史曼 作品数:5 被引量:10 H指数:2 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
GFR/DDR2嵌和受体的构建和稳定表达的鉴定 2004年 目的 :将一在细胞膜表面不表达或低表达的受体胞外区与盘状结构域受体 2 (DDR2 )的胞内区融合 ,构建一嵌和DDR2受体 ,避免在活化此受体的同时激活与DDR2有相同配体的受体介导的信号通路 ,为探索DDR2介导的胞内信号途径奠定基础 .方法 :采用PCR扩增和限制性酶切的方式 ,将表皮生长因子受体 (EGFR)的胞外区与DDR2的跨膜及胞内区进行融合并稳定转染EGFR低表达的 2 93细胞 ,G4 1 8筛选 ,流式细胞仪检测嵌和受体在膜表面的表达状况 .结果 :成功构建了EGFR/DDR2嵌和表达载体 ;筛选到稳定表达此嵌和受体的 2 93细胞株 .结论 :融合并稳定表达了EGFR/DDR2嵌和受体 . 苏金 于江天 王吉村 史曼 朱玲 张健 刘新平 药立波关键词:金属蛋白酶类 基因表达 类风湿性关节炎关节滑膜细胞基因表达谱分析 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种最为常见的自身免疫性疾病,以慢性的关节滑膜炎为特点,逐渐导致关节软骨和骨的破坏甚至关节功能的障碍,极大影响了患者的生活质量。尽管RA的病因尚不十分清楚... 史曼关键词:类风湿性关节炎 成纤维样滑膜细胞 基因表达谱芯片 文献传递 IL-8在类风湿性关节炎滑膜增生中的作用探讨 趋化性细胞因子(CHEMOKINE)是一类可诱导的,分子量为7~10KDA的促炎细胞因子,可由多种细胞产生,具有激活和趋化白细胞的作用。近年发现趋化因子除了刺激多种细胞发生趋化游走外,在肿瘤细胞增殖中还具有生长因子样作用... 史曼关键词:IL-8 类风湿性关节炎 趋化性细胞因子 细胞增殖 滑膜成纤维细胞 滑膜增生 文献传递 网络资源链接 基因芯片法筛选膝骨关节炎滑膜相关差异表达基因 被引量:6 2010年 目的应用基因芯片技术筛选骨关节炎(OA)滑膜组织和正常滑膜组织的差异表达基因。方法体外分离OA与正常滑膜组织,经原代培养生长至四代的成纤维样滑膜细胞(FLS)用于实验。分别提取OA和正常FLS总RNA,反转录成cDNA,并以两种荧光Cy5和Cy3标记后作为探针,与覆盖21 073条人类基因的Agilent Human 1A表达谱芯片进行杂交,扫描芯片荧光信号图像后用基因图像分析软件进行数字化处理和分析。结果共筛选出显著表达的差异基因1403条,其中668种基因表达水平上调,735种基因表达水平下调。结论 OA发病是多基因共同作用的结果,OA与正常FLS差异表达的1403种基因可能参与了OA的发生和发展。对这些基因的进一步研究有望加深认识OA发病机制,找到新的疾病相关关键分子。 朱锦宇 史曼 张伟 朱庆生 药立波关键词:骨关节炎 基因表达谱芯片 差异表达基因 滑膜 人CXCR1基因Tet-on可调控载体的构建及其在NIH3T3中的表达 被引量:3 2006年 目的构建CXCR1-pTREhyg可调控性真核表达载体,检测其在NIH3T3细胞内的表达情况。方法通过RT-PCR的方法从原代培养的类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞中克隆得到CXCR1的全长基因,测序正确后将其亚克隆入pTREhyg载体中。用脂质体将pTet-on质粒和CXCR1-pTRE-hyg共转染入NIH3T3细胞,以不同浓度的强力霉素诱导,用Westernblot检测CXCR1蛋白表达水平。结果Westernblot显示,我们所构建的可调控性表达载体能在NIH3T3细胞内表达,不同浓度药物诱导的CXCR1表达水平明显不同;同时还观察到IL-8刺激后,NIH3T3细胞中Erk-1/2磷酸化水平升高。结论成功构建了CXCR1-pTREhyg真核表达载体,并可在NIH3T3细胞内表达。经IL-8刺激的转染NIH3T3细胞中Erk-1/2活性发生变化。为进一步观察CXCR1与类风湿性关节炎损伤之间的关系奠定了基础。 史曼 药立波 王立峰 李福洋 苏金 张健 李霞 刘新平关键词:CXCR1 类风湿性关节炎