王春丽
- 作品数：13 被引量：175H指数：9
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划军事医学科学院科技创新研究启动基金资助更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种重组全长人脑红素、其生产方法及其应用
- 本发明公开了一种细菌表达生产重组全长人脑红素rhNGB的方法以及用该方法得到的重组全长人脑红素rhNGB，该方法包括将工程菌接种培养、细菌反复冻融、菌体裂解、包涵体裂解、层析纯化和目的蛋白复性等步骤。本发明是在构建人脑红...
- 张成岗王利红高艳王春丽
- 文献传递
- 脑红蛋白mRNA在大鼠脑内的定位被引量：44
- 2003年
- 目的 了解脑红蛋白 (NGB)mRNA在大鼠脑内的定位。 方法 用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术观察了NGBmRNA在成年大鼠脑中的正常分布。 结果 NGBmRNA在成年大鼠脑中有非常广泛的表达 ,其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑、下丘脑、嗅球及小脑等。NGBmRNA阳性物质定位于神经元的细胞质。 结论 NGBmRNA在大鼠脑中有非常广泛的表达 。
- 邓美玉张成岗王航雁李林王春丽周婉琼
- 关键词：脑红蛋白中枢神经系统原位杂交组织化学
- 人脑红蛋白(NGB)全长cDNA序列的克隆被引量：19
- 2002年
- 人脑红蛋白 (neuroglobin ,NGB)是新发现的神经系统特异的携氧蛋白 ,然而其全长cDNA序列一直未见报道 .采用电子序列延伸技术和cDNA序列末端快速扩增技术 (rapidamplificationofcDNAends ,RACE)研究发现 ,人NGB全长cDNA序列为 190 9bp,5′非编码区为 375bp ,编码区 (45 6bp)可编码 15 1个氨基酸 ,3′非编码区为 10 78bp,其中含 2 7bp的 poly (A) (GenBank接受号 :AF4 2 2 797) .综合采用电子序列延伸技术与RACE技术是获得全长cDNA序列的有效方法 ,为后续的功能研究提供了重要基础 .
- 王春丽张成岗
- 关键词：全长CDNA序列克隆CDNA末端快速扩增技术
- 大鼠脑红蛋白基因编码区的克隆、多态性分析及该基因组织表达谱研究被引量：27
- 2001年
- 参考人和小鼠脑红蛋白 (Neuroglobin,NGB)的cDNA序列设计简并引物 ,用RT -PCR方法从大鼠脑组织中扩增出大鼠NGB基因编码区的cDNA序列。该序列与小鼠NGB基因编码区的序列同源性为 96% ,与人NGB基因编码区的序列同源性为 88%。进一步分析表明 ,大鼠NGB基因编码区存在多个多态性位点 :1 1 3t c[L38P],1 33a g[N45D],388a g[R1 30G],41 7t c。该序列已被GenBank接受 ,登录号为AF3332 4 5。RT -PCR分析表明 ,该基因在大鼠脑、肝、肾、心肌和骨骼肌中均有较高水平表达 ,提示了其功能上的重要性。
- 张成岗李林邓美玉谢芳王春丽周婉琼王航雁贺福初
- 关键词：脑红蛋白多态性组织表达谱
- 大鼠脑红蛋白(NGB)的原核表达、抗体制备及其细胞分布被引量：15
- 2002年
- 脑红蛋白 (NGB)是新发现的与脑内氧供应密切相关的分子 .为了检测细胞内脑红蛋白的表达、亚细胞分布从而对该分子进行深入的功能研究 ,成功地将大鼠脑红蛋白基因编码区构建于原核表达载体pGEX 4T 2 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得融合表达产物 .对含有融合蛋白的包含体进行溶解和复性 ,用谷胱甘肽S 转移酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,通过免疫家兔获得了兔源性抗NGB多克隆抗体 .采用Western印迹分析技术 ,用该抗体检测NGB基因的真核表达产物 ,证明该抗体有较好的针对NGB蛋白的专一性 ,可用于对NGB的结构和功能研究 .同时 ,用该抗体进行免疫组化分析发现 ,正常成年大鼠神经系统中有较多的NGB免疫反应阳性细胞分布 。
- 张成岗李林邓美玉王春丽谢芳周婉琼王航雁贺福初
- 关键词：脑红蛋白原核表达抗体制备细胞分布
- 大鼠脑红蛋白(NGB)可溶性原核表达和单克隆抗体制备及鉴定被引量：28
- 2003年
- 脑红蛋白 (NGB)是新发现的脑特异的携氧蛋白 .为了对其功能进行深入的研究 ,应用已构建大鼠NGB基因编码区原核表达载体pGEX 4T 2 NGB转化的大肠杆菌BL2 1 ,获得可溶性表达产物 .用谷胱甘肽S 转移酶 (GST)亲和层析柱纯化后作为抗原 ,免疫Balb c小鼠 .通过传统的细胞融合方法制备了抗大鼠NGB的单克隆抗体 ,并对全部 4株单抗进行了亚类和亚型、效价和特异性鉴定 .
- 孙健伟韩洪彦徐文琳王春丽王航雁徐淑玲杨建萍张家洁于凤琴张成岗
- 关键词：脑红蛋白原核可溶性表达单克隆抗体
- 大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织中脑红蛋白基因表达的变化被引量：32
- 2002年
- 邓美玉张成岗王春丽王航雁周婉琼
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤脑组织脑红蛋白基因表达
- 一个中国Gilbert综合征家系的遗传学分析被引量：18
- 2006年
- 对一个中国汉族G ilbert综合征遗传家系致病基因突变位点进行鉴定,以期了解该病的分子遗传学基础。首先提取先证者基因组DNA,PCR扩增尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶UGT1A1基因的5个外显子,以琼脂糖电泳鉴定PCR产物,纯化后直接测序鉴定。基因扫描显示,与血清胆红素水平密切相关的UGT1A1基因在第1和第5外显子存在纯合突变,而UGT1A1基因启动子区域和内含子/外显子剪接边界位点序列未检测到突变。进一步对其他家系成员该基因的相应位点进行突变检测,结果显示他们在第1和第5外显子也存在杂合突变,其中还有两个成员在启动子区域检测到(TA)插入突变。对家系成员未抗凝新鲜血液进行生化检测证实了基因突变分析的结果。综合以上结果发现该家系3种突变并存,致病因素为第1和/或第5外显子突变,为显性遗传,两种突变位点纯合导致先证者出现严重胆红素代谢功能障碍。该家系因此成为G ilbert综合征突变位点及其致病机理研究的一个典型临床病例。
- 余利红高静王春丽王静高艳袁巧玲孙志贤王航雁张成岗
- 关键词：GILBERT综合征基因突变UGT1A1
- 钠钾泵β2亚基C末端编码区酵母双杂交载体的构建与表达
- 2006年
- 以人胎儿脑cDNA文库为模板克隆了钠钾泵β2亚基C末端编码区(N KAβ2ct),构建了表达载体pGBKT 7-NKAβ2ct,并对其进行了表达,对表达产物进行了检测。结果表明,N KAβ2ct长690 bp,pGBKT 7-NKAβ2ct酵母表达载体构建成功,在酵母中表达良好,可用于后续的酵母双杂交文库筛选工作。
- 李谋王春丽刘小林张成岗
- 关键词：酵母表达
- 免疫组织化学方法检测脑红蛋白在大鼠中枢神经系统的分布被引量：35
- 2002年
- 目的 探讨脑红蛋白 (NGB)基因在中枢神经系统中的分布。方法用免疫组织化学ABC法研究了NGB蛋白在成年大鼠脑内的分布和定位。结果NGB蛋白在成年大鼠脑中有非常广泛的表达 ,其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑的部分核团、脑桥及小脑。NGB免疫反应阳性物质定位于神经元的细胞质。结论NGB蛋白在大鼠脑中有非常广泛的表达 。
- 邓美玉张成岗王航雁李林王春丽周婉琼
- 关键词：脑缺氧免疫组织化学方法脑红蛋白中枢神经系统
