卜歆 作品数:18 被引量:33 H指数:3 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 农业科学 更多>>
慕课背景下的军医大学生物化学英语ESP课程构建研究 被引量:2 2017年 慕课(MOOC)热带来了在线课程的新体验,学生就此有了提高学术英语能力的迫切要求,同时给高等教育大力倡导的专用英语(ESP)发展创造了难得的机遇。本文简述了慕课和ESP的基本概念、特点及影响,以军医大学的生物化学英语教学为例,从教学内容、教学方式、考核方式等方面探讨了目前生物化学英语教学的现状,提出了生物化学英语ESP课程建设的相关对策,建议选择贴近学习者需求的慕课课程、分阶段有侧重进行专业学术英语技能培训,此举将有助于慕课课程模式下ESP教学改革的开展,促进国际化人才的培养。 屈亚媛 茹懿 卜歆 徐孝娜 王秦豪关键词:生物化学 专用英语 教学改革 长双歧杆菌NCC2705葡萄糖与果糖代谢的比较蛋白质组学 被引量:3 2008年 为揭示长双歧杆菌NCC2705(Bifidobacterium longum NCC2705)果糖代谢途径,建立其果糖发酵模型。以本实验室前期构建的长双歧杆菌NCC2705菌株蛋白质参考图谱为基础,进行了果糖和葡萄糖生长的菌体比较蛋白质组学研究,利用MALDI-TOF和ESI-MS/MS鉴定差异蛋白,进一步通过半定量RT-PCR验证二者显著差异表达蛋白。果糖生长的菌体蛋白中鉴定到了所有葡萄糖降解途径中的酶和蛋白质,另外鉴定到3倍以上差异蛋白点9个,其对应的5个蛋白在果糖发酵中上调。半定量RT-PCR验证显著差异蛋白,显示在果糖发酵中具有高水平表达是ABC转运系统的果糖特异性-结合蛋白BL0033和ATP结合蛋白BL0034。果糖的发酵时间和浓度梯度试验显示诱导时间越长、浓度越高,BL0033的表达量越高。第一,比较蛋白谱证明果糖和葡萄糖以相同途径降解。第二,BL0033的表达是受果糖诱导的,果糖的吸收可能是通过一个特殊的转运系统,即ABC转运系统将果糖从胞外转运到胞内,其中BL0033和BL0034共同作为系统元件扮演了重要角色。 孙忠科 卜歆 何湘 姜铮 王芳 赵红庆 刘大伟 袁静关键词:比较蛋白质组 半定量RT-PCR 初加工葡萄贮藏期间病原菌分离与鉴定 被引量:3 2006年 以经过热处理初加工葡萄果粒为样品,对其在贮藏期间发生腐烂的主要病原菌进行调查,并对病原菌进行分离、培养和回接试验,确定了腐烂病害的病原菌分别为青霉、链格孢、镰刀菌和葡萄孢,而且确定了病害为混合侵染。 卜歆 寇莉萍关键词:葡萄 初加工 病原菌 Sparc基因的克隆及其在HEK293细胞中的表达 2013年 目的:为探讨SPARC(secreted protein acidic and rich in cysteine)在人恶性肿瘤发生、发展中的作用及其分子机制,进一步明确SPARC发挥作用的方式及其与肿瘤发生类型的关系。方法:我们首先提取了人乳腺癌细胞系MCF-7的总RNA,在对总RNA进行纯度与定量检测后,利用RT-PCR的方法,以该总RNA为模板,将其反转录为cDNA;再设计引物,以该cDNA为模板,利用PCR扩增出包含Sparc编码区的DNA片段,将该产物纯化后通过T-A克隆连接入pMD20-T载体,利用菌落PCR及DNA测序进行鉴定。以pMD20-T-Sparc为模板,我们设计了特异的针对Sparc全长编码区的引物,并在引物5'端分别加入BamHI、HindIII酶切位点,通过PCR将Sparc编码区扩增出来,经纯化及双酶切后与真核表达载体pcDNA3.1myc-his(-)相连,再经菌落PCR和DNA测序进行鉴定。通过瞬时转染的方法,利用脂质体将所构建的重组SPARC真核表达载体转染HEK293细胞,48h后裂解所培养的细胞,使用western blot检测有无SPARC的表达。结果:测序证实所克隆的Sparc编码区cDNA正确地插入pcDNA3.1myc-his(-)中,western blot检测证实其在HEK293细胞中得到表达,而空载体转染的细胞则无表达,说明所构建的pcDNA3.1myc-his(-)-Sparc能够成功表达。结论:我们成功克隆了人Sparc cDNA,构建了其真核表达载体,并在HEK293细胞中得到有效表达,从而为进一步研究人SPARC的功能及其与肿瘤的关系奠定了基础。 卜歆 赵虎 张淑雅 王涛 苏金关键词:SPARC 真核表达 克隆 CDNA 胶原盘状结构域受体2基因缺失对小鼠卵巢功能的影响 2013年 目的利用胶原盘状结构域受体2(Discoidin domain receptor 2,DDR2)基因缺失小鼠,研究DDR2缺失对卵巢功能的影响,探索DDR2缺失小鼠不孕的原因。方法①阴道脱落细胞涂片结合改良巴氏染色法检测DDR2基因缺失纯合子(SLIE)与野生型(WT)小鼠动情周期的差异。②PMSG+HCG促排卵后在体式显微镜下计数排卵数量差异,HE染色法观察SLIE小鼠与WT小鼠促排卵后卵巢与子宫形态及结构的差异。结果①成年SLIE小鼠缺乏明显的动情期,绝大多数处于动情间期,缺乏规律的动情周期。②促排卵实验发现,SLIE小鼠促排卵数量显著减少;③排卵后黄体生成早期,SLIE小鼠子宫壁薄,体积小;卵巢切片中没有黄体生成;子宫切片HE染色显示子宫内膜薄,腺体及间质增生不明显,未见分泌粘液,未能进入分泌期。结论DDR2缺失导致卵巢对促性腺激素的反应能力降低,促排卵后黄体生成障碍。 张淑雅 陈昕 桑旭东 卜歆 王燕蓉 苏金 裴秀英关键词:细胞外基质 不孕 促炎分子盘状结构域受体2在泛素化修饰过程中与泛素分子的偶联方式 2015年 目的研究泛素分子中哪些位点的赖氨酸(Lys)残基参与了具有促炎效应的膜受体盘状结构域受体2(DDR2)的多聚泛素化修饰。方法将DDR2、Cbl-b及泛素分子不同位点Lys的突变体共转染HEK293T细胞,以胶原蛋白刺激细胞诱导DDR2发生活化。利用免疫沉淀方法分离细胞中的DDR2,Western blot法检测DDR2与不同泛素分子的偶联情况。结果仅保留27位Lys的泛素分子偶联到DDR2分子上的能力与野生型泛素分子相接近,保留33位Lys的泛素分子有较微弱与DDR2偶联的能力。27位Lys突变可使泛素分子彻底丧失与DDR2相偶联的能力,而33位Lys突变使得泛素分子偶联DDR2的能力部分丧失。结论 Cbl-b介导的DDR2的多泛素化修饰主要是通过泛素分子的Lys27偶联的,Lys33可能也部分参与了DDR2的泛素化修饰。 于江天 卜歆 赵虎 李霞 苏金关键词:盘状结构域受体2 泛素化 泛素 泛素连接酶 CBL-B 蛋白质组学在病原微生物基因功能研究中的应用 被引量:1 2007年 病原微生物,尤其是新病原微生物的出现及一些病原微生物的抗药性,使感染性疾病成为危害人类健康的大敌。目前已完成302个(不包括病毒)微生物基因组测序,还有573个重要微生物基因组在测序中,而病原微生物基因组的研究是全基因组测序的重要组成部分,多种重要病原微生物包括流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae)、 袁静 卜歆 孙忠科 王玉飞 杜昕颖 赵红庆 黄留玉关键词:病原微生物 蛋白质组学 基因功能 全基因组测序 微生物基因组 流感嗜血杆菌 SPARC通过竞争性结合胶原蛋白抑制DDR2的活化 2013年 目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)是否与盘状结构域受体2(DDR2)竞争性结合胶原蛋白,并观察SPARC对DDR2磷酸化水平的影响。方法采用转染小干扰RNA的方法下调人前列腺癌细胞PC-3中DDR2的表达,观察对该细胞中SPARC mRNA表达水平的影响。在HEK293T细胞中同时过表达SPARC和DDR2,在有无胶原蛋白刺激的情况下,通过免疫沉淀及Western blot法检测DDR2磷酸化水平的变化。结果下调DDR2会引起SPARC mRNA和蛋白表达水平显著下降;而SPARC能够抑制胶原蛋白刺激的DDR2磷酸化。结论 SPARC很可能通过竞争性结合胶原蛋白来抑制DDR2的活化。 卜歆 于江天 张淑雅 赵虎 苏金关键词:DDR2 SPARC 胶原蛋白 细胞外基质 福氏2a志贺氏菌2457T HtpG蛋白诱导小鼠炎性反应 被引量:4 2008年 【目的】构建福氏2a志贺氏菌2457T株的htpG缺失突变株和回复株,对HtpG蛋白的功能进行初步研究。【方法】采用λ-Red重组系统对htpG基因进行缺失突变,构建了福氏2a志贺氏菌2457T株的htpG缺失突变株,并利用低拷贝质粒构建了htpG突变株的回复株。在此基础上,对野生株、突变株和回复株的生长曲线、生化反应、豚鼠角膜试验进行了比较分析,并考察了野生株、突变株和回复株腹腔注射引起小鼠炎症反应的强弱。【结果】HtpG蛋白功能与福氏志贺氏菌的基本生化代谢无关,也不影响细菌穿透上皮细胞的能力,但腹腔注射后能够引起小鼠强烈的炎症反应。【结论】HtpG蛋白功能可能与细菌的免疫致病性相关。 卜歆 朱力 刘先凯 赵格 冯尔玲 张静飞 袁静 王恒樑关键词:缺失突变株 炎症因子 生物化学与分子生物学实验教学改革的几点体会 被引量:3 2011年 为进一步提高生物化学与分子生物学实验课的授课质量,促进学生学习兴趣的提高和综合能力的培养,对实验课教学的部分环节进行了调整和充实,充分发挥了教与学互动的优势,取得了良好的教学效果。 卜歆 苏金 药立波关键词:生物化学 分子生物学 实验教学 教学效果