袁玉林
- 作品数：72 被引量：142H指数：6
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学政治法律更多>>
- 临床医学五年制解剖学实验课的改革与实践被引量：10
- 2003年
- 为了培养学生的动手能力、分析问题和解决问题的能力,我们对临床医学五年制解剖学实验课教学大纲、教学计划、教学内容及教学方法进行较系统改革,使解剖学实验课形成一门独立的解剖学实践技能课.系统解剖学理论课集中在多媒体教室讲授,观察实物标本的实验课有所压缩;局部解剖学理论课在具有多媒体的解剖学大实验室讲授并有所压缩,局部解剖学实验课过去观察实物标本改为局部解剖实验操作课并增加学时,学生分组操作总结后由教师进行小结.操作强调课前预习,课后要求写出实验报告.如有变异在老师指导下用数码相机拍摄下来,利用多媒体让学生自己报告并让学生都来观察.实验效果初步证明,实验课教学改革可以巩固前面的系统解剖学理论课和实物标本观察课,有利于培养学生动手能力、思维能力、综合分析能力及解决问题的能力,有利于调动学生的学习积极性.
- 袁玉林戴冀斌宋健袁华胡成俊
- 关键词：解剖学实验课教学改革教学内容教学计划教学
- Bcl-xl和IGF-1受体特异性siRNA真核表达载体的设计、构建及鉴定
- 2012年
- 目的:构建能表达靶向Bcl-XL mRNA和IGF1RmRNA的siRNA真核表达质粒。方法:从GeneBank中搜索Bcl-XL(NM_138578)和IGF-1R(NM_000875)基因组标准序列,根椐siRNA设计原理各基因选取两段19bp的碱基序列作为靶目标,根据其序列构建siRNA真核表达质粒:psiBcl-XL1和psiBcl-XL2以及psiIGF1R1和psiIGF1R2。随机选取一段与人类基因无同源性的碱基序列,构建表达siRNA的真核表达质粒作为质粒对照psiHK。所构建的质粒均含有增强绿色荧光基因作为报告基因和SalI的酶切位点。质粒经酶切后,电泳鉴定酶切片段;基因测序分析质粒的碱基序列;用脂质体转染鼻咽癌CNE2细胞。转染后培养48h,做流式细胞仪检测转染率并采用共聚焦显微镜检测质粒绿色荧光蛋白的表达,通过RT-PCR检测各组质粒对其基因的干扰率。结果:质粒psiBcl-XL1、psiBcl-XL2、psiIGF1R1、psiIGF1R2和psiHK酶切后均可见400bp小带,与预期插入的目的基因大小一致,基因测序证实碱基序列与模板序列相符;经荧光显微镜下摄片计算转染效率发现:在转染48小时达最高(45%～50%之间);流式细胞仪检测转染后48小时的转染率为48.45%,并在共聚焦显微镜下观察均见大量的细胞表达绿色荧光;psiBcl-XL1、psiIGF-1R1、psiB-clXL2和psiIGF1R2干扰率分别是:22.1%、50%、70.6%、61.8%。结论:本实验构建了靶向Bcl-XLmRNA和IGF1R mRNA、表达短发夹RNA(short hairpin ribonucleic acid,shRNA)的真核表达质粒。重组质粒能有效转染人鼻咽咽癌细胞,psiBcl-XL2和psiIGF-1R2与psiBcl-XL1和psiIGF1R1相比,转染CNE2 48h后其对mRNA的干扰率相对较高。
- 游兴松王蕾李卓先方文敏袁玉林
- 关键词：RNA干扰BCL-XL
- 关于标准化解剖学实验室建设的思考被引量：10
- 2006年
- 对教研室解剖学实验室的建设经验进行了总结，在解剖学实验室面积的确定、通风系统的设计以及电教设备的配置方面提出了一些建设性意见，旨在为标准化解剖学实验室的建设提供一些有益的参考。
- 王晓芸袁玉林吴巍汪浩戴冀斌
- 关键词：解剖学电教设备
- Cdc2/cdk1和survivin特异性siRNA真核表达载体的设计、构建和鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的：构建表达靶向cdc2/cdk mRNA和survivin mRNA的siRNA真核表达质粒。方法：从GenBank中搜索Cdc2/cdk1和survivin基因组标准序列,根椐siRNA设计原理构建siRNA真核表达质粒phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-survivin-shRNA1和phU6-survivinshRNA。phU6-survivin-shRNA1、phU6-survivin-shRNA2、pU6-HK-shRNA质粒均含有增强绿色荧光基因作为报告基因和酶切位点,而phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2均含有红色荧光基因作为报告基因和酶切位点。质粒酶切、电泳、测序鉴定;用脂质体转染鼻咽癌CNE2细胞,荧光显微镜下观察、摄片、计数阳性细胞,计算转染效率,激光共聚焦显微镜检测质粒载体绿色和红色荧光蛋白的表达,免疫印迹法检测真核表达质粒对相应蛋白的抑制率。结果：荧光显微镜下计算转染效率显示在转染鼻咽癌细胞CNE2 48h转染率高达45.00%-57.45%;质粒phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-survivin-shRNA1、phU6-survivin-shRNA2和pU6-HK-shRNA酶切后均可见400bp条带,与预期插入的目的基因大小一致,基因测序证实碱基序列与模板序列相符;在共聚焦显微镜下观察均见大量的细胞表达相应荧光;免疫印迹检测phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-survivin-shRNA1和phU6-survivin-shRNA2对鼻咽癌CNE2细胞相应蛋白抑制率分别是33.00±1.41、38.31±1.01（survivin）、36.33±1.21和43.26±1.02（cdk1）。结论：本实验构建了靶向Cdc2/cdk1mRNA和survivin mRNA的真核表达质粒。重组质粒能有效转染人鼻咽癌细胞,phU6-cdc2/cdk1-shRNA2和phU6-survivin-shRNA2与phU6-cdc2/cdk1-shRNA1和phU6-survivin-shRNA1相比,转染CNE2 48h后其对相应蛋白的干扰率相对较高。
- 朱俊袁玉林彭涛陈树黄铄李双
- 关键词：RNA干扰SURVIVIN
- 淋巴组织免疫组织化学染色方法的探讨被引量：2
- 2010年
- 目的:鉴于病理淋巴组织的切片常见组织较硬、细胞脆性大,免疫组织化学染色显色模糊,甚至出现假阴性现象,探讨淋巴组织制片与免疫组化染色的新方法与新思路。方法:采用B-5固定液、软化剂的处理进行石蜡切片、免疫组织化学染色方法进行染色。结果:制出背景清晰、定位准确、反差分明、效果较好的免疫组化染色淋巴组织切片。结论:经B-5固定液固定、软化剂处理过的淋巴组织免疫组化切片能为淋巴组织疾病诊断提供定位准确、阳性明显的抗原表达信息。
- 孟晓萍彭红唐志佼袁玉林
- 关键词：淋巴组织免疫组织化学
- 尼美舒利与阿霉素联合应用对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡及衰老的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究尼美舒利与阿霉素联合应用对骨肉瘤MG-63细胞的作用及机理。方法:MTT法检测细胞的增殖,衰老相关性β-半乳糖苷酶(SAβ-Gal)染色检测细胞衰老,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,透射电镜显示MG-63细胞的形态变化。结果:当阿霉素浓度固定在0.75mg/L时,与低浓度尼美舒利(25-200μmol/L)结合治疗细胞阻滞MG-63细胞于G2/M期及凋亡,细胞生长抑制呈浓度依赖性增高,与高浓度尼美舒利(400μmol/L)结合治疗细胞阻滞于G1/S期和衰老样生长,蛋白分析表明:bax和P21蛋白表达随尼美舒利浓度增加表达上调,而bcl-2、Cyclin E、C-myc和CDK2蛋白表达下调。结论:联合用药发挥相加作用,为临床联合用药提供了理论依据。
- 赵泉周绪红王蕾方文敏袁玉林
- 关键词：尼美舒利MG-63细胞阿霉素细胞衰老
- 去甲肾上腺素预处理对培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响
- 本实验用凋亡检测方法检测培养的乳鼠心肌细胞凋亡,比较去甲肾上腺素预处理和缺血预处理抗缺血再灌注损伤的作用,拟为临床寻找有价值的预处理方法提供实验依据。新生2～4天SD大鼠210只,取心室肌按常规操作处理后,用含15%小牛...
- 雷岳山胡成俊张友云宋健戴冀斌袁玉林
- 文献传递
- 《系统解剖学》和《局部解剖学》可视化多媒体教学资料库的建立
- 高等医学教育已经引入现代教学模式——多媒体和网络教学。为了配合我室解剖学操作暨多媒体实验室的建设,我们建立了《系统解剖学》和《局部解剖学》可视化多媒体教学库。尽管多媒体有许多的优点但由于种种缘由,传统的教学方法在现阶段仍...
- 潘伯群戴冀斌宋健陈锡昌袁玉林
- 文献传递
- 喉癌、癌旁组织和正常喉组织中Ang-1、Ang-2、VEGF及其受体表达和临床意义
- 彭涛王娜周绪红袁玉林夏冬
- 神经肽Y标记神经元在大鼠脑桥的分布被引量：1
- 2002年
- 目的:观察了神经肽Y（NPY）样神经元在大鼠脑桥的分布,为探讨脑桥NPY样神经元的功能提供实验形态学依据。方法:免疫组织化学方法（PAP法）。结果:在脑桥可见到前庭神经上核、耳蜗神经腹侧核及脑桥尾侧网状核NPY样免疫反应胞体。前庭神经上核的NPY样胞体较多且密集,细胞大小均匀,呈梭形或椭圆形,有明显突起;耳蜗神经腹侧核内的NPY样胞体呈大小均匀分布,圆形且较小,突起不明显;脑桥尾侧网状核内的NPY样胞体分布较稀疏,且大小不一,呈菱形或梭形,有明显较长的突起。结论:NPY样神经元不仅广泛存在于端脑和下丘脑,在脑桥也同样有着广泛的分布。
- 袁华袁玉林孟运莲戴冀斌柯国平王晓云
- 关键词：脑桥免疫组织化学
