李海玉
- 作品数:18 被引量:49H指数:5
- 供职机构:重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 沉默GRP78/BIP表达对人膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及机制被引量:3
- 2015年
- 目的:探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78/BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA,利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞,分别采用Realtime PCR、Western blot在mRNA和蛋白水平检测细胞内GRP78、MMP2、MMP9、Timp-2表达,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测沉默GRP78表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响。结果:实验(siRNA-GRP78)T24细胞中GRP78表达显著降低,细胞侵袭迁移能力明显受到抑制,MMP2、MMP9表达降低,而Timp-2表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默GRP78能明显抑制人膀胱癌细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与影响MMP2、MMP9、Timp-2表达相关。
- 伍家燕樊建军曾帆李海玉李韵张寒韬白鑫刘革力宋方洲
- 关键词:GRP78膀胱癌
- 长链非编码RNA NCK1-AS1在宫颈癌中的作用及其分子机制研究
- lncRNA NCK1-AS1是我们前期基于TCGA宫颈癌测序数据筛选到的新的宫颈癌预后标志物之一,其位于3号染色体长臂22区3亚带,根据ENCODE组蛋白修饰数据和ChromHMM染色体状态分割数据分析,发现 NCK1...
- 李海玉
- 关键词:宫颈癌分子机制
- 芪三酚与人乳腺癌MDC1基因关系的研究
- 2013年
- 目的探讨芪三酚(Res)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制的相关效应及其与MDC1基因的关系。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞株为研究对象,采用MTS方法测定细胞增殖,应用吖啶橙荧光染色观察Res对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,用RT-PCR与免疫印迹方法测定MDC1基因与蛋白表达水平,用小RNA干扰MDC1基因后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡并观察其对Res的敏感性影响。结果 40μmol/L以上的Res可显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖(P<0.05),给予0、60、120μmol/L Res能明显降低MDC1基因和蛋白的表达(P<0.05)。用小RNA干扰MDC1基因后,流式细胞术分析显示,实验组(MDC1-siRNA)的细胞凋亡率[(45.13±6.2)%]较阴性对照组[(24.34±2.6)%]和未处理组[(17.69±4.9)%]明显上升(P<0.05),MTS结果显示MDC1基因干扰后细胞对Res的敏感性增加。结论40μmol/L以上的Res可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖,Res可以有效降低MDC基因和蛋白的表达并促进细胞的凋亡。用小RNA干扰MDC1基因(MDC1-siRNA)后,MDA-MB-231细胞对Res的敏感性增加。
- 马冬梅余畅麦力吴晓彬汪长东高月李海玉李韵宋方洲
- 关键词:乳腺癌MDC1
- 双氢青蒿素对肺癌细胞株H1299增殖与放疗增敏的影响被引量:7
- 2015年
- 目的:研究双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对非小细胞肺癌H1299放疗增敏的影响。方法:通过CCK-8法测定双氢青蒿素的IC10,选择低毒剂量IC10作为实验浓度,采用CCK-8法测定DHA对H1299细胞增殖的影响;流式细胞术、Hoechest33258染色分别检测DHA对细胞周期和凋亡的影响;软琼脂集落形成实验检测DHA对放疗敏感性的影响。结果:双氢青蒿素的IC10为14.87μmol/L,双氢青蒿素以剂量依赖性的方式抑制H1299细胞增殖,并使细胞阻滞在S期,增加放疗敏感性。结论:青蒿素能明显抑制细胞增殖,增加放疗敏感性。
- 廖奎王志令彭志平李海玉李娟
- 关键词:双氢青蒿素增殖放疗敏感性
- siRNA介导的Bmi-1基因沉默对乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭迁移的影响被引量:4
- 2014年
- 目的:利用小干扰RNA技术沉默Bmi-1基因的表达,探讨其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭转移能力的影响。方法:设计并化学合成了针对Bmi-1的小干扰RNA,转染具有高转移性的MDA-MB-231细胞,利用qRT-PCR和Western blot分别检测Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过Transwell小室、Matrigel胶模型﹑流式细胞术,观察Bmi-1被沉默后对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生物学行为的影响。结果:qRT-PCR和Western结果显示,Bmi-1-siRNA转染组Bmi-1基因表达水平被有效抑制。与对照组相比,Bmi-1-siRNA转染组的细胞侵袭转移能力明显下降,细胞周期发生明显变化,细胞的增殖受到明显抑制。结论:抑制Bmi-1基因的表达可明显抑制MDA-MB-231细胞的侵袭迁移能力。
- 李海玉武向梅陈兴凤李韵樊建军刘革力宋方洲
- 关键词:BMI-1RNA干扰迁移
- 抑制Bmi-1基因表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响被引量:6
- 2014年
- 目的利用小干扰RNA技术沉默Bmi-1基因的表达,探讨其对人鼻咽癌CNE-1生物学行为的影响。方法设计并化学合成了针对Bmi-1的小干扰RNA,转染具有高转移性的CNE-1细胞,利用qRT-PCR和Western blot分别检测Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过Transwell小室、Matrigel胶模型﹑流式细胞术,观察Bmi-1被沉默后对鼻咽癌细胞株CNE-1生物学行为的影响。结果 qRT-PCR和Western结果显示,Bmi-1-siRNA转染组Bmi-1基因的表达水平被有效抑制。与对照组相比,Bmi-1-siRNA转染组的细胞侵袭迁移力明显下降,细胞被阻滞在S期。结论抑制Bmi-1基因的表达可有效降低CNE-1细胞侵袭迁移的能力。
- 李海玉陈兴凤余思颖刘革力宋方洲
- 关键词:BMI-1RNA干扰增殖凋亡
- 过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响被引量:7
- 2015年
- 目的:研究过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:将重组慢病毒LV5-ALEX1及阴性对照LV5-NC分别感染乳腺癌MCF-7细胞。感染72 h后,采用实时定量PCR和Western blot分别检测感染后ALEX1的表达情况;感染24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖情况;感染72 h后,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:感染72 h后细胞ALEX1 mRNA表达水平明显上升(165.81±12.14 vs 52.29±2.32,P<0.01),实验组与对照组相比,细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加(20.55%±2.50%vs 3.60%±1.614%,P<0.05)。结论:过表达ALEX1能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。
- 曾帆高月伍家燕李海玉樊建军李韵张寒韬刘革力宋方洲
- 关键词:乳腺癌MCF-7细胞细胞增殖凋亡
- BCL11A在宫颈癌中的表达及其临床意义被引量:2
- 2017年
- 目的:深入研究BCL11A在宫颈癌组织及癌旁正常组织中的表达情况及其与临床病理因素的相关性。方法:收集62例宫颈癌组织及相对应的癌旁正常组织,制作成石蜡切片,并通过免疫组织化学法检测BCL11A蛋白在宫颈癌组织和癌旁正常组织中的表达,并结合患者资料,采用卡方检验分析BCL11A的表达与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结受累等临床病理因素之间的关系。结果:(1)免疫组化结果显示,相比癌旁宫颈正常组织,BCL11A在癌组织中表达显著升高,并且具有统计学意义(P<0.01)。(2)BCL11A在宫颈癌组织中的表达定位也具有差异性,BCL11A在宫颈癌组织中的表达主要定位于细胞核,而在癌旁正常组织中BCL11A的表达主要定位于细胞质。(3)BCL11A的表达与患者的年龄(P=0.436)、临床分级(P=0.683)、肿瘤大小(P=0.734)以及淋巴结转移数目(P=0.439)无关,但与淋巴结受累情况有关,出现淋巴结转移(N1-3)的患者中BCL11A蛋白的表达水平高于未出现淋巴结转移(N0)的患者(P=0.043)。结论:BCL11A在宫颈癌组织中高表达,在癌旁正常组织中表达较低;BCL11A的表达与宫颈癌患者的淋巴结转移情况相关,即出现淋巴结转移的患者BCL11A的表达较高;在宫颈癌组织中BCL11A的表达主要定位于在细胞核中,而在癌旁正常组织中,BCL11A的表达主要定位于细胞质中。BCL11A可能在宫颈癌的发生发展中起着重要作用。
- 白鑫张寒韬李海玉曾帆伍家燕刘革力宋方洲
- 关键词:宫颈癌免疫组化淋巴结转移
- 单羧酸转运蛋白基因过表达对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学行为的影响被引量:1
- 2014年
- 目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期、侵袭和转移能力的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT及空质粒pcDNA3.1分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞。采用实时定量PCR(qRTPCR)和Western blot法分别检测转染后细胞内MCT基因的表达。Annexin V-FITC/PI染色和PI单染色结合流式细胞术检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期的影响,Transwell实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响,划痕实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力的影响。结果实验组MCT的mRNA和蛋白水平明显高于转染空质粒的阴性对照组和未处理组;MCT过表达能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡,G2期细胞减少、S期细胞增多,同时能抑制癌细胞的侵袭和迁移能力。结论 MCT基因过表达能促进MDA-MB-231细胞的凋亡、调节细胞G2/M期检控点,抑制细胞的侵袭和迁移能力。
- 马冬梅麦力吴晓彬汪长东余畅李海玉李韵高月宋方洲
- 关键词:MCTMDA-MB-231凋亡周期
- MCPH1增强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制
- 2014年
- 目的:研究MCPH1加强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制。方法:将慢病毒转染并筛选好的MCPH1过表达组caski+,和对照组caski-,分别用顺铂(cisplatin)处理,MTT法检测生长抑制效率,DAPI染色观察细胞凋亡形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测相关基因Bax、Caspase-3和P53 mRNA表达。结果:caski+cddp+组的生长抑制作用比caski-cddp+相更强,并呈时效和量效关系;DAPI染色形态学显示caski+cddp+组凋亡小体增多,可见致密强荧光;流式细胞仪检测凋亡率结果为caski+cddp+组凋亡率比caski-cddp+组高13.21%,其中晚期凋亡更明显,caski+cddp+组比caski-cddp+组高17.16%;Real-time PCR检测基因Bax、Caspase-3的mRNA水平,caski+cddp+组比caski-cddp+组分别高出2倍和77%,caski+cddp+组抑癌基因P53的mRNA水平也有上升。结论:MCPH1能增强宫颈癌caski细胞对顺铂的敏感性,为MCPH1的进一步研究和宫颈癌的化疗耐药性研究奠定了基础。
- 李韵麦力张冀马冬梅李海玉樊建军宋方洲
- 关键词:宫颈癌顺铂敏感性