关国华
- 作品数:58 被引量:97H指数:6
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程文化科学农业科学更多>>
- 高效脂肪酶水解雨生红球藻虾青素酯
- 为提高酶活水平,本实验尝试更换质粒载体和宿主毕赤酵母X-33,以提高ALIP碱性脂肪酶的异源表达效果。摇瓶发酵结果证实,其酶活较以往提高一倍以上,且该脂肪酶对温度及pH的耐受范围均有提高。为解决该菌株不适于在基础盐培养基...
- 杨震黄金金关国华李颖
- 关键词:红球藻脂肪酶水解产物
- 一种葡萄糖代谢脱阻遏、高产虾青素的法夫酵母突变株MK19及其培养方法
- 本发明涉及葡萄糖代谢脱阻遏、高产虾青素的法夫酵母突变株MK19及其培养方法。采用<Sup>60</Sup>Co诱变筛选方法由法夫酵母野生型试验菌株得到本发明的法夫酵母突变株MK19,该法夫酵母突变株MK19经过固体种子活...
- 李颖苗莉莉迟爽关国华王珍芳
- 异源高效表达脂肪酶的重组毕赤酵母
- 本发明公开了一种异源高效分泌表达米黑根毛霉脂肪酶的重组毕赤酵母,上述重组毕赤酵母是通过采用分子生物学技术,引入编码米黑根毛霉脂肪酶自身前导肽的基因并优化目的基因的拷贝数,构建能在巴斯德毕赤酵母表达的载体来获得的。研究表明...
- 李颖黄金金杨震关国华崔迪
- 一种GlnR蛋白结合位点突变的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用
- 本发明涉及微生物领域,具体公开了一种GlnR蛋白结合位点突变的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用。所述耐铵固氮微生物为在类芽孢杆菌属菌株基因组中,将长度为313bp的nif启动子区替换为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸...
- 陈三凤王天舒赵喜云关国华
- 极端耐热木聚糖酶基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的高效表达被引量:16
- 2005年
- 以海栖热袍菌 (Thermotogamaritima)MSB8菌株基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增出木聚糖酶 (XylanaseB)基因 ,将此基因克隆至大肠杆菌表达载体pET_2 8a(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K ,并分别转化大肠杆菌BL2 1和毕赤酵母GS115。该木聚糖酶在大肠杆菌细胞中表达量高 ,但不能分泌 ;而在毕赤酵母细胞的表达产物可分泌至胞外。酶学性质分析表明 ,此酶分子量约为 4 0kD ,其最适反应温度为 90℃ ,最适反应pH值为 6 6 5 ,且在碱性条件下稳定 ,具有重要的工业应用前景。
- 杨梦华李颖关国华江正强
- 关键词:大肠杆菌巴斯德毕赤酵母重组蛋白异源表达
- 新疆棉花枯萎病菌异核体及其不同表型分离子核DNA的差异被引量:3
- 2003年
- 为探索丝状真菌异核体的产生机制,从新疆地区患枯萎病的棉杆中分离出棉花枯萎病菌Fusariumoxysporumf.sp.vasinfectum异核体菌株X515,并自其菌落出现的不同角变处分离出三个不同表型的分离子,X515-Ⅰ、X515-Ⅱ和X515-Ⅲ。选用200种随机引物对它们进行核DNA的RAPD分析,只在OPB-16引物对致病力强的分离子X515-Ⅰ核DNA的PCR扩增产物中出现了一条354bp的差异片段,其部分碱基序列与Fusariumoxysporumf.sp.lycopersici的短散布序列(Foxy)末端序列的相似性达88%。本研究结果提示,随着所采用引物数量的增加,可有望找出异核体及其不同分离子之间核DNA的差异,为最终阐明异核体形成的机制提供线索。
- 李颖舒石关国华刘枫李秀玉
- 关键词:转座因子
- 海栖热袍菌脂肪酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 以海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8基因组DNA为模板,扩增了该菌推测的脂肪酶基因。测序分析表明,该基因全序列为780bp。推测编码259个氨基酸,分子量约为 30kDa。将其克隆到表达质粒pE...
- 关国华彭晴王贵利李颖
- 关键词:海栖热袍菌酶基因目的蛋白大肠杆菌
- 一种恒化高密度培养趋磁细菌高产磁小体的方法
- 本发明提供了一种恒化高密度培养趋磁细菌高产磁小体的方法,它采用深层发酵培养法培养趋磁细菌,发酵培养基中含有碳源、氮源和铁源,在发酵过程中分阶段控制溶解氧,并通过调节pH值进行补料。该方法实现了趋磁细菌的恒化高密度培养和磁...
- 姜伟刘阳张扬李颖关国华田杰生李季伦
- 一种制备虾青素单体的方法
- 本发明提供了一种新的制备虾青素单体的方法,其是将虾青素酯用脂肪酶水解得到游离虾青素单体。采用该方法虾青素单体回收率达63.2%。本方法操作简单,只需要一步反应再经提取即得到目的产物,节省能耗,也可在一定程度上避免虾青素在...
- 李颖赵莹莹关菲菲王贵利关国华王珍芳
- 棉枯萎病菌异核体及其不同表型分离子在基因转录水平上的差异被引量:9
- 2004年
- 采用银染mRNA差异显示技术 ,研究了棉花枯萎病菌异核体菌株 (Ag14 9)及其两个不同表型分离子(Ag14 9 Ⅰ和Ag14 9 Ⅲ )之间差异表达的基因 ,观察到在 3 0 0~ 70 0bp之间出现了 19个差异条带 ,经反向RNA印迹 ,证实其中 2条差异带为阳性 :编号为C6的差异条带在Ag14 9和Ag14 9 Ⅰ菌株中呈高表达 ,而编号为G5的差异条带在菌株Ag14 9和Ag14 9 Ⅲ中呈高表达。这两条差异片段经测序后在GenBank中分别进行同源比较 ,发现由C6片段编码的氨基酸序列与多种生物 (包括动物、植物和微生物 )NADH脱氢酶的第 6个亚基有不同程度的同源性 (3 0 %~70 % ) ;而编码G5片段的氨基酸序列与龟裂链霉菌 (Streptomycesrimosus)的OtrB(tetracyclineeffluxprotein)蛋白有 3 5%的同源性。首次证明在异核体菌株及其不同表型分离子之间存在基因转录水平差异 。
- 杨红李颖关国华李秀玉
- 关键词:棉花枯萎病菌异核体MRNA差异显示