葛忠良
- 作品数：13 被引量：47H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 白介素-1的辐射防护机理初探
- 1994年
- 白介素－１是一种多功能的细胞因子，近年来发现它具有较好的辐射防护作用。但对其机理研究较少．本实验证明它能促进骨髓粒单系祖细胞增殖并能升高正常小鼠骨髓细胞内Ｃａ（２＋）浓度，降低因照射升高的细胞内Ｃａ（２＋）浓度，使细胞内Ｃａ（２＋）浓度保持在一定范围．这一结果提示白介素－１对细胞内Ｃａ（２＋）浓度的调节可能是它产生辐射防护作用原因之一．
- 丁清明葛忠良
- 关键词：辐射防护作用白细胞介素1
- rhTPO的克隆及其在原核细胞中的表达
- 1997年
- 为了更加简便有效地得到重组人血小板生长因子（ｒｈＴＰＯ），以治疗放射及化学药物等所致骨髓损伤造成的血小板减少与缺乏，缓解临床上的出血症状，降低死亡率。方法本实验从６月龄人胚胎肝脏细胞中分离ｍＲＮＡ，设计合成特异性引物，经逆转录，套式ＰＣＲ等步骤克隆出了人ＴＰＯ全基因。将人ＴＰＯ基因亚克隆至原核细胞表达载体ｐＢＶ２２０，形成了重组表达质粒ｐＢＶ２２０／ＴＰＯ，以该重组质粒转化了原核细胞大肠杆菌ＤＨ５α，应用４２℃热诱导表达目的蛋白。结果经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，得到了ＴＰＯ在原核细胞中的表达，其分子量与目的一致。结论ｈＴＰＯ可以在原核细胞得到良好的表达，为临床血小板减少症的生物治疗奠定了基础。
- 曹华葛忠良张群伟孙丽亚张雪峰丁清明
- 关键词：血小板生长因子克隆原核表达
- 用CFU-GM Do值推断人体辐射敏感性
- 1993年
- 本文研究了动物与人体CFU-GM辐射敏感性与整体辐射敏感性的关系。结果表明,给小鼠全身1次照射不同剂量后取骨髓培养CFU-GM,与体外直接照射骨髓细胞的结果相比较,它们的D_O值分别为1.33Gy和1.23Gy,二者十分相近。通过对小鼠与人体各个个体CFU-GM辐射敏感性的测定,它们的D_O值差异很大,最大值与最低值相差2倍多。在慢性粒细胞白血病病人经全身^(60)Coγ—射线照射治疗的经过中,以及在骨髓移植的病例中,都观察到CFU-GM D_0值的大小能反映出全身照射后的辐射效应。
- 葛忠良刘秀珍
- 关键词：骨髓移植
- 体外培养的小鼠骨髓肥大细胞的初步研究被引量：5
- 1992年
- 肥大细胞是一种广泛存在于哺乳类动物体内的细胞。它分布于机体各个系统而非局限于某个组织,同时胞浆中又含有可合成、贮存和释放多种活性介质的颗粒,因而在功能上具有相当的重要性。肥大细胞在变态反应、寄生虫感染等过程中的作用已得到了较充分的认识。
- 汝小美刘秀珍葛忠良
- 关键词：肥大细胞骨髓体外培养
- 人白血病抑制因子和白细胞介素6融合基因的构建与表达
- 1997年
- 为了获得对白血病细胞有更强的抑制和诱导分化作用,本实验应用计算机优化设计,采用PCR扩增和分子克隆技术,分别扩增编码IL-6成熟蛋白的部分cDNA片段和编码LIF成熟蛋白的cDNA片段与人工设计的四肽接头连接到克隆载体,并将IL-6基因插入到LIF基因的N端,亚克隆到原核表达载体pBV220酶切位点之间,融合成编码单一的基因。采用30℃扩增菌体,42℃诱导,实现了在E.coli中表达预期的36kD蛋白谱带。表达量约占菌体总蛋白量的21％。经初步活性测定,重组融合因子对HL-60白血病细胞克隆生长的抑制明显地强于LIF和IL-6单独使用时的作用。
- 孙丽亚丁清明葛忠良曹华张群伟
- 关键词：白血病抑制因子白细胞介素6融合基因基因构建基因表达
- 氦氖激光对棘孢小单孢菌诱变育种的研究被引量：3
- 1993年
- 小单孢菌是具有巨大潜力的抗生素产生菌,可产生包括氨基甙类、大环内脂类、多肽类等多种抗生素。庆大霉素是氨基甙类第二代产品。在获得优质高产的氨基甙类抗生素产生菌的选育中,目前仍是以诱变为主。但是常规方法中都是对孢子及菌丝进行诱变,正突变率较低,不易筛选到产量增高的菌株,因而有必要进行改进。本实验采用氦氖激光辐照小单孢菌的原生质体,获得了提高产量的菌株,现将结果报道如下。
- 黄凌燕刘秀珍葛忠良
- 关键词：氦氖激光诱变育种
- 红景天多糖的抗放实验研究被引量：28
- 1994年
- 红景天多糖的抗放实验研究骆传环，高月，王作华，刘秀珍，葛忠良红景天是生长在海拔３５００米以上高寒、低氧环境中的高山植物，具有抗缺氧、抗寒冷、抗疲劳、抗微波辐射等功能（ｌ，幻。Ｂ前有关红景天的研究大部分是醇溶性部分，水溶性部分特别是多糖的研究还未见报道...
- 骆传环高月王作华刘秀珍葛忠良
- 关键词：红景天多糖放射保护药
- rhTPO/GM-CSF融合蛋白对^(60)Co γ射线照射小鼠造血功能的影响
- 1999年
- 目的探索一个新的、具有能同时促进机体红、粒及巨核细胞系造血的细胞因子，以便治疗由化疗和放疗等各种原因引起全血细胞损伤的综合征。方法所用的细胞因子是本实验室重组的产品，以照射小鼠为模型，给小鼠注射细胞因子后，观察红、粒及巨核细胞的变化。结果ｒｈＴＰＯ／ＧＭＣＳＦ融合蛋白对受照射小鼠血象有恢复作用。
- 曹华葛忠良张群伟刘秀珍
- 关键词：血小板生长因子融合蛋白造血活性
- rhTPO 对 ^(60)Co 照射小鼠造血系统影响的研究被引量：2
- 1997年
- 目的为了检测ＴＰＯ的体内活性及其对血小板减少的治疗作用，寻找用以治疗辐射及化学药物等所致骨髓损伤造成的血小板减少与缺乏，缓解临床上的出血症状，降低死亡率的一种新途径。方法本实验应用基因工程的方法重组了人的ＴＰＯ，取昆明种正常雄性，经一次５．０Ｇｙ６０Ｃｏγ射线全身照射小白鼠为动物模型，通过对外周血血象的观察，及小鼠骨髓造血祖细胞培养的检测，研究了ｒｈＴＰＯ在体内对６０Ｃｏ全身照射处理小鼠的造血系统的影响。结果实验表明，ｒｈＴＰＯ能够减轻照射对小鼠外周血血小板及骨髓造血祖细胞中巨核系祖细胞的影响，并有促进其早期恢复的作用，且这种作用是量效相关的。结论提示，ＴＰＯ是巨核细胞系统较特异的正调控因子，具有促进巨核细胞增殖发育和刺激血小板生成的作用，是临床治疗骨髓组织损伤引起的血小板减少和缺乏及贫血的有希望的生物治疗药物。
- 曹华葛忠良刘秀珍胡良平张群伟孙丽亚张雪峰
- 关键词：血小板生长因子巨核细胞造血调控
- 大鼠心肌营养素-1基因在大肠杆菌中的表达与初步纯化
- 1999年
- 为了实现心肌营养素 - 1 ( CT- 1 )的高效与可溶性表达 ,将 CT- 1基因分别插入到 3种大肠杆菌表达载体 p BV2 2 0、p GEX- 2 T和 p Trx FUS中 ,并实现了表达 ,全菌表达水平分别为 2 .6%、1 6%和 2 5 %。其中 ,CT- 1在 p Trx FUS表达载体中以包含体和可溶性两种方式表达 ,表达水平分别为2 0 .8%和 1 0 .7%。可溶性表达部分经过强阴离子交换和凝胶过滤两步纯化 ,纯度达 80
- 华平张群伟葛忠良
- 关键词：CT-1蛋白质表达大肠杆菌融合蛋白
