李浩明 作品数:23 被引量:123 H指数:6 供职机构: 广东药学院生命科学与生物制药学院 更多>> 发文基金: 广州市科技计划项目 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 文化科学 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
土曲霉洛伐他汀合成调控基因lovE的克隆与表达 2011年 目的克隆表达土曲霉洛伐他汀合成调控基因lovE,为研究lovE蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用原核表达载体pET21b(+)构建lovE原核表达质粒,并在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白。结果构建了pET-lovE原核表达质粒,经原核表达和亲和层析获得6×His-lovE融合蛋白,蛋白纯度在90%以上。结论原核表达可获得lovE蛋白,为lovE蛋白的生物学功能研究奠定了基础。 朱碧云 黄欣 刘宝意 李浩明关键词:土曲霉 洛伐他汀 调控基因 土曲霉与红曲霉双灭活原生质体融合选育洛伐他汀高产菌株 被引量:4 2012年 研究原生质体融合技术选育洛伐他汀高产菌株的方法。土曲霉(Aspergillus terreus)和红曲霉(Monascus anka)用混合酶液(体积分数0.5%溶菌酶,0.3%纤维素酶,0.3%蜗牛酶)分别酶解5.0h和3.5h制备原生质体,土曲霉原生质体和红曲霉原生质体在紫外线(20 W,30cm)下分别照射5min和4min灭活,灭活后混合并用PEG(体积分数30%PEG,0.05mol/LCaCl2,0.05mol/L甘氨酸)介导融合。在187株融合子中筛选得到27株洛伐他汀产量高于红曲霉出发菌株的融合子,其中有7株的洛伐他汀产量是出发菌的2倍以上。双灭活原生质体融合方法成功选育出红曲霉洛伐他汀高产菌株。 李桂杭 朱碧云 李浩明关键词:洛伐他汀 红曲霉 土曲霉 原生质体融合 基于问题的案例教学在发酵工艺原理教学中的应用 被引量:5 2011年 基于问题的案例教学将以问题为主线的分析讨论与真实直观的案例相结合,既可调动学生学习的兴趣和主动性,又可提高其分析问题、解决问题的能力。本文从案例的选择、问题的设计、教学的实施、效果分析等方面探讨了其在发酵工艺原理教学中的应用,以期为本学科的教学改革提供参考。 赵林 周林 李浩明关键词:案例教学 生物制药 洛伐他汀产生菌的原生质体制备、灭活及融合条件研究 被引量:6 2007年 目的探索构建洛伐他汀高产菌株的原生质体制备和融合方法。方法考察了各种细胞裂解酶和渗透压稳定剂等对红曲霉和土曲霉的原生质体制备、灭活及融合的影响。结果和结论土曲霉和红曲霉在加石英砂混合酶体系中获得的原生质体数最多,而最适宜的渗透压稳定剂为0.6mol/L的NaCl。红曲霉的原生质体在紫外灯(18w)下15cm照射50min和土曲霉的原生质体在60℃水浴下保持40min灭活率均达到100%。最适合红曲霉和土曲霉的原生质体融合的条件为20%PEG在28℃下处理15~20min。 林晓波 李浩明关键词:洛伐他汀 原生质体 红曲霉 土曲霉 医学遗传学课程教学改革初探 被引量:2 2007年 在生物技术核心课程遗传学教学实践中,我们积极探索适应学科发展与医药院校特色的教学改革模式。结合建构主义学习理论,确立探究式教学改革的思路,形成“一个中心,两者平衡,四法结合,”大众化教育与精英教育相统一的教学特点。通过理论教学与实践教学的两个阵地开展多个方面的改革实践,初步取得了良好的教学效果。 邱垂源 李浩明 卢丽关键词:遗传学 教学改革 探究式 医药院校 HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量 被引量:4 2008年 目的建立测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量的方法。方法采用HPLC法,以甲醇作溶剂、摇床振荡(150r/min)3h提取洛伐他汀,色谱条件:以甲醇-18mmol/L磷酸溶液(体积比为80:20)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为237nm。结果洛伐他汀在5~50μg/mL质量浓度范围内与峰面积线性关系良好,加样平均回收率为100.75%,RSD为0.87%。结论本方法简便有效,重复性好,可作为红曲霉相关产品的质量控制方法。 李桂杭 李浩明关键词:高效液相色谱法 红曲霉 洛伐他汀 SMART技术构建红曲霉全长cDNA文库 被引量:4 2009年 目的构建红曲霉cDNA文库,为红曲霉功能基因的研究以及筛选、克隆红曲霉次生代谢产物合成途径相关基因奠定基础。方法采用SMART( switching mechanism at 5 'end of RNA transcript)技术构建红曲霉全长cDNA文库,经涂平板和酶切反应测定文库的克隆数、重组率,PCR测定插入片断的大小。结果原始文库的库容为2.03×10^5,重组率达94%。插入片段大小多在0.7—2.0kb,平均大小在1kb左右。结论所构建文库的代表性和重组片段的序列完整性达到了用于目的基因的分离筛选和克隆表达的建库要求。 朱碧云 高蓝 黄欣 李浩明关键词:红曲霉菌 CDNA文库 SMART 表面展示技术在污染环境生物修复中的应用 被引量:1 2005年 革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌和酵母中已建立多个表面展示短肽和蛋白质的系统.在微生物细胞表面展示外源蛋白对污染环境的生物修复有着重要的意义.展示金属结合蛋白(肽)的微生物可用于污染土壤和工业废水的净化,展示有机磷水解酶的微生物将用于有机磷污染物的脱毒.微生物表面展示技术将成为污染环境生物修复的有效策略.这一技术的研究还是一个新领域,要使其得到应用还有许多问题需要解决. 高蓝 李浩明关键词:生物修复 生物吸附 脱毒 利用RAPD标记分析番茄杂种遗传纯度 被引量:4 2006年 本研究用350条10碱基的随机引物对番茄优良一代杂交品种毛粉808、毛粉818和强选1号进行了RAPD分析,筛选出6个可用于鉴定这3个杂种遗传纯度的RAPD标记:S16950、S1019400、S1072683、S14221270、S1388800和S1503750。另外,筛选出8个母本特异的RAPD标记:S66740、S66780、S169570、S178570、S5051700、S13161057、S1388952和S1458650;其中标记S66740和S13161057可以将西北地区种植的5个主要番茄品种分为两组,毛粉808、毛粉818和毛粉802为一组,西粉3号和强选1号为另一组,这些标记可用于部分番茄品种的鉴定。并克隆了S1072683、S1388952和S13161057这3个RAPD标记。 高蓝 李浩明关键词:RAPD 番茄 红曲霉聚酮类次生代谢产物的生物合成 被引量:3 2008年 红曲霉可产生多种聚酮类次生代谢产物,主要包括红曲色素、莫那可林K和桔霉素。其中红曲色素广泛用于食品着色,莫那可林K用作降血脂的药物,而桔霉素则对脊椎动物包括人体有肾毒性。本文对这几类聚酮类次生代谢产物的生物合成途径、生物合成相关的聚酮合成酶等方面的研究进展进行了综述。 高蓝 李浩明关键词:红曲霉 红曲色素 桔霉素