赵云
- 作品数：12 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 单个细胞内重组β-半乳糖苷酶的折叠:要么完全折叠,要么完全聚集
- 赵云何伟杭海英
- 关键词：Β-D-半乳糖苷酶流式细胞仪
- 用于抗体亲和力成熟筛选的细胞株及其使用方法
- 本发明涉及一种用于抗体亲和力成熟筛选的细胞株及其使用方法，所述细胞系通过RMCE技术构建，对目标抗体的表达稳定，结合胞嘧啶脱氨酶诱导激活(AID，activation‑induced cytidine deaminase...
- 杭海英陈川赵云
- 文献传递
- 单个细胞内重组β-半乳糖苷酶的折叠:要么完全折叠,要么完全聚集
- ＜正＞利用细菌进行重组蛋白的高效表达在生命科学研究和生物工业应用中具有意义。但重组蛋白的错误折叠和包涵体的形成极大限制了其进一步的应用。目前,对包涵体的体
- 赵云何伟杭海英
- 关键词：Β-D-半乳糖苷酶流式细胞仪
- 文献传递
- 一种AID酶突变体及其应用
- 本发明提供一种用于哺乳动物细胞蛋白(尤其是抗体)筛选、工程化改造/进化的AID酶突变体及其应用。本发明提供的AID酶突变体在CHO细胞中的突变能力显著增强，相对于野生型AID能够提供数量更多、突变类型更丰富的抗体突变体，...
- 杭海英罗蕊琪赵云
- 文献传递
- 利用双报道基因筛选系统改造产烃基因工程细菌(英文)被引量：1
- 2014年
- 自然界中所有的蓝藻都能产生烷烃,但这些烷烃都比汽油（C5~C12）的链长更长。两个源于蓝藻的产烃基因已经在大肠杆菌细胞中成功表达。迄今为止,从头合成的最短烷烃为C9。本研究在大肠杆菌细胞中设计了一个人工进化系统,该系统能生产短链烷烃,并可以提高烷烃的产量。该进化系统由两大部分元件组成：产烃基因和胞内烷烃响应系统。烷烃是报道基因氯霉素抗性基因（Cm R）和16S r DNA的一种主要诱导物。携带有Cm R的细胞能在含有氯霉素（Cm）的培养基中存活下来,而烷烃诱导产生更多的16S RNA,能加快细胞的生长和繁殖。将这些基因组装在一种易突变的大肠杆菌菌株中,并成功地筛选出了具有生长优势和高产烷烃能力的细菌。最后,用这些细菌实现了辛烷（C8）的生产——在不加入产烃底物的情况下,创造了在人工生物系统中产生最短链长烷烃的记录。以上结果说明,在大肠杆菌中生产比C9更短的烷烃不存在机理方面的限制。
- 岳海兵赵云杭海英
- 关键词：RDNA
- 一种AID酶突变体及其应用
- 本发明提供一种用于哺乳动物细胞蛋白(尤其是抗体)筛选、工程化改造/进化的AID酶突变体及其应用。本发明提供的AID酶突变体在CHO细胞中的突变能力显著增强，相对于野生型AID能够提供数量更多、突变类型更丰富的抗体突变体，...
- 杭海英罗蕊琪赵云
- 文献传递
- 单个细胞内重组β-半乳糖苷酶的折叠:要么完全折叠,要么完全聚集
- 2009年
- 利用细菌进行重组蛋白的高效表达在生命科学研究和生物工业应用中具有意义。但重组蛋白的错误折叠和包涵体的形成极大限制了其进一步的应用。目前,对包涵体的体内形成机制还缺乏深入研究。在本研究中,我们利用流式细胞仪。
- 赵云何伟杭海英
- 关键词：Β-D-半乳糖苷酶流式细胞仪
- 瘤胃微生物元基因组来源的新的组成型启动子获取
- 2019年
- 【目的】自极端环境来源的微生物的基因组中筛选新型的可用于合成生物学底盘细胞设计的启动子元件。【方法】本研究以含有绿色荧光蛋白结构基因和核糖体结合位点的探针型质粒pUC18-GFP为载体,通过构建瘤胃微生物元基因组质粒文库,从文库中快速高效筛选具有启动子功能的DNA片段。并且通过基于神经网络的启动子预测分析,获得可能的启动子区域。以绿色荧光蛋白和施氏假单胞菌Pseudomonas stutzeri来源的麦芽四糖淀粉酶作为报告基因验证所获得的新启动子片段的功能。【结果】我们从约3750个转化子中筛选到22条具有组成型启动子功能的DNA片段。这些片段与NCBI数据库中已报道的基因序列同源性较低,启动效率高低不等。我们通过启动子预测和亚克隆的方法获得两条全新的启动子片段RFa1p2(76 bp)和RFb4p(547 bp)。此新的组成型启动子可以在不添加任何诱导剂的情况下启动异源蛋白在大肠杆菌基因工程菌中高效表达。
- 王丽赵云杨茜戴欣朱雅新董志扬
- 关键词：组成型启动子瘤胃微生物绿色荧光蛋白麦芽四糖淀粉酶
- 细胞周期监控点蛋白Rad9与非同源末端连接修复蛋白Ku70的相互作用研究（英文）被引量：1
- 2018年
- Rad9是一种重要的细胞周期监控点调控蛋白.越来越多的证据显示,Rad9也可与多种DNA损伤修复通路中的蛋白质相互作用,并调节其功能,在DNA损伤修复中发挥重要作用.非同源末端连接修复是DNA双链断裂的一条重要修复途径.Ku70、Ku80和DNA依赖的蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)共同组成DNA依赖的蛋白激酶复合物(DNA-PK),在非同源末端修复连接中起重要作用.本研究中,检测到Rad9与Ku70有直接的物理相互作用和功能相互作用.我们在不同的细胞模型中发现,Rad9基因敲除、Rad9蛋白去除或Rad9表达降低会导致非同源末端连接效率明显下降.已有的研究表明,DNA损伤可导致细胞中Ku70与染色质结合增加及DNA-PKcs激酶活性增强.我们的结果显示,与野生小鼠细胞相比,Rad9基因敲除的小鼠细胞中, DNA损伤诱导的上述效应均减弱.综上所述,我们的研究首次报道了Rad9与非同源末端连接修复蛋白Ku70间有相互作用,并提示Rad9可通过调节Ku70/Ku80/DNA-PKcs复合物功能参与非同源末端连接修复.
- 范英俊刘宇恒王玉兰孔冰洁赵云赵云叶琛安莉莉
- 关键词：KU70
- 流式细胞术揭示出枯草芽孢杆菌多态异质性被引量：5
- 2014年
- 新近的研究发现,微生物群体异质性现象普遍存在,与微生物群体许多关键功能密切相关.微生物群体中的多种异质性状态需要单细胞水平的分析技术才能被揭示,流式细胞术是获取异质性状态精确分布的重要工具.但微生物细胞尺寸微小、生物分子含量少、常常缺乏特异性试剂等都限制着传统流式细胞技术在微生物研究领域的应用.本论文采用新型的低背景、高灵敏度和高分辨率流式细胞仪,以增强的前向散射光、侧向散射光以及紫外光激发的细菌自发荧光水平这三个无需任何荧光标记就可以检测的信号为参数,首次揭示出不同生长状态的枯草芽孢杆菌具有复杂、动态的异质性状态分布.这一方法鉴定出的枯草芽孢杆菌多种状态及其与生理功能相关的、高度关联的变化,可能对该菌的生理变化规律及其分子机理的认识提供新的机遇.本论文也讨论了这一采用新型高灵敏度、高分辨率流式细胞仪测量非标记细胞参数的方法对于广泛开展各种微生物多态性研究具有巨大潜力.
- 刘春春赵云杭海英
- 关键词：流式细胞术枯草芽孢杆菌
