施少林
- 作品数：14 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- microRNA-30家族与足细胞损伤研究
- <正>背景:足细胞特异性dicer酶敲除小鼠在4至5周时可出现蛋白尿及肾小球局灶节段硬化,这提示miroRNA在维持肾小球正常功能中发挥了重要的作用。将足细胞Dicer酶特异性敲除小鼠模型分为三组:蛋白尿组(100-30...
- 吴俊男郑春霞范芸陈朝红曾彩虹秦卫松张昌明张婉芬王晓张明超朱晓东曾科施少林刘志红
- 文献传递
- microRNA-30家族的新用途
- 本发明提供microRNA-30家族的新用途，具体为作为局灶节段性肾小球硬化（FSGS）患者足细胞损伤标志物的应用，此外，本发明还提供了microRNA-30家族在制备治疗足细胞损伤药物中的应用。本发明利用microRN...
- 吴俊男刘志红施少林
- 文献传递
- 血浆miR-186作为FSGS疾病活动生物标志物的研究
- 目的 血浆miRNAs 能稳定存在并作为生物标志物帮助诊断疾病和判断预后,本研究旨在寻找能作为局灶节段性肾小球硬化(FSGS)疾病活动生物标志物的血浆miRNAs.方法 选取年龄、性别匹配的活动性FSGS 患者及正常对照...
- 张昌明张婉芬陈慧梅刘春蓓吴俊男施少林刘志红
- microRNA-30家族的新用途
- 本发明提供microRNA-30家族的新用途，具体为作为局灶节段性肾小球硬化（FSGS）患者足细胞损伤标志物的应用，此外，本发明还提供了microRNA-30家族在制备治疗足细胞损伤药物中的应用。本发明利用microRN...
- 吴俊男刘志红施少林
- 文献传递
- Toll样受体9在嘌呤霉素氨基核苷导致足细胞损伤中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的:我们发现Toll样受体9(TLR9)在嘌呤霉素氨基核苷(PAN)处理的足细胞中上调。本研究试图确定TLR9是否参与PAN对足细胞的损伤作用。方法:(1)用PAN诱导体外培养的足细胞损伤模型,以定量逆转录PCR(qRT-PCR)和Western Blot检测足细胞TLR9及该通路其他组分的变化。同时,利用流式细胞术检查足细胞凋亡情况。用PAN诱导大鼠足细胞损伤,以qRT-PCR和免疫组化法检测大鼠肾小球中TLR9表达变化。(2)将TLR9干扰RNA(siRNA)表达质粒和对照质粒分别转染足细胞,用Western Blot检测比较核因子κB(NF-κB)p65和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化、qRT-PCR比较白细胞介素12(IL-12)的mRNA变化,流式细胞仪比较足细胞凋亡情况。结果:(1)与对照组相比,经PAN刺激的足细胞,其TLR9、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IL-12的mRNA水平明显上调,磷酸化p65和磷酸化p38显著增加,细胞凋亡增加。PAN大鼠模型的肾小球中TLR9 mRNA表达上调,免疫组化显示TLR9蛋白显著增加。(2)足细胞转染TLR9干扰质粒后,TLR9的mRNA和蛋白表达水平降低;而经PAN处理后,该细胞与转染对照siRNA的细胞相比,其磷酸化p65和磷酸化p38的水平降低,IL-12 mRNA表达降低,足细胞凋亡减少。结论:TLR9信号通路参与了PAN诱导的足细胞损伤过程,其机制可能是促进炎症因子产生及p38 MAPK依赖的细胞凋亡。
- 夏虹梁耀军何静鲍文朵娜周显光张明超刘志红施少林
- 关键词：TOLL样受体9足细胞凋亡嘌呤霉素氨基核苷P38丝裂原活化蛋白激酶
- 尿液microRNAs作为FSGS疾病活动的新型生物标志物的研究
- 目的 观察FSGS 患者尿液循环microRNAs(miRNAs)的表达水平以及与FSGS 疾病活动性及治疗效果之间的关系.方法 研究纳入尿蛋白＞3.5g 的FSGS 患者为FSGS 活动组,尿蛋白＜0.4g 的FSGS...
- 张婉芬张昌明陈慧梅刘春蓓涂远茂施少林曾科刘志红
- 尿液miR-30a-5p预测激素治疗局灶节段性肾小球硬化的疗效被引量：1
- 2014年
- 目的:前期研究已经证实尿液miR-30a-5p、miR-196a及miR-490的水平与局灶节段性肾小球硬化(FSGS)的关系密切,本研究旨在探讨尿液miRNAs水平与FSGS患者激素治疗反应间的关系。方法:同时回顾性和前瞻性分析接受激素治疗的原发性FSGS患者,分别观察治疗前后和随访过程中尿液中miRNAs水平和尿蛋白定量,分析尿液miRNAs与尿蛋白变化之间的规律关系。结果:回顾性分析139例FSGS患者,68例经激素治疗后完全缓解(CR组),71例患者经治疗未完全缓解(non-CR组)。治疗前两组患者的性别、年龄和尿蛋白、血清肌酐、总胆固醇水平相似,尿miR-196a和miR-490水平在两组之间亦无显著差异,CR组的尿miR-30a-5p水平显著低于non-CR组(P=0.03)。尿miR-30a-5p的水平能预测FSGS患者对激素治疗的反应(AUC=0.628,P=0.03)。前瞻性观察了55例FSGS患者,激素治疗8周后33例获得CR,尿miR-30a-5p的表达水平随着蛋白尿的缓解而显著下降(P<0.001);而经激素治疗non-CR患者的尿miR-30a-5p水平则与激素治疗无显著关系。进一步前瞻性观察了22例初治的FSGS患者证实,CR组的尿miR-30a-5p的水平随激素治疗逐渐下降(P<0.001);其下降幅度在4周时即与non-CR组即存在显著差异(P=0.003),同期二组尿蛋白的变化尚无明显差异(P=0.29)。结论:尿miR-30a-5p的水平与FSGS激素治疗反应直接相关,并在治疗过程中于尿蛋白之前出现显著变化,可作为预测FSGS激素治疗效果和预后的标志物。
- 张婉芬陈慧梅张昌明施少林刘志红
- 关键词：局灶节段性肾小球硬化激素
- TLR9信号参与嘌呤霉素氨基核苷对足细胞的损伤作用
- 目的 我们发现Toll 样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)在嘌呤霉素氨基核苷(puromycinaminonucleoside,PAN)处理的足细胞中上调.本研究试图确定TLR9 是否参与PA...
- 夏虹梁耀军何静鲍文朵娜周显光张明超刘志红施少林
- MiR-30新的靶基因Pawr及其在足细胞损伤中的作用研究
- 叶钰亭宋慧杨倩倩卢玉秋孙梦洁鲍文朵娜张昌明张炯吴燕王金泉刘志红施少林
- 线粒体DNA拷贝数检测方法的建立及在肾脏疾病诊断中的应用被引量：4
- 2014年
- 目的:建立基于实时定量PCR的线粒体DNA(mt DNA)拷贝数的检测方法,并利用所建立的方法初步检测和探讨mt DNA在肾脏疾病诊断中的应用。方法:设计mt DNA PCR扩增引物,PCR扩增获得mt DNA片段,与T载体质粒连接,构建mt DNA定量标准品。采用SYBR Green-Ⅰ染料法实时定量PCR方法建立mt DNA定量的标准曲线,检验定量方法的重复性与特异性。利用所建立的方法检测局灶节段性肾小球硬化(FSGS)患者血清mt DNA和尿液微囊泡(MV)mt DNA的变化;此外,还对体外嘌呤霉素氨基核苷(PAN)刺激的足细胞所分泌的MV中mt DNA进行了检测。结果:(1)选取mt DNA特异性引物,通过SYBRGreen-Ⅰ实时定量PCR建立mt DNA拷贝数绝对定量的检测方法具有良好的特异度、灵敏度和重复性;(2)检测10例FSGS患者和6例正常对照血清mt DNA水平发现,FSGS患者血清mt DNA水平明显低于正常对照(P<0.05);(3)检测5例FSGS患者与5例健康对照一定体积尿液中MV mt DNA含量发现,FSGS患者高于健康对照,但FSGS患者尿液MV的含量也显著高于健康对照;(4)受PAN刺激的足细胞,其分泌的MV中mt DNA含量下降,与足细胞内mt DNA含量变化相一致。结论 :本方法为探索mt DNA作为肾脏疾病诊断的生物标志物的可能性提供了有效的实验手段。
- 何静夏虹张昌明刘志红施少林
- 关键词：线粒体DNA实时定量PCR肾脏疾病生物标志物
