王瑞博
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
- 供职机构：昆明理工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 人呼吸道合胞病毒与结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-F1的免疫原性
- 2013年
- 目的在大肠杆菌中表达并纯化人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的融合蛋白TB10.4-F1,检测其免疫原性。方法将重组工程菌TB10.4/pET28a/BL21和TB10.4-F1/pET30a/BL21经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白的表达形式;表达的融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1经His TrapTMHP层析柱进行亲和层析一步纯化后,免疫BALB/c小鼠。小鼠分为TB10.4(30μg/只)、TB10.4-F1(30μg/只)及PBS(200μl)组,分别于0、2、4周免疫小鼠,于每次免疫前1 d经尾部取血,分离血清,ELISA法检测小鼠血清中特异性的IgG水平;于末次免疫2周后摘眼球取血,分离血清,ELISA法检测特异性IgG水平及中和抗体滴度。结果表达的重组融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1的相对分子质量分别约13 300和59 600,均以包涵体形式表达,表达量分别占菌体总蛋白的53.9%和12%;纯化后的重组融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1纯度分别可达95%和80%;与TB10.4组相比,TB10.4-F1组IgG水平明显升高,IgG1/IgG2a值明显降低,但仍大于1;TB10.4-F1组小鼠血清中RSV特异性中和抗体滴度可达log102.699。结论融合蛋白TB10.4-F1免疫原性强,能激发出较为平衡的Th1/Th2反应,并产生抗HRSV的中和抗体。融合蛋白TB10.4-F1有望成为预防HRSV感染的候选疫苗。
- 王瑞博井申荣曾韦锟黄芬
- 关键词：结核分枝杆菌人呼吸道合胞病毒融合蛋白
- 流行性脑脊髓膜炎疫苗的研究进展
- 2009年
- 脑膜炎球菌是引起人类流行性脑脊髓膜炎的病原体.近年来我国流脑的发病率明显上升,主要流行菌群的比例也有所转变.现行的流脑疫苗主要是多糖疫苗、联合疫苗等,而蛋白疫苗还处于研发阶段.该文就近几年脑膜炎球菌疫苗的研究进展做一综述.
- 王瑞博井申荣曾韦锟
- 关键词：脑膜炎球菌流行性脑脊髓膜炎疫苗
- 结核分枝杆菌TB10.4与呼吸道合胞病毒F1蛋白的融合表达
- 2013年
- 目的在大肠杆菌中融合表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)TB10.4蛋白与呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)F1蛋白。方法从MTB标准菌株H37Rv全基因组中扩增TB10.4(N/X)和TB10.4(N/B)基因,分别插入原核表达载体pET-28a和pET-30a中,构建重组表达质粒TB10.4(N/X)/pET-28a和TB10.4(N/B)/pET-30a;从F/18T/DH5α菌株中扩增F1(B/X)基因,与TB10.4(N/B)/pET-30a质粒连接,构建重组表达质粒TB10.4-F1/pET-30a;将质粒TB10.4(N/X)/pET-28a和TB10.4-F1/pET-30a分别转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的重组蛋白进行Western blot鉴定。结果重组表达质粒TB10.4(N/X)/pET-28a和TB10.4-F1/pET-30a经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组TB10.4和TB10.4-F1蛋白相对分子质量约为13 000和59 000,可与鼠抗His单抗特异性结合。结论成功在大肠杆菌中表达了重组融合蛋白TB10.4-F1,为进一步研究其免疫原性及保护性奠定了基础。
- 王瑞博井申荣曾韦锟黄芬
- 关键词：结核分枝杆菌呼吸道合胞病毒融合蛋白
- 一种结核分枝杆菌TB10.4-F1融合蛋白疫苗及制备方法
- 本发明公开了一种制备结核分枝杆菌TB10.4-F1融合蛋白疫苗及其制备方法，该方法将结核分枝杆菌TB10.4蛋白基因与呼吸道合胞病毒蛋白的F1蛋白基因连接在一起，转化到大肠杆菌表达菌株中，经IPTG诱导表达TB10.4-...
- 井申荣王瑞博曾韦锟黄芬
- 文献传递
- 一种结核分枝杆菌TB10.4-F1融合蛋白疫苗及制备方法
- 本发明公开了一种制备结核分枝杆菌TB10.4-F1融合蛋白疫苗及其制备方法，该方法将结核分枝杆菌TB10.4蛋白基因与呼吸道合胞病毒蛋白的F1蛋白基因连接在一起，转化到大肠杆菌表达菌株中，经IPTG诱导表达TB10.4-...
- 井申荣王瑞博曾韦锟黄芬
- 呼吸道合胞病毒重组融合蛋白TB10.4-F1免疫原性和安全性的研究
- 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)是全世界范围内引起婴幼儿下呼吸道感染最重要的病原体,容易诱发毛细支气管炎、肺炎,甚至导致死亡。迄今为止,仍然没有一种安全有效的疫苗来预防R...
- 王瑞博
- 关键词：呼吸道合胞病毒LT
- 文献传递
- 结核分枝杆菌分泌蛋白TB10.4的功能和应用被引量：2
- 2011年
- 近年来,结核的发病率又呈上升趋势,传统的结核疫苗已无法起到有效的保护作用。结核分枝杆菌分泌蛋白由于具有良好的免疫保护性因而备受关注。结核分泌蛋白TB10.4是免疫主导的蛋白,能够激发有效的免疫反应,因而成为研究结核新疫苗靶抗原之一。本文就近几年结核分枝杆菌TB10.4的相关研究作一综述。
- 王瑞博井申荣
- 关键词：结核分枝杆菌卡介苗
