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肖青
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李雪
天津医科大学眼科医院
粘红
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肽聚糖对实验性自身免疫性葡萄膜炎辅助性T细胞17的影响
研究目的: 葡萄膜炎是一大类累及葡萄膜、视网膜、视网膜血管、视乳头及玻璃体的眼病,常导致眼组织的严重破坏以致视功能的显著下降或丧失。人类葡萄膜炎是一类种类繁多、病因复杂的疾病。虽然感染、外伤等多种因素均可引起葡萄膜炎,...
肖青
关键词:
实验性自身免疫性葡萄膜炎
树突状细胞
肽聚糖
辅助性T细胞
动物模型
文献传递
肽聚糖对树突细胞分泌促炎性细胞因子以及实验性自身免疫性葡萄膜炎辅助性T细胞17的影响
2013年
目的观察肽聚糖(PGN)对树突细胞(DCs)分泌促炎性细胞因子的影响以及对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)辅助性T细胞(Th)17(Thl7细胞)反应的调控。方法利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素(IL)-4(IL-4)定向诱导健康小鼠骨髓细胞向DCs分化。诱导分化的第6天将DCs分为对照组与实验组,实验组加入PGN干预,对照组加入等量无菌磷酸缓冲盐溶液,培养24h后利用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术,检测2组培养细胞中Th17细胞分化相关的细胞因子IL-23、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-18mRNA相对表达量。采用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)1—20多肽片段(IRBP1—20)和弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA免疫C57BL/6小鼠。免疫后13d分离EAU模型鼠脾脏和淋巴结的IRBP1—20特异的T细胞与经PGN干预或未干预的DCs共培养。收集共培养后2d的细胞,实时荧光RT—PCR检测维甲酸相关孤儿受体7t(RORyt)、IL-17、T—bet、7干扰素(IFN-γ)mRNA相对表达量;此外,收集共培养后2、5、7d的细胞分别进行流式细胞仪分析,观察Th17、Th1细胞的变化。结果实时荧光RT—PCR检测结果显示,实验组DCs经PGN干预后IL-23、IL-1G、IL-6、TNF—αmRNA相对表达量较对照组显著升高,差异有统计学意义(t=-14.363、-5.627、-3.85、-28.151;P〈0.05);实验组RORγt、IL-17mRNA相对表达量较对照组显著升高(t=-5.601、-19.76;P〈0.05),而Tbet、IFN7mRNA相对表达量较对照组显著降低(f-4.717、11.207;P〈0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,实验组的DCs与T细胞共培养后2、5、7d,IL-17+细胞的百分比升高(t=-2.944、-3.03、-4.81;P〈0.05),而IFN-γ细胞的比例变化不大(t=-1.25、-0.18、-2.16;P〉0.05)。结论PGN能够刺激DCs分泌IL-23、TNF—α、IL-6及I
肖青
粘红
魏瑞华
张晓敏
李雪
刘勋
李筱荣
关键词:
肽聚糖
葡萄膜炎
TOLL样受体2
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