何建
- 作品数：105 被引量：249H指数：8
- 供职机构：青海省地方病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学一般工业技术更多>>
- 青海省地方病防治机构实验室仪器设备档案的建立与管理被引量：1
- 2019年
- 实验仪器设备档案逐渐成为实验室仪器设备管理的一个重要环节和组成部分,建立和完善实验室仪器设备档案管理对提高青海省地方病防治机构的地方病防治和科研水平具有举足轻重的作用。本文结合青海省地方病防治机构实验室仪器设备管理的实际工作情况,介绍了实验室仪器设备档案的建立、档案管理的基本内容,并提出了相应的管理措施。
- 万惠赵忠智何建李胜柏吉祥贾慧霞祁芝珍魏柏青
- 关键词：实验室档案管理
- 青海省海西州鼠疫自然疫源地分离鼠疫菌株CRISPR基因分型研究
- 2023年
- 目的利用DNA规律聚集簇间隔短回文重复序列(Clustered regularlyinter-spaced short palindromic repeats CRISPR)分型方法,全面探索海西地区分离鼠疫菌株是否存在新的基因型,为鼠疫菌溯源鉴定及流行病学分析提供理论依据。方法分离培养海西地区1961-2009年间取自鼠疫患者、媒介昆虫及中间宿主的50株鼠疫菌后提取其DNA,利用PCR技术,对鼠疫菌CRISPR分型中的YPa、YPb、YPc 3个位点进行扩增,测定其扩增产物核酸序列并进行分析,将测得CRISPR序列与文献最新报道的CRISPR Dictionary和NCBI数据库进行比对,找出新的CRISPR spacer阵列,基因型别,分析其进化关系,最终确定青海省海西州喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫菌株的CRISPR基因库。结果50株鼠疫菌在3个CRISPR位点上共有24种spacer,其中YPa位点上有13种、YPb位点8种、YPc位点3种,b51是新发现的spacer。50株鼠疫菌可被分为16个基因型,共归为6大CRISPR类群。Ca35′是该地区主要流行类群;Ca7是流行最为广泛的类群;Cb4和Cb4′仅存在于格尔木唐古拉地区。结论青海省海西州地区鼠疫菌种群结构复杂,Ca35′、Ca7、Cb4′是流行最普遍的种群,G26-a1′型、G22型、G9型、G26-a1′a4-为主要基因型,呈现显著的地区分布特征,今后可以利用CRISPR基因分型技术加强该地区鼠疫溯源检测和防控工作。
- 张琪张琪代瑞霞何建靳娟李胜施昊旻艾丽孜热·艾尼瓦尔廖星豪张雪飞
- 关键词：鼠疫菌基因分型
- 鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度测定方法的建立与应用被引量：3
- 2020年
- 目的测定11种抗菌药物对鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),建立鼠疫菌MIC测定方法,掌握常用抗生素对鼠疫菌的抑菌范围,为鼠疫的临床治疗提供基线数据。方法根据美国临床和实验室标准协会(Clinical Labor Standard Institution,CLSI)药敏试验方法中的琼脂稀释法,分别测定氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明(甲氧苄啶-磺胺甲恶唑)、硫酸卡那霉素、硫酸链霉素、头孢曲松钠、氨苄青霉素钠、氯霉素、盐酸壮观霉素、头孢呋辛钠、盐酸四环素共11种抗菌药物对118株鼠疫菌的MIC,并计算MIC50、MIC90(能抑制50%、90%细菌生长的最低药物浓度)。以纸片扩散法的检测结果作为对照观察两者的一致性。118株鼠疫菌分离自青海省鼠疫自然疫源地,由青海省地方病预防控制所保存。结果检测的118株鼠疫菌,未发现具有单个或多个抗菌药物抗性的菌株,与纸片扩散法结果一致,并获得11种抗菌药物对118株菌的MIC50、MIC90。结论成功建立了鼠疫菌MIC测定方法,该方法能高通量测定抗菌药物对鼠疫菌的MIC,评价鼠疫菌对抗生素的敏感性,是一种高效、经济、实用的实验手段。
- 何建杨晓艳辛有全靳娟李胜张琪柏吉祥吴海莲金泳张雪飞代瑞霞魏柏青
- 关键词：最低抑菌浓度
- 左氧氟沙星治疗人工感染鼠疫豚鼠的疗效报告
- 2022年
- 通过观察左氧氟沙星治疗人工感染鼠疫豚鼠的疗效,为鼠疫的防治用药提供参考依据。根据《中华人民共和国国家药典》成人剂量和常用实验动物及人的体表面积比例剂量换算,豚鼠所用药物的剂量为40 mg/kg/d,用生理盐水制成水剂,于攻毒24 h后进行皮下注射给药。连续用药9 d后停药,医学观察9 d后将动物处死并取肝、脾做鼠疫细菌学检验。结果显示,左氧氟沙星治疗人工感染鼠疫豚鼠的治愈率为100%,对照组均特异性死亡。说明左氧氟沙星对人工感染鼠疫动物的治疗效果显著,对今后鼠疫预防和治疗用药的选择提供有力的佐证。
- 辛有全何建杨晓艳李胜靳娟张琪辛文媛张丽李广辉代瑞霞
- 关键词：左氧氟沙星鼠疫疗效
- 青海省自然疫源性病区小型兽类空间分布及分子鉴定研究被引量：1
- 2020年
- 目的 了解青海省自然疫源性病区小型兽类空间分布,并以线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(COI)基因作为分子标记,对捕获的小型兽类进行分子水平的物种鉴定。方法 2009 - 2016年,在青海省6个州的16个市(县),采集小型兽类标本为研究对象,分析小型兽类地区分布、不同海拔分布、生态环境类型分布;采用PCR扩增小型兽类的COI基因部分片段序列(长度约650 bp),并进行同源性比较、遗传距离和系统发育分析。结果 共捕获小型兽类1 631只,分别隶属于3目7科21属30种;其中啮齿动物926只,分别隶属于5科19属25种,占56.78%。格尔木市采集的小型兽类数量最多(313只),2 800 ~ < 3 000 m的海拔段为小型兽类分布最高峰(532只),沙地草原捕获数量最多(612只)。共成功扩增292只小型兽类COI基因,同源性比对与目标序列一致。种内遗传距离为0.01% ~ 2.90%,种间遗传距离为4.00% ~ 12.00%,种间遗传距离大于种内遗传距离;属间遗传距离为13.00% ~ 21.00%,科间遗传距离为22.00% ~ 25.00%。邻接法(NJ)系统发育树显示,同种个体聚为有很高支持度的单一分支共形成20个,置信度为98% ~ 100%。结论 青海省小型兽类空间分布受地区、海拔、生态环境等自然地理因素的综合影响,且分子鉴定法可弥补形态学鉴定中的不足。
- 李海龙魏有文何建赵延梅杨汉青马英
- 关键词：小型兽类分子鉴定
- 青海省海西州鼠疫自然疫源地鼠疫菌病原学及耐药、耐消毒剂基因特征分析被引量：5
- 2019年
- 目的 分析青海省海西州鼠疫自然疫源地鼠疫菌株生物学特性,为鼠疫防治提供科学依据。 方法 对1957 - 2011年在青海省海西州分离的181株鼠疫菌进行生化试验、毒力因子鉴定、质粒分析、差异片段(DFR)分型及耐药、耐消毒剂基因检测研究。从181株鼠疫菌中选取79株进行毒力测定,并按毒株判定标准[最小致死量(MLD)≤10 000为强毒菌,10 000 < MLD < 100 000为中等毒力菌,MLD≥100 000为弱毒菌]进行分类。 结果 181株鼠疫菌的生物型均为古典型,生态型均为青藏高原型。81.22%(147/181)的鼠疫菌株含有4个毒力因子(F1、PstⅠ、VW、Pgm);63.54%(115/181)的鼠疫菌株携带相对分子质量(Mr)为6 ×10^6、45 ×10^6、52 ×10^6的质粒,31.49%(57/181)的鼠疫菌株携带Mr为6 ×10^6、45 ×10^6、65 ×10^6的质粒。DFR分为8个基因组型,分别为8型(109株)、32型(33株)、5型(20株)、1b型(14株)、44型(2株)、7型(1株)、37型(1株)、49型(1株);未发现有耐链霉素、磺胺类药、β-内酰胺类抗菌药物及消毒剂等相关基因的菌株。79株进行小鼠毒力测定的鼠疫菌中,有75株菌的MLD≤10 000,即为强毒菌,占94.94%(75/79)。 结论 青海省海西州鼠疫自然疫源地分离的鼠疫菌具备青藏高原鼠疫病原体特性,鼠疫菌的毒力强,且不具有耐药及耐消毒剂相关基因的特征。
- 李胜杨晓艳何建李存香熊浩明辛有全靳娟张琪柏吉祥魏柏青代瑞霞
- 关键词：病原学
- 左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的效果观察
- 2021年
- 目的观察左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的效果。方法选择SPF级豚鼠70只,雌性,体重为250~300 g,按体重采用随机数字表法分为7组,每组10只,分别为左氧氟沙星24、48、72 h组,莫西沙星24、48、72 h组(开始给药时间点分别为感染鼠疫菌24、48、72 h)和对照组(未进行治疗)。各组豚鼠皮下注射鼠疫菌141株[1×107菌落形成单位(CFU)菌悬液]制备实验感染鼠疫模型,参照《中华人民共和国国家药典》成人剂量,用动物折算系数法换算成豚鼠每日用药剂量进行治疗,每只豚鼠左氧氟沙星、莫西沙星给药量分别为12.0、9.6 mg/d,连续用药9 d。停药观察9 d后处死豚鼠,进行细菌学检验和病理学观察,并计算治愈率。结果左氧氟沙星24、48、72 h组治愈率分别为100.0%(10/10)、70.0%(7/10)、6/6,莫西沙星24、48、72 h组治愈率分别为100.0%(10/10)、100.0%(10/10)、5/7,对照组治愈率为0(0/10)。与对照组比较,左氧氟沙星24、48、72 h组和莫西沙星24、48、72 h组治愈率均明显较高(P均<0.05);相同开始给药时间点的两种药品间治愈率比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的效果理想,特殊情况下可用于鼠疫治疗。
- 何建辛有全杨晓艳李胜张琪靳娟杨建国熊浩明代瑞霞
- 关键词：疗效观察
- 青海省果洛藏族自治州鼠疫耶尔森菌病原学分析及耐药相关基因检测被引量：2
- 2019年
- 目的对青海省果洛藏族自治州(果洛州)鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)进行病原学分析及耐药相关基因检测,为该地区的鼠疫防治提供科学依据。方法对1978-2016年间青海省果洛州分离的13株鼠疫菌进行糖醇类酵解试验、毒力测定、毒力因子检测、质粒分析及鼠疫菌基因差异区段(DFR)分型等研究,并根据美国国立生物信息中心(NCBI)公布的耐氨基糖苷类链霉素strA、strB基因、耐β-内酰胺类抗菌药物tem、ctx-m基因和耐磺胺类药物sul1、sul2基因序列,在每个基因上设计1对引物,以该13株鼠疫菌DNA为模板分别进行上述6个耐药基因的PCR扩增,以检测其是否携带耐药相关基因。结果根据生化分型指标,13株被试菌株中9株为青藏高原型,4株为祁连山型。毒力测定结果显示,13株被试菌株均为强毒级别的鼠疫菌,13株菌中有11株具备鼠疫菌特有的4个毒力因子,被试菌株携带相对分子质量分别为6×106、45×106、65×106和6×106、45×106、52×106的2种质粒谱。DFR分为4个基因组型,5型(7株)、8型(4株)、36型和01b型(各1株)。耐药基因检测结果显示,阴性对照和阳性对照均成立的情况下,所测13株鼠疫菌的PCR检测结果均为阴性,未发现耐链霉素、耐β-内酰胺类抗菌药物及耐磺胺类药物的菌株。结论青海省果洛州分离的鼠疫菌具备青藏高原鼠疫病原体特征,鼠疫菌的毒力强,但尚未出现耐抗菌药物菌株,但仍需加强鼠疫监测和鼠疫防治知识宣传力度,严防动物间鼠疫波及人间。
- 吴海莲吴海生何建杨晓艳辛有全李存香靳娟李胜张琪代瑞霞祁芝珍
- 关键词：鼠疫菌病原学耐药基因
- 青海黄南州鼠疫自然疫源地鼠疫菌耐药相关基因的检测被引量：1
- 2019年
- 目的了解黄南州鼠疫疫源地分离的鼠疫菌是否存在耐药相关基因,以指导黄南州的鼠疫防治工作。方法采用聚合酶链反应(PCR)法对30株分离自青海省黄南州鼠疫自然疫源地的鼠疫菌进行耐链霉素基因(str A、str B)、耐β-内酰胺类抗菌药物基因(tem、shv、ctx-m),耐磺胺类药物基因(sull、sul2、sul3)检测。结果 PCR结果显示30株鼠疫菌中尚未发现耐链霉素、磺胺类药、β-内酰胺类等相关基因的菌株。结论黄南州鼠疫疫源地分离的30株鼠疫菌不具有耐药相关基因的特征。
- 任玲玲何建杨晓艳辛有全李胜靳娟张琪柏吉祥魏柏青代瑞霞
- 关键词：鼠疫菌耐药基因
- 中国鼠疫耶尔森菌差异区段分型及其地理分布特征被引量：43
- 2014年
- 目的 研究中国鼠疫耶尔森菌差异区段（DFR）分型及地理分布特征.方法 对分离自中国11个疫源地3 044株鼠疫菌,应用23个DFR和质粒验证（PMT1）PCR扩增,进行鼠疫菌DFR基因组分型及地理分布特征分析.结果 3 044株鼠疫菌共包括52个基因组型,其中19个为主要基因组型、33个为次要基因组型.在以往鉴定的31个基因组型基础上又增加了21个新基因组型.其中增加的3个新基因组型均为主要基因组型,即青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地新增加32型、44型,内蒙古高原长爪沙鼠鼠疫自然疫源地新增加50型.结论 在新增加的21个新基因组型中有3个为主要基因组型,中国鼠疫菌DFR主要基因组型具有明显的地理分布特征.
- 杨晓艳魏柏青靳娟李存香熊浩明辛有全魏荣杰祁美英何建杨瑞馥代瑞霞宋亚军
- 关键词：鼠疫耶尔森菌疫源地
