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一种提高棉花转基因效率的方法: 本发明公开了一种提高棉花转基因效率的方法，用限制性内切酶酶切DNA与质粒DNA保护剂混合后，利用脂质体包装携带Ti质粒上的毒蛋白基因通过花粉管通道法将目的基因导入棉花中。本发明可以有效提高转基因效率。; 刘红玲祝建波朱华国孙燕飞邱红林王彦芹; 文献传递

天山雪莲PsaH基因的克隆及序列分析被引量：3: 2013年; Ps I H(Subunit H of photosystem I)是属于光合系统I亚族的分子量约10 kD的内在膜蛋白,是真核生物特有的3个组成光合系统I的亚基之一,在植物光合作用中起重要作用。从天山雪莲(Sasussured involucrataKar.et Kir)叶片全长cDNA文库中,筛选克隆得到PsaH基因。序列分析表明,该基因的开放阅读框为432 bp,编码143个氨基酸,包括由47个氨基酸组成的转运肽和96个氨基酸组成的成熟PS I H。预测该蛋白质相对分子量为15.04 kD,理论等电点(Theoretical pI)为9.81,存在一个跨膜结构。序列比对表明,SikPsaH编码蛋白与蓖麻(Ricinus communis)、毛果杨(Populus trichocarpa)PsaH基因编码的蛋白质具有83.3%的相似性。系统进化树显示,天山雪莲与石蒜(Lycoris radiata)亲缘关系最近。。; 张林华邱红林刘超王爱英邓福军祝建波; 关键词：天山雪莲克隆

转几丁质酶基因和β-1，3-葡聚糖酶基因抗病棉花的安全评估研究: 基因工程是近20年迅速发展起来的一门高新技术,一些获准的转基因植物已经产生了巨大效益,显示出很大的诱人前景。而基因工程技术应用的基因超出了传统育种家应用常规有性杂交种质基因库的范围,人们很难预测外源基因进入一个新的遗传背...; 邱红林; 关键词：生物安全性评价农艺性状种子活力; 文献传递

转菜豆几丁质酶和葡聚糖酶基因抗病棉花与野西瓜苗和苘麻间的基因漂移和生存竞争力分析被引量：1: 2013年; 利用培育的转菜豆几丁质酶和葡聚糖酶双价基因(pBLGC)的抗病棉花高代株系与同科植物(野西瓜苗和苘麻)杂交及其DNA渗入试验,研究北疆生态区基因漂移的可能性。通过裸地种植的方式,在棉花苗期、蕾期、花铃期和吐絮期对转基因抗病棉花与田间杂草的株高、群落的种类及种群密度、生物多样性和生物量进行监测,分析转基因抗病棉花与田间杂草的生存竞争能力。试验结果表明:棉花与同科植物(野西瓜苗和苘麻)远缘杂交不能正常结实。通过转基因棉花花粉DNA将目标基因渗入杂草基因组经检测均未获得阳性植株,说明转基因抗病棉花的靶标基因转移至杂草基因组的可能性很小。在裸地种植的田间正常灌水和自然条件下,不同区域物种植株株高以及种群密度等指标表明转基因棉花并未增强自身与杂草的竞争能力,转化为杂草的可能性几乎为零。; 邱红林张林华刘超吴名付何黎祝建波王爱英; 关键词：杂草群落生物安全性评价

天山雪莲LEA14基因克隆及功能分析被引量：6: 2013年; 从天山雪莲叶片低温诱导的EST文库中获得了1个胚胎发育晚期丰富蛋白基因(LEA)cDNA全长序列。序列分析表明,该基因含有1个468bp编码155个氨基酸的开放阅读框。NCBI保守域预测此蛋白属于LEA_2家族,命名为SiLEA14。系统进化分析表明,该蛋白与北柴胡的LEA-2蛋白亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,SiLEA14表达量在低温、盐和干旱胁迫条件下迅速升高。亚细胞定位结果表明,SiLEA14蛋白定位于细胞核中。利用农杆菌介导法将该基因导入烟草,测定并分析转基因植株在冷冻和盐胁迫处理下的生理指标,结果表明,SiLEA14基因在烟草中的过量表达提高了烟草的抗冻和耐盐能力。; 张林华刘超邱红林王爱英邓福军祝建波; 关键词：天山雪莲基因克隆功能分析

脂质体包装农杆菌毒蛋白提高棉花转基因的效率: 2014年; 对比了表达载体pBin438-GFP、农杆菌毒蛋白与脂质体等6种不同的组合方式对棉花花粉通道法转基因效率的影响。结果表明脂质体包装显著提高了转基因棉花的成铃率,由16.5%提高到24.17%。对比不加脂质体所对应的组合都对转基因的效率也有明显的提高作用。在脂质体包装的不同组合中,农杆菌毒蛋白显著提高了转基因的效率,由1.4%提高到4.7%。本研究借助花粉管通道法转化的优势,导入T-DNA携带的目的基因GFP及脂质体包装的农杆菌毒蛋白(VirD1、VirD2、VirE2),提高了棉花基因转化效率,为棉花转基因育种提供更多的思路。; 刘红玲沈海涛祝建波邱红林王彦芹; 关键词：花粉管通道法 T-DNA 脂质体

天山雪莲SikGLP基因的克隆及表达分析被引量：5: 2013年; 从天山雪莲cDNA文库中分析得到一个类萌发素蛋白基因序列,命名为SikGLP。生物信息学分析表明,该基因包含1个633 bp的完整开放阅读框,编码210个氨基酸。SikGLP分子量为21.6 kDa,理论等电点是6.81,并且是具有信号肽的疏水性蛋白。氨基酸多序列比对发现GLP序列保守性较高,具有的GLP的典型特征。17个物种间的系统发育树可以看出与葡萄GLP进化关系最近。Real time-PCR检测表明,SikGLP基因受低温、甲基紫精和PEG诱导表达,可能在胁迫初期对提高植物防御起作用。; 刘超张林华邱红林王爱英胡鸢雷祝建波; 关键词：天山雪莲实时定量PCR

矮牵牛自交不亲和性基因sx的克隆及功能初步分析: 2013年; 利用NCBI、CODEHOPE、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计兼并引物,以矮牵牛花柱cDNA为模板,利用RT-PCR扩增到1条长为417 bp的序列,在GenBank中比对发现,该序列与SX基因相似性最高。然后以SX序列为模板设计特异性引物,RT-PCR扩增到1条全长为747 bp的目的片段,测序结果分析表明,该基因核苷酸序列开放阅读框全长660 bp,编码220个氨基酸,其中包括有22个氨基酸的跨质膜信号肽区,和5个保守区(C1-C5)以及2个高变区(Hva,Hvb),据前人研究所知,该基因具有S-核酸酶功能。同时,从番茄DNA中克隆到一长为717 bp的花粉特异性启动子LAT52。为了使SX基因能在花粉中发挥其S-核酸酶功能,去掉22个氨基酸跨质膜信号肽(命名为sx)之后,与番茄花粉特异性启动子LAT52嵌合构建植物表达载体并转化拟南芥。TTC染色结果表明,LAT52能特异性的在花粉中调控sx基因的表达,使花粉活力很低甚至没有活力,从而使转基因植株不育。; 祝建波何黎邱红林陈泉闫甜甜程晨; 关键词：矮牵牛克隆功能分析

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邱红林