张鹭
- 作品数：61 被引量：159H指数：7
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项福建省教育厅资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 应用PCR技术检测牛乳中的结核分枝杆菌类病原菌被引量：3
- 2007年
- 应用PCR技术,设计特异性引物扩增mpb70基因332bp的核苷酸片段,快速、稳定地检测牛奶中的结核分枝杆菌类病原菌(TBC)。发现9/22(40.9%)市售牛奶样品中含有TBC。这种方法可以作为大规模的筛查手段。
- 张鹭路福平
- 关键词：PCR牛乳
- 分枝杆菌LSR2蛋白的研究进展被引量：2
- 2012年
- LSR2蛋白最早发现于麻风分枝杆菌（Mycobacteriumleprae）中，由89个氨基酸残基构成，是麻风分枝杆菌的主要免疫原之一，具有很强的免疫原性，能同时被B细胞和T细胞所识别。这种普遍存在于分枝杆菌和部分放线菌中的抗原蛋白，其序列高度保守，为组蛋白样DNA结合蛋白，对于基因表达具有广泛的调控作用。现将LSR2蛋白的研究进展综述如下。
- 彭如超徐文玺王洪海张鹭
- 关键词：麻风分枝杆菌抗原蛋白DNA结合蛋白免疫原性氨基酸残基
- 溶源性乳酸菌紫外诱变前后生长特性的初步研究
- 2008年
- 以OD值及CFU,pH三个指标对嗜热链球菌的生长动力学性质进行了初步的研究,分析了紫外诱变后嗜热链球菌生长动力学性质的变化及原因。实验结果表明,嗜热链球菌的生长特性符合典型的一步生长曲线规律。在整个培养期内,pH随培养时间的延长而降低。温和噬菌体经过一定条件的紫外诱变后转变为烈性噬菌体,导致细菌生长缓慢。
- 金雨华张鹭
- 关键词：嗜热链球菌紫外诱变
- 一株乳酸菌培养条件优化及菌种鉴定被引量：10
- 2008年
- 针对取自某工厂的一株未知乳酸菌种进行菌株的培养条件优化及菌种鉴定。以乳酸菌在不同固体培养基中的菌落数、菌落大小及溶钙圈大小为检测指标确定乳酸菌分离培养基为最优乳酸菌固体培养基。在此基础上,对其固体和半固体形式中的生长情况进行比较,发现半固体培养较固体培养更适于乳酸菌生长。通过对乳酸菌生长曲线、pH-t曲线的绘制,了解了此种乳酸菌的生长特性。通过菌落形态观察以及生化鉴定实验,如:吲哚试验、接触酶试验、运动性检测、糖发酵试验等鉴定出此种乳酸菌为德氏乳杆菌保加利亚亚种。
- 刘岩岩张鹭张春艳金雨华冯小雪
- 关键词：乳酸菌培养条件优化菌种鉴定
- 结核分枝杆菌Rv0859基因的克隆、表达、纯化及蛋白的亚细胞定位被引量：1
- 2009年
- 本研究体外克隆了结核分枝杆菌Rv0859基因,融合表达并纯化了Rv0859蛋白。首先提取H37Rv标准菌株中的基因组DNA,设计Rv0859基因两端的引物,以H37Rv基因组DNA为模板通过PCR方法扩增Rv0859基因。用HindIII和BamHⅠ两种限制性内切酶双切Rv0859基因,T4连接酶连接到pET30载体上,再转入大肠杆菌JF1125中,经过筛选鉴定后抽提质粒测序,得到重组正确载体,转化到表达宿主大肠杆菌BL21中。用IPTG进行诱导表达,通过聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及质谱鉴定重组表达蛋白。0.05mol/L浓度的IPTG37°C诱导4h重组蛋白的表达量最高。制备重组蛋白的多克隆抗体,通过亚细胞分离及Western-blotting分析蛋白的亚细胞定位。结果成功地构建原核表达载体pET30a-Rv0859,并获得47845D左右的大量表达的Rv0859蛋白,Western-blotting结果表明Rv0859蛋白主要定位于细胞膜中,微量存在于细胞壁中,为进一步的Rv0859蛋白功能研究奠定了一定的基础。
- 刘岩岩马国举廖海印张鹭王洪海
- 关键词：克隆纯化
- 结核分枝杆菌PE31抗原的免疫原性及保护效果研究被引量：1
- 2017年
- 目的选择结核分枝杆菌中受Pho PR和Lsr2调控的PE-PPE家族蛋白PE31作为研究对象,探索其免疫原性和抗结核免疫保护效果,为新型抗结核疫苗的研发提供候选抗原。方法根据PE31的氨基酸序列预测其CD4^+、CD8^+T细胞表位。在大肠杆菌和哺乳动物细胞系中分别表达其编码基因,通过Western-blotting实验验证目的蛋白表达。联合弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠,通过比较脾细胞抗原特异性IFN-γ、TNF-α和IL-2的分泌水平,以及小鼠血清IgG水平,评价抗原免疫原性。以DNA疫苗形式免疫BALB/c小鼠后,尾静脉感染结核分枝杆菌标准毒株H37Rv,通过比较4周后小鼠体内肺、脾载菌量评价其保护效果。结果 PE31与Ag85A携带有相同数量的T细胞表位。并且能够诱导出强于Ag85A的IFN-γ、TNF-α细胞因子分泌和相同的血清IgG反应水平。PE31免疫组小鼠肺、脾结核杆菌载量比未免疫组下降0.3~0.4log10。表现出更强的细菌清除能力和免疫保护能力。结论 PE31具有较强的免疫原性和免疫保护能力,本研究成果将为抗结核疫苗的开发提供新的候选抗原及抗原表位。
- 王玉臣陈福增黄滢睿张鹭刘军
- 关键词：结核病亚单位疫苗
- 结核分枝杆菌Wag31基因的免疫功能用途
- 本发明属于生物技术领域，涉及结核分枝杆菌Wag31基因及其免疫用途。本发明提供了结核分枝杆菌Wag31蛋白在制备重组BCG疫苗中的应用。Wag31是结核分枝杆菌抗原，利用过表达Wag31的重组BCG疫苗免疫小鼠，第11周...
- 王洪海徐文玺张鹭吕红曹炜郝珂威
- 文献传递
- 耻垢分枝杆菌精氨酸代谢变化对细菌毒力及肺上皮细胞线粒体功能的影响
- 2022年
- 目的探讨精氨酸代谢变化对耻垢分枝杆菌(M.smeg)毒力、致病性及宿主生理的影响。方法通过构建M.smeg argR敲除株,以野生型M.smeg为对照,测定细菌体外生长能力变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细菌脂类代谢相关基因fadD2、fadA5、kstR等的表达。用M.smeg侵染人非小细胞肺癌上皮细胞系A549,检测CCK8细胞活力,采用RT-qPCR检测细胞线粒体功能相关基因UCP1和DNM1L,观察细菌对宿主细胞生理的影响。结果敲除argR可提高细菌脂质储存能力,在以葡萄糖为单一碳源的培养基中更具生长优势(P<0.001);同时,M.smeg分枝菌酸合成上调;侵染A549细胞2 h后,入胞率显著增加(P<0.001),细菌毒力增强,对A549细胞的侵染能力提高,并通过影响线粒体功能影响宿主细胞的活力。结论M.smeg精氨酸代谢负转录调控因子argR的敲除提升了细菌毒力,并可抑制宿主细胞线粒体功能。
- 周紫薇林晨李烨雨王玉臣张鹭
- 关键词：耻垢分枝杆菌A549细胞线粒体
- 结核分枝杆菌耐药株和敏感株菌体碱性蛋白的比较蛋白质组学研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究结核分枝杆菌耐多药菌株与敏感菌株菌体碱性蛋白的蛋白质表达差异。方法运用双向电泳技术(2-DE)比较8株耐多药菌株与9株敏感菌株的菌体碱性蛋白表达图谱差异,差异蛋白进行胶内酶切,肽混合物使用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果比较发现重复性较好的差异蛋白质斑点10个,获得5个明确的肽质量指纹谱,鉴定5个蛋白分别为:NADH-CoQ氧化还原酶B链(NuoB,Rv3146)、乙酰羟酸合成酶小亚基(IlvN,Rv3002c)以及3个假定蛋白,分别由Rv2159c、Rv0068、Rv0992编码。结论上述蛋白的鉴定在深入研究结核分枝杆菌耐药形成机制,筛选具有潜在价值的结核药物靶位和耐多药结核病诊断的分子标志物方面具有参考价值。
- 张鹭王庆忠路福平王洪海
- 关键词：结核分枝杆菌耐多药碱性蛋白比较蛋白质组学
- 结核分枝杆菌热休克蛋白GroEL1的研究进展被引量：5
- 2010年
- 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的GroEL1蛋白是基因复制产物,作为热休克蛋白(HSP)一员,不但行使原有的助折叠分子伴侣功能,而且可作为抗原,在抗原呈递中起作用。另外,由于其独特的结构特点,GroEL1还具有多种生物功能,如作为蛋白分子伴侣,控制细胞因子依赖性肉芽肿的产生;作为DNA分子伴侣,保护DNA免受损害。而在分枝杆菌属的其他物种如耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)中却行使不同的生物学功能。这些功能产生的原因和机制有待进一步研究,从而为结核病的发生及结核分枝杆菌的进化机制提供更多的依据。
- 何磊张鹭彭超王洪海
- 关键词：结核分枝杆菌热休克蛋白抗原分子伴侣
