昌晓红
- 作品数：167 被引量：528H指数：10
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京大学人民医院研究与发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 卵巢癌抗独特型单链抗体6B11ScFv/鼠HSP70融合蛋白复性条件的研究
- 2009年
- 目的探讨大肠杆菌表达的卵巢癌抗独特型单链抗体/小鼠热休克蛋白70(6B11ScFv/mHSP70)融合蛋白包涵体变性、复性条件,以确定其最佳体外复性条件。方法大肠杆菌表达大量融合蛋白6B11ScFv/mHSP70:①比较不同的裂解液(8mol/L尿素和6mol/L盐酸胍)对包涵体的裂解效率及其对复性蛋白活性的影响;②探索序贯稀释方法,以及氧化还原环境和复性液中不同浓度L-精氨酸对蛋白稀释复性的影响;③比较稀释复性和柱上复性对融合蛋白复性效率及活性的影响。采用Bradford法测定包涵体裂解液与复性后蛋白浓度。所有复性蛋白活性的检测均采用ELISA方法。结果以包涵体形式表达6B11ScFv/mHSP70蛋白:①经6mol/L盐酸胍裂解包涵体的效率远高于8mol/L尿素,但前者复性所得蛋白活性低,6mol/L盐酸胍彻底裂解的包涵体经8mol/L尿素透析后再复性,复性效率显著提高;②序贯稀释方法可提高蛋白复性效率;加入0.5mol/LL-精氨酸可降低稀释复性过程中蛋白聚集物的产生,提高复性效率;加入还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSH)浓度比为1:5时,可提高复性后蛋白活性;③柱上复性可一步完成蛋白的复性和纯化,所得蛋白纯度较高,但复性效率和复性后蛋白活性较稀释复性低。结论本研究建立了6B11ScFv/mHSP70融合蛋白的最佳复性条件:包涵体经6mol/L盐酸胍彻底裂解后,再经8mol/L尿素透析,然后进行序贯稀释复性,且复性液中加入0.5mol/LL-精氨酸和GSH:GSSH=1:5以提高复性效率和蛋白活性,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
- 张果昌晓红成夜霞叶雪程洪艳魏丽惠崔恒
- 关键词：卵巢肿瘤重组融合蛋白质类HSP70热休克蛋白质类包涵体
- 卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体3D12的制备及初步研究被引量：1
- 2008年
- 目的:制备卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体并进行初步鉴定,为深入研究卵巢癌疫苗的主动免疫机制奠定基础。方法:以卵巢癌抗独特型单克隆抗体6B11作为免疫原,采用杂交瘤技术制备抗抗独特型单克隆抗体3D12。经酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫组织化学、流式细胞学、免疫印迹杂交等检测其特异性结合抗原的性质;竞争抑制实验鉴定其特异性结合的抗原表位。结果:获得1株稳定分泌3D12的杂交瘤细胞,所分泌的3D12能够特异性结合6B11及卵巢癌初始抗原OC166-9,并能竞争抑制COC166-9(抗OC166-9的单克隆抗体Ab1)与OC166-9的结合。免疫印迹杂交显示,3D12与COC166-9免疫沉淀的蛋白的相对分子质量相同。该抗体为IgM,亲和力约为8.34×107L/mol。结论:卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体3D12属Ab1样Ab3,间接证实6B11为抗原内影像型抗独特型抗体。
- 张超崔恒李小平叶雪付天云冯捷昌晓红魏丽惠
- 关键词：卵巢肿瘤抗体抗独特型抗体单克隆
- 卵巢癌抗独特型抗体与热休克蛋白融合蛋白的制备及应用
- 本发明涉及卵巢癌抗独特型抗体与热休克蛋白融合蛋白的制备及应用。本发明进行了卵巢癌抗独特型单链抗体6B11ScFv与热休克蛋白(HSP)融合蛋白(6B11ScFvHSP)的构建、制备及其体外抗卵巢癌活性的研究，该融合疫苗同...
- 崔恒昌晓红张果程洪艳刘春雨叶雪成夜霞付天云
- 文献传递
- 卵巢肉瘤样癌细胞系的生物学特性及对化疗药物的敏感性
- 2006年
- 目的研究人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系BUPH:OVSC2的生物学特性,筛选卵巢肉瘤样癌敏感的化疗药物。方法以手术切除的卵巢肉瘤样癌腹壁转移组织为材料,进行体外培养。将永生化基因———SV40T抗原基因转染第10代细胞,经筛选,抗性克隆扩大培养,得到人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系。通过光学显微镜、电子显微镜、生长曲线测定、染色体分析、双层软琼脂培养、裸鼠接种、免疫组化等,研究其生物学特性。用MTT的方法检测该细胞系对顺铂、阿霉素、足叶乙甙、拓扑替康四种化疗药物的敏感性。结果人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系,BUPH:OVSC2,现已传至100余代。其生物学特性为,形态学观察细胞呈肉瘤样细胞形态,超微结构证实为上皮起源;细胞生长旺盛;具有恶性细胞的特征,恶性度高。该细胞在体外对阿霉素和顺铂非常敏感,对足叶乙甙尚敏感,对拓扑替康不敏感。结论BUPH:OVSC2为一株恶性度高的人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系,保留了其来源细胞的生物学特性,阿霉素与顺铂联合治疗可能是卵巢肉瘤样癌较敏感的化疗方案。
- 刘广芝冯捷崔恒昌晓红
- 关键词：卵巢肿瘤肉瘤样癌细胞系永生化化学敏感性
- 初诊晚期上皮性卵巢癌的规范化治疗被引量：10
- 2020年
- 卵巢癌年发病率居女性生殖系统恶性肿瘤第3位,呈逐年上升趋势,而死亡率位居女性生殖系统恶性肿瘤之首,严重威胁女性健康。由于早期临床症状不典型,卵巢癌常不能早期诊断,多数患者初诊时即为晚期。因此,规范化治疗已成为初诊晚期卵巢癌的重要问题。本文将从规范化手术、规范化化疗、规范化维持治疗等方面展开阐述,对初诊晚期卵巢癌临床规范化治疗进行总结。
- 李艺祝洪澜昌晓红崔恒
- 关键词：卵巢癌PARP抑制剂肿瘤细胞减灭术化疗
- 人卵巢浆液性囊腺癌永生化细胞系BUPH∶OVCA-3的建立及其生物学特性被引量：1
- 2003年
- 介绍人卵巢浆液性囊腺癌永生化细胞系的建立 ,研究其生物学特性 .以卵巢浆液性乳头状囊腺癌的腹水细胞为材料 ,进行体外培养 .将永生化基因———SV4 0T抗原基因转染第 2代细胞 ,得到永生化细胞系 .通过光学显微镜、生长曲线测定、染色体分析、双层软琼脂培养、裸鼠接种、免疫组化等 ,研究其生物学特性 ,并与其来源细胞的生物学特性进行比较 .建立了一株人卵巢浆液性囊腺癌永生化细胞系 ,命名为BUPH∶OVCA 3,现已传至 6 0余代 .其生物学特性为 ,细胞生长旺盛 ;具有人体恶性细胞的核型特征 ;细胞恶性度较低 ,不具有集落形成能力及裸鼠接种致瘤性 ;除较未永生化细胞生长速率增快 ,饱和密度增加外 ,仍保留上皮细胞的分化表型 .结果表明 ,BUPH∶OVCA 3为一株恶性度较低的人卵巢浆液性囊腺癌永生化细胞系 ,保留其来源细胞的生物学特性 。
- 刘广芝冯捷付天云叶雪昌晓红
- 关键词：浆液性腺癌细胞系永生化
- TRAP1在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义
- 目的 TNF受体相关蛋白1(TRAP1),也被称为热休克蛋白75 (HSP75),属于HSP90家族一个同源基因,主要定位于线粒体,在心脏肌原纤维、心脏细胞核、胰腺以及血管内皮细胞表面也有表达.TRAP1作为分子伴侣广泛...
- 马瑞琼程洪艳叶雪陈军崔恒魏丽惠昌晓红
- 模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体的构建与表达被引量：4
- 2002年
- 目的 对模拟人卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单链抗体6B11scFv进行人源化改造和表达。方法采用重叠PCR和基因工程技术,将6811scFv基因与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合,构建人源化抗独特型抗体6811VHVLhC基因。用IPTG诱导大肠杆菌进行表达,并采用酶切法、DNA测序、SDS—PAGE电泳、ELISA和免疫印迹技术等进行鉴定。结果酶切和DNA测序表明插入片段正确;SDS—PAGE凝胶电泳显示融合蛋白分子量50 000 Da处有一诱导蛋白带;而不连续非变性凝胶电泳表达产物分子量为100 000 Da;ELISA和免疫印迹结果显示,表达出的6811VHVLhC人源化抗体仍具有6B11scFv和人IgG1CH3的活性。结论 已成功构建并表达出双价的可模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体。
- 崔恒昌晓红冯捷刘蓓曹善津李小平钱和年
- 关键词：抗独特型抗体人源化卵巢肿瘤融合蛋白
- 用于诊断体内恶性实体肿瘤的方法和试剂盒
- 本发明公开用于诊断体内恶性实体肿瘤的方法和试剂盒。本发明包括利用试剂从外周血中去除红细胞和白细胞得到的富集液相中鉴定标志细胞的步骤，其中，标志细胞为DAPI<Sup>+</Sup>/PTPRC<Sup>‑</Sup>/P...
- 昌晓红程洪艳崔恒李艺祝洪澜王建六叶雪
- 文献传递
- 卵巢癌单克隆抗体183B2相关抗原的细胞定位研究
- 卵巢癌单克隆抗体（MAb）183B2是用卵巢癌组织粗提液免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备的具有较好选择性的单抗。卵巢癌组织中Mab183B2的免疫组化染色阳性率为75.6%,经由同位素标记的Mab183B2在人体放射免疫显像...
- 郭慧方冯捷叶雪昌晓红程洪艳付天云
- 关键词：卵巢癌抗原抗体细胞定位
- 文献传递
