杨晓龙
- 作品数：14 被引量：34H指数：4
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信化学工程更多>>
- NGAL重组蛋白的表达与纯化及其促进结肠癌转移的研究被引量：3
- 2015年
- 目的研究NGAL重组蛋白促进人结肠癌细胞SW480转移的作用机制。方法通过基因工程方法构建重组表达载体pet32a-tev-NGAL,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达;采用亲和层析纯化,并用tev酶进行酶切获得NGAL重组蛋白;Transwell与基质胶实验检测NGAL对细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测NGAL对肿瘤转移相关蛋白表达的影响;ELISA检测不同肿瘤分期结肠癌患者血液中NGAL表达情况。结果成功构建pet32a-tev-NGAL原核表达载体,并通过体外表达与纯化获得NGAL重组蛋白;该蛋白促进SW480的迁移和侵袭;Western blot检测结果表明,NGAL激活EMT信号通路;ELISA结果表明,NGAL表达量与肿瘤恶化程度成正相关。结论 NGAL通过激活EMT信号通路促进结肠癌细胞SW480转移。
- 刘桦杨晓龙唐丽胡开锋刘明佳刘戟
- 关键词：结肠癌细胞肿瘤转移
- MiR-155通过调节细胞骨架重排影响肺炎克雷伯菌对肺上皮细胞的粘附作用
- 目的：MicroRNAs(miRNAs)在细菌感染过程中对细胞免疫反应的作用逐渐受到重视.然而miRNAs 是如何发挥其调节功能并没有被完全澄清.方法及结果：本研究我们发现当肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneum...
- 滕燕沙凯辉杨晓龙田汉文许光亚刘可云张福梅熊峰王馨苑郭小娟苗峻铭王晓樱陈军利王祎李婧瑜黄宁
- 关键词：MIR-155整合素Α5Β1RAC1
- SIRT1增强青光眼小梁网细胞DSBs修复能力及抗细胞衰老的研究被引量：9
- 2014年
- 目的研究Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶SIRT1与青光眼小梁网细胞(GTM)DNA双链损伤(DSBs)修复能力及细胞衰老之间的关系。方法首先通过RT-PCR和Western blot检测正常小梁网细胞(HTM)与GTM之间SIRT1表达的差异;然后将HTM、GTM细胞分别分为4组,白藜芦醇组(0.5μmol/L Res干预24h)、SIRT1-ShRNA组(构建成功的SIRT1干扰质粒转染细胞)、microRNA34a组(构建成功的microRNA34a表达质粒转染细胞)以及Control组,通过Western blot检测各组细胞中SIRT1表达水平的差异;SA-β-Gal衰老染色检测连续生长10h、32h、3d、6d后各组细胞的衰老变化;中性彗星电泳检测经1.33mol/L H2O2液处理0h、2h时各组细胞中DNA双链损伤情况;Western blot检测1.33mol/L H2O2液处理0h、1h、2h后,各组细胞中γ-H2AX表达的变化情况。结果 HTM及GTM细胞中均存在SIRT1的表达,且HTM中的表达要高于GTM;HTM、GTM细胞各组内比较发现,SIRT1蛋白的表达水平呈Res组>Control组>microRNA34a组>SIRT1-ShRNA组趋势;SA-β-Gal衰老染色则发现在相同时间点,GTM细胞的衰老程度均高于HTM细胞,而在同一类细胞中,SIRT1-ShRNA组细胞最先表现出衰老,且随着时间的延长,其衰老程度也最为严重,Res干预细胞24h后,能明显延缓细胞衰老。中性彗星电泳检测表明经氧化剂处理后,GTM组双链DNA的损伤情况比HTM组严重,并呈现出SIRT1-ShRNA组>microRNA34a组>Control组>Res组的趋势,γ-H2AX表达量的检测结果与中性彗星电泳的结果一致。结论 SIRT1表达活性的下调可能是诱发青光眼的因素之一;Res能显著增强HTM细胞中SIRT1的表达活性,上调的SIRT1能促进HTM细胞DNA双链损伤修复的能力,维持细胞基因组的稳定性,进而减缓细胞的衰老。
- 任朋亮范雪娇杨晓龙刘明佳刘戟黄晶晶
- 关键词：SIRT1氧化应激细胞衰老
- 一种水利工程用方便观察水位的测量装置
- 本实用新型公开了一种水利工程用方便观察水位的测量装置，包括横架，所述横架的下端侧壁固定连接有滑杆，所述滑杆上滑动连接有收纳槽，所述收纳槽的下端侧壁固定连接有浮体，所述收纳槽的底壁固定连接有多个伸缩杆，多个所述伸缩杆的上端...
- 张斌曹以马旭东杨晓龙
- 文献传递
- 过表达miR-18a靶向ATM对结肠癌细胞增殖和迁移的影响
- 2016年
- 目的研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),通过转染不同组分上调或下调内源性miR-18a在结肠癌细胞株HCT116中的表达。采用实时荧光定量(qRT)-PCR、Western blot、MTT法、克隆形成实验、Transwell等方法,检测过表达miR-18a调控ATM基因的表达对体外结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果软件预测发现miR-18a的其中一个靶基因是ATM。通过瞬时转染,过表达内源性miR-18a,可降低HCT116细胞内靶基因ATM蛋白的表达水平。转染miR-18amimics后能够下调HCT116细胞的增殖活力,同时显著降低HCT116细胞的克隆形成能力、横向迁移能力及纵向侵袭能力,以上各项改变均与miR-18a过表达有关。结论证实了miR-18a通过负向调控ATM的表达,抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移能力。
- 刘明佳陈利弘胡开锋杨晓龙董婧颖刘戟
- 关键词：ATM迁移结肠癌细胞HCT116
- 影响肺炎克雷伯菌粘附上皮细胞作用的研究
- 2014年
- 目的:研究不同理化及生物因素对肺炎克雷伯菌粘附宿主细胞的影响,探讨其粘附宿主细胞的可能机制。方法:用肺炎克雷伯菌临床分离株K.pnueumoniae 03183(K.p03183)建立粘附宿主细胞模型,通过结晶紫染色及扫描电镜观察其粘附效率;以不同理化及生物因素预处理K.p03183,平板菌落计数法观察上述因素对K.p03183粘附细胞的影响;用基因芯片技术,检测HMGN2蛋白预处理细菌对于其粘附相关基因表达的影响。结果:K.p03183可粘附至A549、T24、HeLa等3种上皮细胞系,其粘附率与E.coli 25992接近;氯化锂和盐酸胍、高碘酸钠及热预处理可明显降低K.p03183对于A549和T24的粘附率(P<0.05);同时,胃蛋白酶及HMGN2蛋白预处理K.p03183,也可抑制其对A549和T24的粘附(P<0.01);但胰蛋白酶预处理却能增加细菌对于A549细胞的粘附(P<0.05);同时,HMGN2还可通过上调dksA基因表达,从而干扰细菌粘附细胞。结论:肺炎克雷伯菌可能借助细胞壁及其表面蛋白和碳水化合物等成分粘附至宿主上皮细胞,通过非共价键结合表面蛋白或消除碳水化合物成分,抑制细菌粘附至宿主细胞。
- 李娜范波吴桂霞沈晓飞郑爽任来彬杨晓龙郭小娟王馨苑滕燕李婧瑜王晓樱黄宁
- 关键词：肺炎克雷伯菌粘附上皮细胞HMGN2
- 食管鳞癌中miRNA224调控RKIP基因表达及miRNA224基因启动子区甲基化的研究
- 2016年
- 目的研究食管鳞癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)、miRNA224表达情况,miRNA224对RKIP的靶向作用,以及miRNA224基因上游启动子区甲基化水平。方法在食管鳞癌组织及癌旁对照组织临床标本中,用免疫组化法检测RKIP蛋白的表达;用荧光定量PCR法检测miRNA224的表达,荧光素酶报告基因检测miRNA224对RKIP的靶向作用;亚硫酸氰盐测序PCR(BSP)法检测食管鳞癌及癌旁对照组织miRNA224基因上游启动子区甲基化水平。结果在食管鳞癌组织中,RKIP低表达,miRNA224高表达;在癌旁对照组织中,RKIP高表达,miRNA224低表达。荧光素酶报告基因验证miRNA224可靶向抑制RKIP3′UTR表达。BSP法显示食管鳞癌组织miRNA224上游启动子区呈低甲基化状态,癌旁对照组织呈高甲基化状态。结论食管鳞癌组织RKIP表达下降、miRNA224基因启动子甲基化状态降低,miRNA224表达上升,RKIP是miRNA224下游作用的靶点,可能同食管鳞癌发生密切相关。
- 牛中喜杨晓龙刘明佳胡开锋陈利弘刘戟
- 关键词：RKIP食管鳞癌甲基化
- DNA错配修复基因MSH2和MLH1单核苷酸多态性与食管癌发生风险相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨DNA错配修复基因MSH2和MLH1单核苷酸多态性对于食管癌易感性的潜在作用。方法:采用医院为基础的病例-对照研究方法,应用PCR-RFLP检测包括正常对照132例,食管癌患者169例MSH2c.2063T>G和MLH1IVS14-19A>G两个基因多态性位点的基因型。通过Logistic回归分析计算出比值比(OR)和95%置信区间(95%CI),估计不同基因型频率分布与食管癌发生风险的关系。结果:MSH2c.2063T>G携带突变等位基因个体发生食管癌的风险是非携带者的3.24倍。MLH1IVS14-19A>G突变等位基因携带者发生食管癌风险是非携带者的1.58倍。对MSH2和MLH1基因交互作用分析发现两突变基因型携带者发生食管癌风险大大增加并具有显著的统计学意义。结论:DNA错配修复基因MSH2c.2063G突变等位基因和MLH1IVS14-19G突变等位基因可能在促成食管癌发生过程起到一定作用。
- 何丹任鹏亮范雪娇杨晓龙李俊葓刘琳刘戟
- 关键词：食管癌单核苷酸多态性
- 二甲双胍抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭及其机制被引量：1
- 2022年
- 目的体外实验研究二甲双胍(Met)对前列腺癌DU145增殖、迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法0、5、20、50 mmol·L^(-1)Met处理细胞后,CCK8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western Blot实验在mRNA和蛋白水平检测人抗原R(HuR)的表达变化;分别过表达和敲低HuR后,用上述相同实验方法检测DU145的增殖、迁移、侵袭的能力;Western Blot法检测Met处理,过表达HuR或敲低HuR后对AKT/mTOR通路的影响。结果Met处理细胞后,DU145的增殖、迁移、侵袭能力降低,并呈现出浓度依赖性,同时在mRNA和蛋白水平降低了HuR的表达;敲低HuR对细胞增殖、迁移、侵袭有一定抑制作用,而过表达HuR对细胞则有相反的作用;Met和低表达HuR组抑制了细胞中AKT、mTOR的磷酸化,而过表达HuR则促进了AKT、mTOR的磷酸化。结论Met可抑制前列腺癌细胞DU145的增殖、迁移、侵袭;其作用机制可能是Met通过降低HuR表达进而抑制AKT/mTOR通路的异常激活,从而抑制DU145的活性。
- 陈丹董婧颖耿瑞蔓吴文兵向彬杨晓龙张正坤纪旭旭陈利弘刘戟
- 关键词：二甲双胍前列腺癌DU145细胞迁移AKT/MTOR
- MKK6过表达调控SIRT1影响食管癌细胞肿瘤行为学的体外研究被引量：3
- 2015年
- 目的向食管癌Eca109细胞中转染pcDNA3.1(+)/myc-His A-丝裂原活化蛋白激酶6(MKK6)重组过表达载体,观察过表达MKK6影响沉默信息转录调控因子(SIRT1)表达后肿瘤细胞增殖、凋亡以及侵袭力发生的变化,探讨p38-MAPK-SIRT1调节轴的存在性及其对Eca109细胞各项肿瘤行为学造成的影响。方法根据GenBank中MKK6基因的mRNA序列设计引物,构建MKK6过表达载体;将Eca109细胞分空载体转染组、MKK6过表达载体转染组、MKK6-SIRT1ShRNA共转染组和MKK6-RES(白藜芦醇)组,相应处理后,采用Western blot测定各组Eca109细胞的SIRT1及MKK6表达水平,MTT法检测各组Eca109细胞的增殖活力,Transwell法观察各组Eca109细胞的侵袭力,流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况。结果测序结果表明成功构建MKK6过表达载体;转染MKK6过表达载体可降低Eca109细胞的内源性SIRT1表达,减弱Eca109细胞的增殖活力,促其凋亡,同时可使Eca109细胞的侵袭力增强,以上各项改变均与SIRT1的表达水平有关。结论Eca109细胞内可能存在p38-MAPK-SIRT1调节轴,MKK6及其下游因子对SIRT1可能具有反馈调节作用,可引起Eca109细胞各项肿瘤行为学的变化。
- 杨晓龙胡开锋刘明佳任朋亮陈利弘刘戟
- 关键词：SIRT1ECA109细胞细胞活力细胞侵袭力
