谢应国
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 布尔山羊流行性淋巴管炎病原诊断及感染途径研究
- 2006年
- 采用微生物学技术,从流行病学、临床诊断、血相及血液生化指标测定、微生物检验及感染途径等方面,对陕西省舍饲布尔山羊良种肉羊罹患流行性淋巴管炎病进行了较详细的研究。结果表明,该病病原为假性皮疽囊球菌(Cryptococcus farciminosus),通过损伤的皮肤粘膜而感染致病。同时提出了综合防治措施。
- 李联正马秋明何维明赵卓郭习勤谢应国王亚萍张迎疆
- 关键词：布尔山羊流行性淋巴管炎病原诊断
- 炭疽中性蛋白酶部分片段的重组表达、纯化及免疫效果研究
- 2006年
- 构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白（位于248～532氨基酸），并对其免疫效果进行研究；设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N，T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a（＋）-N，通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性。以AI（OH）3为佐剂皮下注射免疫BALB／c小鼠，用ELISA方法测血清总IgG水平，MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖，采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类；Western blot显示重组蛋白具有免疫原性，rN免疫BALB／c小鼠后，ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生；T淋巴细胞亚群试验表明，重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主；MTT试验表明，rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力，说明该重组蛋白具有生物学活性。纯化的rN可诱导高水平的抗体反应，为进一步的功能研究奠定了基础。
- 谢应国吴秀芳武素琴罗德炎张松乐王希良
- 关键词：炭疽杆菌中性蛋白酶蛋白表达纯化
- 鼠疫F1-V重组蛋白疫苗滴鼻免疫应答效果的研究被引量：9
- 2006年
- 目的以重组霍乱毒素B亚单位(rCT-B)为鼠疫F1-V重组蛋白的佐剂制备黏膜疫苗,观察小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答效果。方法以制备的鼠疫黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠4次免疫后,采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类,检测鼻咽喉、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-V的黏膜分泌型IgA;采用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化。结果以rCT-B为佐剂的鼠疫F1-V重组蛋白黏膜疫苗滴鼻免疫后,能够诱导血清中IgGI、gA抗体比正常对照组显著升高(P<0.01),同时诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内特异性黏膜抗体升高,尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著(P<0.01)。与单纯的F1-V组相比,不同剂量比例疫苗组都能诱导较高、较快的血清IgGI、gA和黏膜sIgA,其中1∶2疫苗组能诱导更强的系统免疫和黏膜免疫,但是相比之下,5∶1疫苗组是最合适的免疫剂量。结论rCT-B佐剂不仅能提高鼠疫F1-V黏膜疫苗的系统全身免疫应答,还能促进诱导呼吸道、消化道和生殖道等局部黏膜sIgA抗体,增强局部免疫应答,提示rCT-B佐剂能显著提高鼠疫感染的免疫应答作用,这为下一步疫苗的免疫保护评价奠定了基础。
- 吴秀芳于三科谢应国王栋袁源刑丽武素琴王希良
- 关键词：黏膜免疫
- 布氏杆菌PBP_(39)/pCDNATE重组表达质粒的构建及免疫效果的研究被引量：1
- 2006年
- 目的构建PBP39/pCDNATE重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠观察诱导的特异性体液免疫、细胞免疫及免疫保护效果。方法克隆PBP39基因,构建PBP39/pCDNATE重组表达质粒。首先转染Cos-7细胞,免疫组化检测其PBP39蛋白抗原的表达。然后用PBP39基因疫苗肌肉注射免疫BALB/c小鼠4次,观察特异性体液免疫和细胞免疫效果。进一步用1.25×104布氏杆菌544A强毒株腹腔攻毒,观察PBP39重组表达质粒的免疫保护效果。结果扩增的PBP39保护性抗原基因片段在牛、羊和猪布氏杆菌株中具有高度保守性,构建的PBP39/pCDNATE重组表达质粒在Cos-7细胞中有目的蛋白的表达。制备的PBP39重组表达质粒肌肉免疫BALB/c小鼠4次,ELISA检测PBP39重组表达质粒产生了较高水平的特异性IgG抗体,并随免疫次数增加抗体的滴度也递增,抗体亚型以IgG2a为主,表明诱导了TH1型的免疫应答。MTT测定PBP39重组表达质粒的淋巴细胞增殖能力与对照组差异有统计学意义。布氏杆菌A544强毒株攻毒后,动物存活及脾组织细菌数与对照组比较差异有统计学意义,说明PBP39重组表达质粒能够产生有效的保护效果。结论研制的PBP39重组表达质粒免疫BALB/c小鼠能产生高水平的特异性抗体和细胞免疫,且以细胞免疫为主,并产生有效的免疫保护效果,为布氏杆菌病新型疫苗的研究奠定了基础。
- 罗德炎高永辉张松乐袁园谢应国师伟王希良
- 关键词：重组表达质粒免疫应答免疫保护
- 炭疽芽孢杆菌PA蛋白的表达及免疫保护效果研究被引量：2
- 2006年
- 扩增了炭疽芽孢杆菌PA基因,构建了原核表达质粒pET-28a-PA,并对其进行了诱导表达,对表达产物免疫原性和免疫保护效果进行了研究。结果表明,PA基因的长度约为2 205 bp,PA蛋白的相对分子质量为83 ku;rPA蛋白具有良好的免疫原性,初免后10 d即可检测到特异性抗体,第3次免疫后抗体水平明显升高,可达1∶12 800;rPA蛋白刺激小鼠产生的特异性抗体亚型以IgG 1为主;rPA蛋白在体外对小鼠脾脏细胞有促进生长和增殖作用。rPA免疫组小鼠脾脏中CD4+细胞显著增加,免疫应答趋向T h2型反应,说明rPA介导的免疫反应以体液免疫为主。rPA具有一定的免疫保护作用,保护率达到50%。
- 谢应国吴秀芳武素琴王希良何维明
- 关键词：炭疽芽孢杆菌保护性抗原免疫基因工程疫苗
- 炭疽杆菌中性蛋白酶免疫效果研究
- 炭疽(Anthrax)是由炭疽杆菌(Bacillusanthracis)感染引起的一种急性、烈性人畜共患和自然疫源性的传染病，由于这种疾病的症状类型之一是引起皮肤等组织发生黑炭状坏死，故称为“炭疽”。本病原菌几乎遍及全世...
- 谢应国
- 关键词：炭疽杆菌中性蛋白酶体液免疫指标原核表达质粒保护性抗原自然疫源性
- 文献传递
- 蛋白体佐剂及用于鼠疫F1-V抗原的免疫效果被引量：2
- 2007年
- 目的以蛋白体（proteosomes）佐剂，非共价结合鼠疫F1-V重组蛋白为免疫原，探讨滴鼻免疫BALB／c小鼠后诱导的免疫应答和免疫保护效果。方法佐剂与鼠疫F1-V重组蛋白为免疫原非共价结合，滴鼻免疫BALB／c小鼠4次后，采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类，并检测鼻咽、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-V的黏液分泌型IgA；并用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化。第4次免疫后7d，用100峨的鼠疫141强毒株进行腹腔攻毒。结果（1）以蛋白体为佐剂的鼠疫F1-V抗原与单纯的F1-V组相比，蛋白体疫苗组诱导血清IgG、IgA抗体显著升高（P〈0．01），同时蛋白体疫苗组能诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内多个黏膜部位特异性IgA抗体的产生，尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著（P〈0．01）；（2）蛋白体疫苗组主要引起IgG1型抗体，主要诱导TH2型免疫反应；（3）蛋白体疫苗组NALT和SP中CD^4＋/CD^8＋比值比PBS对照有显著增高（P〈0．01），MLN和PP中CD^4＋／CD^8＋比值与PBS对照差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）小鼠100 LD50的鼠疫141强毒株腹腔攻毒后鼠疫F1-V重组蛋白组小鼠免疫保护率为0，而蛋白体佐剂疫苗组小鼠免疫保护率为67％。结论以自制的蛋白体为鼠疫F1-V抗原的佐剂滴鼻免疫小鼠，蛋白体不仅提高鼠疫F1-V抗原的系统免疫应答，而且能诱导小鼠呼吸道、消化道和生殖道局部黏膜免疫应答。蛋白体佐剂鼠疫疫苗对100 LD50的鼠疫141强毒株腹腔攻毒具有一定的免疫保护作用，这为鼠疫黏膜疫苗的研制提供候选材料，也为鼠疫黏膜疫苗深入研究奠定了基础。
- 吴秀芳谢应国袁源王栋于三科王希良
- 关键词：蛋白体滴鼻免疫
