李红玉 作品数:6 被引量:7 H指数:2 供职机构: 浙江省医学科学院 更多>> 发文基金: 浙江省重大科技专项资金 国家自然科学基金 卫生部科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 化学工程 更多>>
适配体与病毒性感染诊断及治疗 2013年 适配体(Aptamers)是通过指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,从随机核酸文库中筛选出来的单链寡核苷酸,已在临床医疗及其他领域得到日益广泛的应用.与抗体相比,适配体具有很多优点,如高亲和力、高特异性、分子量小、几乎无免疫排斥反应、结构稳定、易于合成等.可用于适配体筛选的靶标范围非常广,包括有机小分子、蛋白质、完整细胞及病毒颗粒等.迅速可靠的病原检测对于病毒性传染病的成功预防和治疗具有重要意义.随着严格筛选和快速分离技术的进步,适配体在病毒感染的检测治疗中显示出巨大的潜力.本文概括介绍了适配体在病毒研究方面的最新应用进展及未来前景. 李红玉 阎辉关键词:适配体 病毒检测 病毒治疗 天花粉蛋白融合超正电荷绿荧光蛋白大幅增强抗肿瘤效能 目的 天花粉是我国的传统中药,但作为临床药物的天然天花粉蛋白(TCS)注射液抗癌效能欠佳,其缺点还包括肾毒性和许多类型癌症对其不敏感,这主要是受限于天花粉蛋白的细胞受体分布差异。本研究针对上述天花粉蛋白须通过其细胞膜受体... 李红玉 罗砚曦 阎辉关键词:天花粉蛋白 抗肿瘤 超正电荷绿荧光蛋白+36GFP作为核酸载体的细胞穿透性分析 被引量:2 2013年 旨在通过原核表达纯化超正电荷绿色荧光蛋白+36GFP,研究其与核酸的结合作用及作为核酸载体的细胞转导功能。将pET+36GFP-HA2质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,然后表达纯化+36GFP蛋白。将得到的目的蛋白在特定浓度下分别转导293细胞、HepG2细胞、A549细胞和B16细胞,流式细胞仪检测+36GFP的转导效率;+36GFP蛋白(100 nmol/L)转导A549细胞,激光共聚焦显微镜观察结果;将+36GFP蛋白与质粒DNA按不同比例孵育,凝胶阻滞实验检测+36GFP与DNA的结合能力;激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测+36GFP蛋白携带质粒DNA转导细胞后报告基因的表达。结果显示,+36GFP蛋白具有较高的细胞转导效率,且随浓度升高转导效率增加,呈浓度依赖性。凝胶阻滞实验显示,+36GFP能够与质粒DNA结合,阻滞DNA在凝胶中迁移,且呈现一定的浓度依赖性。+36GFP包裹质粒转导细胞后,可高效携带质粒DNA转导进入细胞,使质粒报告基因得到表达。本研究成功表达纯化了+36GFP蛋白,证实该蛋白具有较高的细胞转导效率,可将外源核酸携带入细胞使外源基因得到表达。 李红玉 房有荣 于海涛 俞盈 阎辉关键词:细胞转染 CXCL12(SDF-1)/CXCR4信号传导通路及其肿瘤相关性研究进展 被引量:5 2011年 细胞因子是一组分子量为8~30kD的小分子信号蛋白,多为水溶性蛋白和糖蛋白,在免疫系统中起核心作用,参与免疫和炎症反应。趋化因子是细胞因子中的一个亚家族, 李红玉 陈科达 于海涛 阎辉关键词:信号传导通路 肿瘤相关性 CXCR4 水溶性蛋白 信号蛋白 Zeocin和GFP双筛选标记重组痘苗病毒载体的构建 2012年 目的为研究重组痘苗病毒通用载体,构建融合Zeocin和GFP双筛选标记质粒pcB-Zeo-GFP。方法质粒LeCo-G/Zeo含有Zeo-GFP融合基因片段,通过PCR反应、BamHI酶切后连接替换空白质粒pCB的筛选基因gpt,通过菌落PCR,酶切图谱分析及测序分析鉴定重组质粒,构建成功后将其与野生型痘苗病毒进行位点特异性同源重组,经Zeocin药物筛选2代后,用流式细胞仪观察重组痘苗病毒GFP表达。结果经菌落PCR,1号、5号和10号菌落中扩增出426bp的目的条带,与预期的大小完全一致,经酶切分析和DNA测序进一步验证了重组质粒pCB-zeo-GFP;该质粒与野生型痘苗病毒同源重组,得到了重组的痘苗病毒;Zeocin筛选2代后,病毒上清感染细胞,流式细胞分析7.18%的细胞中有GFP的表达,而阴性对照仅有1.43%;Zeocin药物筛选5代后,通过激光共聚焦可在80%以上的细胞中观察带GFP;提取的重组痘苗基因组DNA也扩增出预期大小目的条带。结论 含Zeocin和GFP双筛选标记的新型重组痘苗病毒不仅具有可观察性且具有药物抗性,非常容易进行筛选鉴定。 房有荣 李红玉 陈科达 周文硕 阎辉关键词:痘苗病毒 GFP 新型基因工程天花粉融合蛋白抗肿瘤效能初步研究 天花粉是我国的传统中药,原本用于计划生育引产终止妊娠,后来发现天花粉具有抗肿瘤和抗病毒(包括抗艾滋病毒)等广泛药理作用.但目前作为临床药物的天花粉注射液抗癌效能欠佳,其缺点包括肾毒性和许多类型癌症对其不敏感,这主要是受限... 李红玉 阎辉