娄鑫
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 非洲爪蟾PAPC多克隆抗体的制备及其特异性鉴定(英文)被引量:3
- 2007年
- 非洲爪蟾ParaxialProtocadherin(PAPC)是一个在爪蟾Spemann组织者特异表达的膜蛋白.它在爪蟾原肠运动阶段的汇聚延伸运动和体节发生阶段的体节边界形成,以及早期听泡的形态发生和细胞特化过程中都有重要的作用.为了研究PAPC基因在早期胚胎发育过程中的表达及其生物学功能,需要制备PAPC抗体.应用谷胱甘肽S-转移酶(glutathioneStransferase,GST)表达系统表达GST-PAPC融合蛋白,亲和纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得PAPC多克隆抗体.免疫印迹分析发现,以1∶3000稀释的该多克隆抗体为一抗时,能够在转染了全长PAPC质粒的HEK293T细胞的蛋白质抽提物中,特异地识别出150ku的印迹条带.同时,GST-PAPC融合蛋白可以竞争性抑制该抗体对全长PAPC质粒转染细胞的蛋白质抽提物的特异性条带.用1∶500稀释的该抗体为一抗进行免疫荧光分析时,发现,PAPC多克隆抗体能够识别在HEK293T细胞中过表达以及爪蟾动物极细胞中过表达的PAPC蛋白,荧光信号定位在细胞膜上.免疫印迹分析证明,PAPC抗体能够识别爪蟾胚胎中内源表达的PAPC蛋白.
- 胡锐颖徐鹏陈跃磊娄鑫丁小燕
- 关键词:非洲爪蟾原核表达多克隆抗体免疫印迹免疫荧光
- 非洲爪蟾XPAPC基因启动子及其组织特异性增强子
- 本发明属于分子生物学领域,公开了非洲爪蟾XPAPC基因启动子,其具有SEQ ID NO:1中所示的核酸序列或序列片段。本发明还公开了含有所述启动子的表达载体。本发明还公开了利用所述的启动子表达目的基因的方法。本发明的启动...
- 丁小燕王金虎娄鑫
- 文献传递
- 非洲爪蟾XPAPC基因启动子及其组织特异性增强子
- 本发明属于分子生物学领域,公开了非洲爪蟾XPAPC基因启动子,其具有SEQ ID NO:1中所示的核酸序列或序列片段。本发明还公开了含有所述启动子的表达载体。本发明还公开了利用所述的启动子表达目的基因的方法。本发明的启动...
- 丁小燕王金虎娄鑫
- 文献传递
- 非洲爪蟾胚胎早期发育中XTbx6基因功能的研究及Activin/nodal信号途径在XPAPC转录调控中的作用
- 在脊椎动物发育的各个事件中,属于不同家族的各种转录因子通过调控大量基因的表达扮演着不可或缺的角色,因此,对转录因子上下游基因及其调控分子机制的研究是发育生物学中的重要课题。T-box家族是一个重要的转录因子家族,该家族的...
- 娄鑫
- 关键词:非洲爪蟾转录调控
- 文献传递