孙常文
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:温州市科技局科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 成纤维细胞生长因子23与慢性肾病的研究被引量:1
- 2011年
- 成纤维细胞生长因子23与人类许多疾病相关,它不仅可以直接调节钙、磷代谢,而且可以间接调节甲状旁腺激素、维生素D代谢。FGF23和klotho蛋白对维持磷酸盐的浓度、血管和骨骼都具有其独特的意义。主要通过与磷酸盐对比,提出了FGF23可以独立预测慢性肾病的不利结果,最后指出FGF23抗体和其C-末端在慢性肾脏疾病的治疗上具有潜力。
- 孙常文刘孝菊陈玉斌李校堃
- 关键词:慢性肾病磷酸盐
- GST与FGF23 C末端71个氨基酸融合蛋白的表达、纯化及其免疫原性
- 2012年
- 目的:构建和表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与成纤维细胞生长因子23(FGF-23)的活性片段-C末端71个氨基酸(FGF23CTR)融合蛋白的基因工程菌,并检测融合蛋白的免疫原性,为制备FGF23特异性单克隆抗体以及研发慢性肾病诊断试剂提供实验数据。方法:以质粒pET22b-fgf23为模板利用PCR方法扩增FGF23CTR的基因片段,将该基因与表达载体pGEX-4T-1连接后转化至BL21宿主细胞中,通过IPTG诱导获得可溶性表达,将GST-FGF23CTR融合蛋白用Glutathione Sepharose4B亲和层析法纯化,Western blotting法鉴定蛋白。该融合蛋白免疫Balb/C小鼠制备抗血清,采用ELISA法检测抗血清的效价。结果:构建GST-FGF23CTR融合蛋白的表达载体,纯化后得到纯度90%以上的融合蛋白,并与商品化的FGF23多克隆抗体呈阳性反应,ELISA法证实融合蛋白具有良好的免疫原性。结论:成功构建GST-FGF23CTR融合蛋白基因工程菌,并纯化得到具有良好免疫原性的融合蛋白,以此方法制备的抗原可用于FGF23特异性单克隆抗体的制备和FGF23生物学功能研究。
- 陈玉斌刘孝菊姚娜孙常文田海山张键刘敏李校堃
- 关键词:成纤维细胞生长因子23免疫原性基因工程菌
- Klotho外膜蛋白表达及纯化
- 目的:构建高效表达Klotho外膜蛋白的基因工程菌,为其机制研究奠定了基础.方法:通过PCR方法,分别以pET3c-Klotho及Sumo-EGF为模板合成Klotho外膜蛋白及sumo 基因片段,构建四种原核表达载体p...
- 孙常文刘孝菊李校堃
- 关键词:纯化
- FGF23与SUMO融合蛋白在大肠杆菌中高效表达及其纯化的研究
- 成纤维细胞生长因子(FGF)是一类来源于中胚层和神经外胚层的多种类型的具有广泛生物活性的细胞生长因子。到目前为止,发现FGFs超家族共有23个成员。成纤维细胞生长因子23,是成纤维细胞生长因子超家族中19亚家族的一员,也...
- 孙常文
- 关键词:成纤维细胞生长因子23融合蛋白纯化
- 文献传递