孙婧瑜
- 作品数：22 被引量：52H指数：5
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- 外源性机械生长因子对大鼠骨骼肌卫星细胞生物学特性的影响
- 目的：研究MGF促离体培养的骨骼肌卫星细胞增殖的最佳浓度,并观察该浓度对细胞生长曲线、总蛋白及凋亡情况的影响.方法：选用雄性SD大鼠1只,无菌条件下取后肢肌肉,采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术,分离及纯化骨骼肌卫星...
- 孙婧瑜陆耀飞
- 关键词：机械生长因子骨骼肌卫星细胞凋亡指数
- 外源性机械生长因子对大鼠骨骼肌卫星细胞生物学特性的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:研究机械生长因子(MGF)促离体培养的骨骼肌卫星细胞增殖的最佳浓度,并观察该浓度对细胞生长曲线、总蛋白及凋亡情况的影响。方法:选用雄性SD大鼠1只,无菌条件下取后肢肌肉,采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术,分离及纯化骨骼肌卫星细胞。取第3代骨骼肌卫星细胞,分别采用终浓度为15、25、50、100、200 ng/ml的MGF进行干预,作为实验组;另以单纯加入100μl生长培养基作为对照组,以加入100μl DMEM作为阴性对照组。同步化后,于培养24 h后加入CCK-8溶液。采用CCK-8比色法检测不同浓度MGF下细胞的增殖情况并筛选出最佳浓度后,绘制生长曲线,同时运用BCA法及Hoechst 33342、PI双染法测定最佳增殖浓度的MGF对卫星细胞蛋白合成及细胞凋亡的影响。免疫细胞化学法鉴定骨骼肌卫星细胞。结果:①终浓度为15、25、50、100 ng/ml的MGF均有促进骨骼肌卫星细胞增殖的作用(P<0.01),其中25 ng/ml MGF促增殖作用最佳。②与对照组相比,MGF组细胞生长曲线左移,倍增时间、平台期均缩短。③与对照组相比,25 ng/ml MGF作用48 h即对骨骼肌卫星细胞有明显的增殖效果(P<0.05);与对照组相比,25 ng/ml MGF作用骨骼肌卫星细胞48 h和72 h时,其总蛋白含量显著增加(P<0.05);与对照组相比,25 ng/ml MGF作用72h、96h,骨骼肌卫星细胞的平均凋亡指数显著减小(P<0.05)。结论:①机械生长因子可促进体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞增殖,最佳浓度为25 ng/ml;②25 ng/ml MGF可以使骨骼肌卫星细胞提前进入平台期,缩短生长周期;③25 ng/ml MGF可以抑制骨骼肌卫星细胞的凋亡。
- 孙婧瑜陆耀飞
- 关键词：机械生长因子骨骼肌卫星细胞凋亡指数
- 骨骼肌PGC-1α相关蛋白表达在高脂饮食诱导小鼠肥胖易感性中的差异
- 目的：通过采用高脂饮食诱导肥胖及肥胖抵抗小鼠,在观察两种小鼠血糖血脂及其线粒体氧化应激变化的同时,重点探讨骨骼肌线粒体相关蛋白pAMPKα2,CPT1-M,PGC-1和ERRα在肥胖倾向和肥胖抵抗倾向形成中的表达差异,试...
- 孙婧瑜漆正堂崔迪贺杰肖丽萍丁树哲
- 关键词：高脂饮食肥胖肥胖抵抗PGC-1Α
- 不同干预方式对小鼠骨骼肌AMPK/ACC信号通路及CD36蛋白含量的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:通过分别观察高脂膳食、自主运动及能量限制3种干预方式对小鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性水平及脂肪酸移位酶(CD36)总蛋白含量的影响,探讨CD36总蛋白含量在不同骨骼肌脂肪酸氧化水平中的差异。方法:清洁级雄性C57小鼠40只,随机分为4组:对照组(N,n=10)、高脂膳食组(HD,n=10)、自主跑轮运动组(E,n=10)及能量限制组(CR,n=10)。经过8周干预后,小鼠断颈处死,摘取右侧股四头肌。用western blot方法分别检测高脂膳食、自主运动及能量限制干预下小鼠骨骼肌脂肪酸氧化信号通路AMPK、ACC的磷酸化水平及CD36总蛋白含量。结果:1)与对照组小鼠相比,经过8周跑轮运动(P<0.05)、能量限制(P<0.05和P<0.01)干预的小鼠骨骼肌AMPK、ACC蛋白磷酸化水平均有显著的增加,然而,经过8周高脂膳食干预的小鼠骨骼肌AMPK、ACC蛋白磷酸化水平没有显著变化(P>0.05);2)与对照组小鼠相比,经过8周高脂膳食干预的小鼠骨骼肌CD36总蛋白表达水平显著减少(P<0.01),经过8周能量限制的小鼠骨骼肌CD36总蛋白表达水平显著增加(P<0.01),然而,经过8周自主运动的小鼠骨骼肌CD36总蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);3)与高脂膳食组小鼠相比,经过8周自主跑轮运动及能量限制的小鼠骨骼肌CD36总蛋白表达水平及AMPK、ACC磷酸化水平均有显著增加(P<0.01)。结论:1)当骨骼肌脂肪酸的摄取不足以满足脂肪酸氧化需要时(如运动和热量限制),AMPK/ACC信号通路的激活可能参与脂肪酸氧化代谢的调控。2)CD36总蛋白含量可能和骨骼肌脂肪酸氧化水平密切相关,这说明CD36总蛋白含量的调节也可能参与对小鼠骨骼肌脂肪酸氧化代谢的调控。
- 孙婧瑜孙易丁树哲
- 关键词：腺苷酸活化蛋白激酶乙酰辅酶A羧化酶高脂膳食
- 高原环境下运动氧化应激与免疫反应相关联的生物标志研究进展被引量：5
- 2015年
- 高原环境下运动引起的氧化损伤是高原训练中难以攻克的问题,运动氧化应激与免疫反应相关联的敏感生物标志可作为早期诊断的生物学指标。本文利用高原训练引起的运动员机体神经-免疫-内分泌调节网络变化的理论,探讨高原环境下运动氧化应激与免疫反应的规律,分析高原环境与运动负荷的双重刺激下机体应激-免疫应答与氧化应激的关联反应机制,是确定高原环境下运动氧化应激与细胞免疫反应相关联的生物学标志的理论基础,为早期预警高原训练中引起的各种心、脑、肺等运动性疾病的发生,制定氧化应激损伤的检测技术进行前期的理论积累。
- 董静梅汪继兵秦黎黎周云鹤孙婧瑜夏丽周萍
- 关键词：氧化应激免疫反应生物标志
- 蒺藜对过度训练大鼠运动能力及内分泌免疫机能的影响被引量：9
- 2010年
- 目的:观察蒺藜对过度训练大鼠运动能力及内分泌免疫机能的影响。方法:30只雄性健康SD大鼠随机分为安静对照组、过度训练组和蒺藜+过度训练组,后两组大鼠进行6周递增负荷的跑台运动,其中蒺藜+过度训练组灌胃服用蒺藜,其余两组补充等量生理盐水。于第6周末测定过度训练组和蒺藜+过度训练组大鼠一次力竭运动时间,第7周周一检测3组大鼠外周血中部分内分泌激素和免疫指标的变化。结果:与过度训练组相比,蒺藜+过度训练组大鼠一次力竭运动的时间显著提高,表明蒺藜能提高大鼠的运动能力;与过度训练组相比,蒺藜+过度训练组大鼠外周血睾酮水平、T/C比值显著增加,且超过安静对照组的水平,这可能是蒺藜提高运动能力的机制之一;与过度训练组大鼠相比,补充蒺藜能完全逆转过度运动所致的CD8+增加、CD4+/CD8+的降低、NK细胞的减少,以及部分逆转CD3+的减少。结论:蒺藜能提高大鼠的运动能力,这可能与其增加睾酮水平和T/C比值有关;蒺藜对过度训练所致的受抑免疫功能具有改善作用。
- 王晓慧孙婧瑜曲静游盛中杨文吉
- 关键词：蒺藜睾酮CD4+/CD8+
- 耐力训练与p53抑制剂PFT-α对小鼠骨骼肌线粒体自噬相关基因表达的影响被引量：9
- 2013年
- 目的:通过6周跑台耐力训练及PFT-α皮下给药干预,探讨耐力训练与PFT-α对小鼠骨骼肌线粒体自噬相关基因表达的影响。方法:8周龄ICR雄性小鼠24只,随机分为对照组C、PFT-α给药组P、耐力训练组E、耐力训练联合PFT-α给药组EP,每组6只;运动组E、EP进行6周跑台训练,P组、EP组皮下注射PFT-α溶液(0.83mg/mLPFT-α,10%DMSO),0.2mL/只/次,C组、E组注射同体积溶剂(10%DMSO)。结果:与C组相比,E组p53、ULK1、BECN1、p62、PINK1、PARK2mRNA表达增加有统计学意义(P<0.05),P组LC3、p62、NIX、BNIP3、PINK1、PARK2、PARLmRNA表达上调有统计学意义(P<0.05),其中,PINK1mRNA的相对含量为C组的12倍;与P组相比,EP组p53、LC3、NIX、BNIP3、PINK1、PARK2mRNA表达下降有统计学意义(P<0.01)。结论:耐力训练可促进PINK1/PARKIN依赖的线粒体自噬相关基因的表达,提示运动对线粒体的质量控制不仅与线粒体生物发生、线粒体动态变化有关,还可能与线粒体自噬有关;PFT-α可促进参与线粒体自噬的NIX/BNIP3信号通路相关基因的表达,提示p53的转录活性与参与线粒体质量控制的NIX/BNIP3信号通路密切相关;PFT-α使PINK1mRNA异常高表达可能导致线粒体功能紊乱,耐力训练可改善这一现象。
- 崔迪贺杰孙婧瑜丁树哲
- 关键词：PFT-ΑBNIP3PINK1PARKIN
- 机械生长因子促骨骼肌卫星细胞增殖作用途径的初步研究
- 2014年
- 目的:研究机械生长因子促进骨骼肌卫星细胞增殖的量效关系及可能的作用途径。方法:选用4周龄雄性SD大鼠1只,无菌条件下取后肢肌肉,采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术,分离及纯化骨骼肌卫星细胞。免疫细胞化学法鉴定骨骼肌卫星细胞。取第3代骨骼肌卫星细胞,随机分为对照组、DMEM对照组、MGF组(M组)、LY+MGF组(LM组)、PD+MGF组(PM组)和LY+PD+MGF组(LPM组),同步化后,相应组细胞换用含有PI3K特异性抑制剂LY294002(30μM)及MEK特异性抑制剂PD98059(50μM)的生长培养基预阻断12 h后,再用含有MGF(25 ng/ml)的生长培养基继续培养24 h后,用CCK-8比色法、BCA比色法观察不同抑制剂干预下SC的增殖及总蛋白含量。结果:1、PM组和LPM组OD值均显著低于M组(P<0.01),而LM组OD值与M组无显著差异。2、LM组、PM组、LPM组SC总蛋白含量均显著低于M组。结论:MEK/Erk途径在MGF对卫星细胞促增殖方面有较重要作用。
- 陆耀飞孙婧瑜
- 关键词：机械生长因子骨骼肌卫星细胞信号通路增殖
- 不同生理条件下CD36/LKB1/AMPK信号通路在骨骼肌脂肪酸氧化代谢调控中的作用机制研究
- 2022年
- 目的:探讨不同生理条件下,脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)作为信号分子,激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的上游信号通路及其在改善骨骼肌脂肪酸氧化代谢中的作用。方法:利用siRNA干扰技术,在C2C12细胞中进行CD36基因敲低,探讨CD36基因缺乏对骨骼肌细胞AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylaze,ACC)信号通路激活的影响。将17只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(control group,CON;n=6)、高脂组(high fat diet group,HFD;n=6)及有氧运动组(exercise group,EX;n=5),分别进行8周干预实验,以探讨不同生理条件对CD36蛋白表达及AMPK、ACC磷酸化水平的影响。Western blotting法检测CD36蛋白表达及AMPK/ACC信号通路磷酸化水平;免疫荧光法检测肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的胞内转位;透射电镜法检测骨骼肌超微结构变化;比色法检测线粒体呼吸链酶活性的变化。结果:CD36基因缺乏能够激活骨骼肌细胞AMPK/ACC信号通路。与CON组相比,HFD组小鼠骨骼肌CD36蛋白水平显著增加(P<0.01),AMPK、ACC蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05,P<0.05),且诱导LKB1向细胞核的转位;与HFD组相比,EX组小鼠骨骼肌CD36蛋白水平显著降低(P<0.05),AMPK、ACC蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.01,P<0.05)。HFD干预导致骨骼肌组织超微结构损伤,CS酶活性显著降低(P<0.05)。结论:CD36作为信号分子,而非脂肪酸转运载体,当siRNA诱导CD36低表达时,激活AMPK;而HFD诱导CD36高表达时,通过诱导LKB1从细胞质向细胞核的转位,抑制AMPK/ACC信号通路激活,从而对骨骼肌脂肪酸氧化代谢进行调控。
- 孙婧瑜苏亚娟董静梅
- 关键词：CD36腺苷酸活化蛋白激酶线粒体
- FAT/CD36表达及转位在有氧运动改善老年小鼠骨骼肌胰岛素敏感性中的作用被引量：2
- 2021年
- 目的:通过分析运动对老年小鼠骨骼肌脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)向细胞膜和/或线粒体膜转位及其在脂筏中定位的影响,探讨FAT/CD36表达及转位机制在有氧运动改善老年小鼠骨骼肌胰岛素敏感性中的作用。方法:首先,利用siRNA干扰技术,在C2C12细胞中进行FAT/CD36基因敲低,探讨FAT/CD36基因缺乏对骨骼肌细胞胰岛素信号通路的影响。其次,将56周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组,老年对照组(aging control,AC;n=10)和老年运动组(aging exercise,AE;n=10)。有氧运动干预16周。RT-PCR法检测FAT/CD36及其他脂肪酸转运载体mRNA水平。Western blotting法检测FAT/CD36蛋白表达及胰岛素信号通路磷酸化水平。免疫荧光法分别检测FAT/CD36与小窝蛋白-1(Caveolin-1)及电压依赖性阴离子通道蛋白(voltage-dependent anion channel,VDAC)的共定位程度。结果:FAT/CD36基因缺乏能够激活骨骼肌细胞AKT/ERK信号通路。与AC组相比,AE组FAT/CD36和CPT-1的mRNA水平明显降低(P<0.05),其他脂肪酸转运载体m RNA水平变化不显著(P>0.05)。与AC相比,AE组FAT/CD36蛋白水平明显降低(P<0.05),AKT/ERK磷酸化水平明显升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示,运动诱导FAT/CD36向细胞膜转位,而非向线粒体膜转位。结论:FAT/CD36在调节骨骼肌胰岛素信号通路中具有重要作用,并且运动可能通过调节FAT/CD36的表达及转位预防衰老诱导的骨骼肌胰岛素敏感性下降。
- 孙婧瑜苏亚娟秦黎黎董静梅
- 关键词：运动干预胰岛素信号通路
