耿仁德 作品数:9 被引量:29 H指数:3 供职机构: 黑龙江农垦总局建三江分局 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 国家自然科学基金 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
富含DHA(脑黄金)鸡蛋的研究与开发 杨焕民 武瑞 王欣 李士泽 贾永全 李鹏 计红 邵红 耿仁德 刘丰河 该课题利用禽类能够富集营养物质于鸡蛋中,在鸡的日粮中加入亚麻籽,使之经鸡的机体转化亚麻籽中多不饱和脂肪酸将这种脂肪酸富集鸡蛋中。并确定了生产富含DHA鸡蛋的饲料配方,研制出了蛋鸡日粮中添加亚麻籽、VE和乙氧基喹啉能生产出...关键词:关键词:DHA 鸡蛋 蛋鸡 过氧化氢诱导BRL细胞凋亡损伤模型的建立 被引量:3 2015年 动物冷应激过程中肝脏因发生氧化应激而受损。本试验采用过氧化氢(H2O2)诱导buffalo大鼠肝细胞(BRL)凋亡,建立体外氧化应激的凋亡损伤模型,为深入研究冷应激对肝脏损伤的机理奠定基础。试验采用不同浓度H2O2刺激BRL细胞2h,运用WST-1法检测细胞生长活力、Annexin-V/FITC-PI双染技术检测细胞凋亡率及Western blot方法检测Caspase-3的表达量来筛选BRL细胞凋亡的H2O2作用浓度。结果显示,与空白对照组相比,150μmol/L H2O2作用后,细胞增殖率明显下降,Caspase-3的蛋白表达量增加,流式细胞仪检测的凋亡率升高,同时细胞坏死较其他H2O2处理组低。结果表明,150μmol/L H2O2作用BRL细胞2h可模拟氧化应激造成的凋亡损伤。 王慧 计红 薛琳琳 耿仁德 郭静茹 王建发 孔凡志 杨焕民 郭丽关键词:过氧化氢 氧化应激 凋亡 籽鹅卵泡颗粒细胞α-烯醇化酶基因RNA干扰表达质粒的构建及鉴定 被引量:1 2014年 目的构建籽鹅卵泡颗粒细胞α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)基因RNA干扰表达质粒,并进行鉴定。方法利用RNAi Designer等网络在线RNA干扰设计软件设计3条可能会干扰籽鹅卵泡颗粒细胞ENO1基因表达的插入DNA序列:shRNA-ENO1-350、shRNA-ENO1-892、shRNA-ENO1-591,将体外合成的3条干扰序列分别与线性化的pGPU6/GFP/Neo载体连接,构建ENO1 RNA干扰表达质粒,在Lipofectamine 2000的介导下转染原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞,转染48 h后,荧光倒置显微镜下观察GFP的表达;实时荧光定量PCR和Western blot法检测转染细胞中ENO1基因mRNA的水平及蛋白的表达水平。结果 pGPU6/GFP/Neo-shDNA重组质粒经单酶切及测序证实构建正确;转染后48 h,转染重组质粒的颗粒细胞在荧光倒置显微镜下可见较强的绿色荧光,转染效率可达60%;与培养液组、转染试剂组和无关序列干扰组(shNC)相比,shRNA-ENO1-350组颗粒细胞中ENO1基因mRNA水平和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),其他各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建了籽鹅卵泡颗粒细胞ENO1基因RNA干扰表达质粒,在原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞中,其表达量显著下降,为后续有关ENO1功能的研究奠定了基础。 张虹亮 计红 耿仁德 薛琳琳 杨焕民 王建发 司鸿飞 王慧 甘艺关键词:RNA干扰 颗粒细胞 籽鹅 冬春季节母猪的饲养管理 2010年 1选择适当饲喂方式
体况较差的经产母猪,在配种前20天和配种后10天加喂精料,体况恢复后以青饲料为主,按饲养标准喂养,直到妊娠80天后,再加喂精料,但后期的营养水平应高于前期。配种前体况良好的经产母猪,在妊娠前期多喂给青精饲料,后期再喂精料。初产母猪和哺乳期间配种的母猪, 耿仁德 郑世山关键词:经产母猪 饲养管理 冬春季节 妊娠前期 饲喂方式 初产母猪 黄芩提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定 被引量:12 2015年 为观察黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的抑菌活性,试验采用试管二倍稀释法,测定黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌胃小鼠后,分别用黄芩提取物灌胃治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量。结果表明,无论在体外还是体内,黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌抑制性最强,对大肠杆菌和沙门氏菌抑制性较弱;且通过灌注黄芩提取物,显著降低了各致病菌致病后小鼠的死亡率。通过研究得出,黄芩提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用。 崔一喆 耿仁德 王秋菊 朱双 王新 孙蕊关键词:黄芩 体外抑菌作用 小鼠 大鼠肝细胞系BRL-3A细胞Hsp70过表达条件的优化 被引量:1 2014年 为了使热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在BRL-3A细胞中过表达,试验以带有标签基因的腺病毒感染BRL-3A细胞,根据感染效率初筛病毒感染的最适浓度和作用时间;然后用初筛出的最适浓度(4×107,2×107,1×107,0.5×107,0.25×107pfu/mL)和时间(24 h和48 h)感染BRL-3A细胞,优化Hsp70重组腺病毒感染BRL-3A细胞的条件,并应用荧光定量RT-PCR和免疫蛋白印记方法检测Hsp70的mRNA和蛋白表达量。结果表明:当用1×107pfu/mL病毒AdCMV-Hsp70按照最佳感染条件的感染复数(MOI)=20感染BRL-3A细胞48 h时,能使Hsp70表达量比病毒空载体感染细胞和无病毒的对照组细胞极显著升高(P<0.01)。 计红 薛琳琳 耿仁德 郭景茹 臧琳 王建发 孔凡志 齐艳萍 杨焕民 郭丽 蒲丽君关键词:过表达 腺病毒 艾维茵肉仔鸡的饲养管理 2010年 近年来,随养鸡场(户)的增加,新增的养场(户)对肉仔鸡的饲养技术了解的还不全面。为了提高肉仔鸡的饲养技术,现将几年来饲养艾维茵肉仔鸡的技术介绍给广大养鸡场(户),供参考。 耿仁德 李红艳关键词:艾维茵肉仔鸡 饲养管理 冻干苗 人工光照 育雏舍 网上饲养 玉米地养鹅模式对北方白鹅肉品质的影响 被引量:1 2015年 为了研究玉米地养鹅模式对鹅肉品质的影响,选择大庆市大同区北方种鹅场的北方白鹅商品鹅为试验鹅,随机分为两组,对照组鹅进行圈舍饲养,试验组鹅在20日龄时进入株高超过70 cm的玉米地饲养,12周龄时随机从两组选取体况均匀鹅各12只进行肉质测定。结果表明:与圈舍饲养鹅相比,玉米地饲养鹅胸肌的滴水损失均极显著高于腿肌(P<0.01),且胸肌剪切力显著大于腿肌(P<0.05);肌肉中的粗脂肪、粗蛋白质和灰分均较高,且腿肌的蛋白质含量显著大于胸肌(P<0.01)。说明玉米地饲养鹅的鹅肉品质优于圈舍饲养鹅,该饲养模式值得推广。 乔雪 耿仁德 王秋菊 金宝栋 周博文 连帅 周瑞进 杨焕民关键词:肉品质 胸肌 腿肌 海兰褐蛋鸡卵巢与输卵管FSHR及LHR基因定量的研究 被引量:11 2015年 为了研究鸡卵巢、输卵管子宫部、输卵管漏斗部FSHR及LHR基因表达水平差异,实验从海兰褐蛋鸡的子宫部、卵巢、漏斗部中提取总RNA,利用RT-PCR技术获得FSHR、LHR目的基因,并应用实时荧光定量PCR进行定量检测。结果显示卵巢组织FSHR m RNA表达水平显著高于子宫部与漏斗部组织(P<0.01),子宫部与漏斗部组织FSHR m RNA表达水平没有显著性差异;子宫部组织LHR m RNA表达水平极显著高于其他两组(P<0.01),但卵巢、漏斗部组织LHR m RNA表达水平没有显著性差异。实验通过研究鸡卵巢、输卵管子宫部、输卵管漏斗部FSHR及LHR基因表达水平差异,研究为今后研究禽类生殖生理提供基础数据和科学依据。 何晶 耿仁德 计红 马莉 张虹亮 孔凡志 程晓旭 杨焕民关键词:蛋鸡 基因表达量 荧光定量