮喘的发病。
- 丁涛郭雪君顾问李成业甘丽杏
- 关键词：哮喘T细胞NOTCH1DNA甲基化
- SiRNA干扰Notch信号通路胞外分子Fringe对哮喘时T细胞分化的影响
- 目的：用SiRNA干扰支气管哮喘模型大鼠肺CD4+T细胞中β 1，3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶(Fringe)的一种亚型Rfng的表达，探讨Rfng对哮喘时T细胞分化的影响。方法：1.哮喘大鼠模型建立：采用随机对照原则将...
- 顾问郭雪君丁涛
- 关键词：T细胞分化气道阻力
- 哮喘大鼠beta-1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶的表达和调节性T细胞
- 目的Notch信号通路高度保守且广泛存在。编码β1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶的基因是Fringe,它的作用是糖基化修饰Notch受体的胞外部分。哺乳动物有三种Fringe,Lunatic fringe(Lfng)、R...
- 顾问郭雪君丁涛
- 文献传递
- 哮喘大鼠肺CD4+T细胞Notch1基因启动子甲基化的研究
- 目的明确支气管哮喘模型大鼠肺CD4T细胞细胞中的Notch1基因mRNA表达水平,探讨哮喘大鼠肺CD4+T淋巴细胞Notch1基因启动子区DNA甲基化水平,明确哮喘大鼠肺CD4T淋巴细胞Notch1基因启动子区DNA甲基...
- 丁涛郭雪君顾问
- 文献传递
- SiRNA干扰Notch信号通路胞外分子Fringe对哮喘时T细胞分化的影响
- 目的用SiRNA干扰支气管哮喘模型大鼠肺CD4+T细胞中β1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶(Fringe)的一种亚型Rfng的表达,探讨Rfng对哮喘时T细胞分化的影响。方法1.哮喘大鼠模型建立:采用随机对照原则将40只...
- 顾问郭雪君丁涛
- 文献传递
