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银杏内酯B对培养星形胶质细胞的抗缺血作用及其机制: 2006年; 目的探讨银杏内酯B(Ginkgolide B,Gin B)对缺血中的星形胶质细胞的作用及其机制。方法以新生小鼠纯化的星形胶质细胞,通过缺血(1%O2)或经Gin B预处理,观察细胞形态,活力的变化;利用Westernblot分析bystin与磷酸化Bad蛋白(phosphorylated-Bad,p-Bad)表达的变化。结果星形胶质细胞在缺血0.5h或3h后,变成有反应性特征的星形胶质细胞,活性增高,bystin、p-Bad表达均增加;缺血24h后,细胞变稀疏,胞体变小,突起减少;活性降低;bystin、p-Bad表达明显减少甚至消失;经过Gin B(120μmol/L)预处理后再进行缺血24h,细胞形态较直接缺血明显改善,细胞活性与bystin、p-Bad的表达量均增加。结论Gin B对缺血星形胶质细胞具有保护作用,其作用机制与刺激bystin生成以及增加p-Bad表达有关。; 杜方吴小梅朱俐; 关键词：星形胶质细胞银杏内酯B

银杏内酯B与低氧预适应对氧-葡萄糖剥夺星形胶质细胞的保护途径被引量：2: 2006年; 目的:观察银杏内酯B与低氧预适应对氧葡-萄糖剥夺模型中星形胶质细胞的影响,分析该影响作用途径。方法:实验于2004-10/2005-10在南通大学航海医学研究所完成。①选用新生1d的ICR小鼠15只,雌雄不拘。②传3代后的星形胶质细胞,将培养基换成无糖DMEM培养,加入银杏内酯B,置入体积分数0.95空气+体积分数0.05CO2培养箱24h后,进行氧-葡萄糖剥夺实验,培养基换成无糖Hank溶液,置37°C体积分数0.01O2+体积分数0.94N2+体积分数0.05CO2培养箱进行缺氧24h后,换成含150g/L新生牛血清的DMEM/F12完全培养液在体积分数0.95空气+体积分数0.05CO2培养箱复氧24h。③低氧预适应0.5或3h,用原完全培养基培养24h后进行氧-葡萄糖剥夺实验。④利用相差显微镜观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑盐比色法测定线粒体脱氢酶活性。免疫印迹分析促红细胞生成素表达的变化。⑤计量资料差异比较采用单因素方差分析,组间差异比较采用Q检验(Newman-Keuls法)。结果:①氧-葡萄糖剥夺实验对星形胶质细胞活性的影响:氧-葡萄糖剥夺0.5或3h后星形胶质细胞活性增强;氧-葡萄糖剥夺24h后,细胞活性明显下降(P<0.01)。②银杏内酯B对氧-葡萄糖剥夺24h后星形胶质细胞活性的影响:预先给予120μmol/L银杏内酯B作用24h,再进行氧-葡萄糖剥夺24h,细胞形态基本正常;在一定浓度范围内银杏内酯B对缺氧损伤有明显的保护作用,以120μmol/L银杏内酯B预处理后细胞活性明显高于氧-葡萄糖剥夺24h后(P<0.01)。③银杏内酯B(120μmol/L)对氧-葡萄糖剥夺24h后星形胶质细胞表达促红细胞生成素的影响:经氧-葡萄糖剥夺0.5或3h或单纯用银杏内酯B处理后的比值明显高于未进行氧-葡萄糖剥夺者(P<0.01);银杏内酯B预处理后再进行氧-葡萄糖剥夺24h表达明显高于氧-葡萄糖剥夺24h后(P<0.05)。④低氧预适应对氧-葡萄糖剥夺24h后星形胶质细胞活性的影响:低氧预适; 杜方朱俐; 关键词：星形细胞红细胞生成素

银杏内酯对培养的皮层神经元的影响及机制: 2005年; 目的:探讨银杏内酯(Gin)对体外培养的皮层神经元的影响及机制。方法:用Gin处理皮层神经元,以细胞活性、丙二醛(MDA)含量、促红细胞生成素(EPO)的表达为指标。结果:经Gin处理的神经元,胞体饱满,突起变粗变长,细胞活性明显升高,MDA含量降低,EPO表达显著上升。结论:Gin对神经元生长有营养保护作用,其机制可能与提高神经元EPO表达水平,增强神经元抗氧化能力有关。; 吴小梅杜方朱俐; 关键词：银杏内酯神经元丙二醛促红细胞生成素

星形胶质细胞低氧预适应对缺氧神经元的保护作用被引量：1: 2005年; 目的:观察星形胶质细胞低氧预适应对神经元缺氧损伤的影响及机制。方法:收集低氧预适应后星形胶质细胞条件培养液(ACM)用于神经元培养。用MTT比色法检测细胞活性,W estern B lot法分析星形胶质细胞促红细胞生成素的表达。结果:星形胶质细胞缺氧0.5h和3h后,活性升高,促红细胞生成素表达增多;神经元缺氧后活性明显降低,但低氧处理的ACM可阻止此变化的发生。结论:低氧预适应的ACM对神经元缺氧具有明显的保护作用,其机制可能是星形细胞表达促红细胞生成素增多,通过培养液作用于神经元,从而抑制神经元缺氧后活性的降低。; 吴小梅杜方朱俐; 关键词：星形胶质细胞条件培养液低氧预适应神经元促红细胞生成素

小鼠大脑皮层星形胶质细胞不同体外培养方法的比较被引量：5: 2006年; 目的:比较离体纯化和培养星形胶质细胞的不同方法,旨在获得高纯度的星形胶质细胞,为进一步研究奠定基础。方法::用原代培养、传代纯化和一次或两次振荡纯化的方法培养星形胶质细胞。结果:原代培养的星形胶质细胞纯度不高;经传代纯化培养后纯度达到99%以上,bystin表达量较少,且能经短时间模拟缺血诱导活性明显增高;经振荡纯化后bystin表达量明显增多,GFAP免疫荧光变亮,能耐受长时间模拟缺血,提示经振荡后星形胶质细胞已经处于“活化”阶段。结论:经过传代纯化的星形胶质细胞纯度最高,可以经模拟缺血诱导成反应性星形胶质细胞,因此能更好地反映其在脑中的功能,是研究星形胶质细胞在脑中的功能和反应性星形胶质细胞较好的培养方法。; 杜方吴小梅朱俐; 关键词：星形胶质细胞离体培养反应性星形胶质细胞

发育及DNA损伤反应调节基因1的研究进展被引量：1: 2007年; 发育及DNA损伤反应调节基因1(regulated in development and DNA damage responses 1,REDD1)又称为RTP801,是一个新近发现的低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)靶基因,在细胞和整体动物缺氧缺血模型中其表达显著升高,随着研究的深入,发现其对多种细胞刺激均能产生应激反应,在细胞凋亡过程中发挥着重要的调节作用;RTP801受到多种细胞信号通路的调控,研究其功能和作用机制可为临床缺血性疾病和肿瘤的防治等提供新的思路。; 吴小梅杜方朱俐; 关键词：低氧诱导因子-1 细胞凋亡

银杏内酯B的药理性预适应对星形胶质细胞缺血损伤的作用机制: 目的：观察银杏内酯B(GinkgolideB)对离体培养的星形胶质细胞缺血损伤的作用，从药理性预适应(PP)角度探讨其作用机制。方法：采用新生小鼠大脑皮层纯化的星形胶质细胞，加银杏内酯B预处理(120μM，2...; 杜方; 关键词：星形胶质细胞缺血损伤药理性预适应银杏内酯B 促红细胞生成素; 文献传递

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杜方

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