银广悦 作品数:54 被引量:295 H指数:9 供职机构: 中国石油天然气集团公司 更多>> 发文基金: 河北省科技支撑计划项目 廊坊市科技局课题 廊坊市科技局科研课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养和鉴定方法学探讨 被引量:8 2013年 目的探讨骨髓间充质干细胞体外分离培养和鉴定方法,找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法无菌条件下分离处死后取小鼠双下肢骨,低糖DMEM培养液冲出骨髓,离心5mins,用5ml含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液重悬细胞。加入等体积密度为1.073g/L percoll分离液离心30mins。取中层云雾状细胞。37℃、5%CO2培养箱中贴壁培养。取5-10代细胞培养至对数生长期后,洗涤离心。取100μl细胞悬液分别加入相应抗体,避光孵育30mins,洗涤离心。流式细胞仪检测,CELLQUEST软件收集数据。结果骨髓间充质干细胞是一类纺锤形或梭形细胞,与纤维细胞类似,顺向呈"鱼群样"排列。CD45、CD34、CD31呈阴性表达,表达率分别为0.82%,0.27%,0.97%;CD44、CD90、CD71呈阳性表达,表达率分别为99.8%,99.7%,99.36%。不同代数细胞表面分子的表达情况无明显差异(P>0.05)。结论贴壁培养法能够在质和量上满足骨髓间充质干细胞的体外培养条件。 银广悦 陈素萍 丁俊丽 张继领 刘继勇 张龙 张明关键词:贴壁法 骨髓间充质干细胞 体外培养 红细胞分布宽度和中性粒细胞淋巴细胞比值对类风湿性关节炎诊断价值的评价 被引量:16 2016年 目的探讨红细胞分布宽度(RDW-SD)和中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法选取104例RA患者、104例其他风湿性疾病患者(骨关节炎25例,系统性结缔组织病69例,强直性脊柱炎10例)和99例健康体检者,比较各组血沉、超敏C反应蛋白、抗环瓜氨酸肽抗体、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、补体C3、补体C4,红细胞分布宽度,计数中性粒细胞、淋巴细胞数量、中性粒细胞淋巴细胞比值的差异,Spearman相关分析及多元逐步回归分析RDW-SD、NLR与其他指标的关系,ROC曲线比较各指标的诊断性能。结果 RA患者和其他风湿性疾病患者RDW-SD、NLR均高于健康对照组(P<0.05);RA患者RDW-SD与CCP、C4相关,标准化回归系数分别为0.267(P<0.05)、-0.189(P<0.05),NLR与CRP独立相关,标准化回归系数分别为0.616(P<0.05);ROC曲线分析显示,抗环瓜氨酸肽抗体是诊断RA最佳指标,AUC为0.832(P<0.05)。结论 RDW-SD和NLR可以作为一个炎症反应指标,在RA诊断及疾病观察中有一定的价值。 钱成荣 田雪梅 李晗 刘昱 银广悦关键词:红细胞分布宽度 类风湿性关节炎 抗环瓜氨酸肽抗体 类风湿因子 SFRP1及WiF-1基因启动子甲基化检测在结直肠癌早期筛查中的价值 被引量:3 2016年 目的探讨粪便中Wnt途径的抑制因子(WIF-1)与分泌型卷曲蛋白(SFRP1)基因启动子甲基化检测在结直肠癌(CRC)早期筛查中的价值。方法选取32例查体健康者(对照组)与50例CRC患者(CRC组)、30例大肠增生性息肉患者(增生组)、36例大肠腺瘤患者(腺瘤组)为研究对象。采用QIAamp型粪便DNA提取试剂盒对粪便中的DNA进行提取,分析比较四组粪便中WIF-1及SFRP1基因甲基化情况。结果 CRC组WIF-1及SFRP1基因甲基化率为60.0%及64.0%,增生组为20.0%及20.0%,腺瘤组为44.4%及52.8%。联合WIF-1及SFRP1检测大肠腺瘤及CRC的敏感度分别为66.7%及76.0%,且两个基因在腺瘤组及CRC组中的甲基化水平高于对照组及增生组(P均<0.05)。WIF-1与SERP1基因甲基化和CRC患者临床病理特征无关(P均>0.05)。结论结直肠癌患者粪便中SFRP1及WIF-1基因启动子甲基化率明显升高,检测二者水平有助于结直肠癌早期筛查。 银广悦 刘创建 周志伟 徐翠玲 钱成荣 武彩虹 田雪梅 汪方圆关键词:结直肠癌 肠息肉 大肠腺瘤 甲基化 Th17细胞及IL-17在肿瘤免疫中的作用 被引量:1 2012年 辅助性T细胞17(Th17)和白细胞介素-17(IL-17)在多种肿瘤组织中分布和表达,其在肿瘤发生发展过程中起抗肿瘤还是促肿瘤作用目前尚未定论,因而有必要进一步研究它们在肿瘤微环境中的作用,希望在肿瘤治疗过程中趋利避害,提高疗效。 赵勇 张继领 银广悦关键词:肿瘤 白细胞介素17 TH17细胞 L-精氨酸通过抑制NF-кB途径减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤 2014年 目的观察L-精氨酸(L-Arg)对大鼠脑缺血-再灌注(I/R)损伤的作用并探讨其机制。方法成年健康SD大鼠36只随机分3组,假手术(Sham)组、I/R组、L-Arg治疗(ARG)组,每组12只,采用大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立大鼠局灶脑缺血模型。I/R组、ARG组于缺血2 h再灌注时分别给予生理盐水和L-Arg,实验中监测大鼠血压。于再灌注72 h后进行神经功能评分,TTC染色检测各组脑梗死体积百分比,Western blot测定大鼠缺血脑组织内NF-κB p65、IκBα的表达水平并进行组间比较。结果 1各组大鼠血压比较,差异无统计学意义(P>0.05);2与I/R组相比较,I/R后72 h,ARG组神经功能缺损程度评分明显改善(P<0.05),脑梗死体积显著缩小(P<0.05);3与Sham组比较,I/R组NF-κB p65表达明显升高(P<0.01),IκBα蛋白的表达明显降低(P<0.01);ARG组NF-κB p65的表达水平显著低于I/R组、高于Sham组(P<0.05),ARG组IκBα的表达水平显著高于I/R组、低于Sham组(P<0.05)。结论 I/R后早期给予L-Arg可减轻脑组织损伤,其机制与一氧化氮(NO)抑制NF-кB激活有关。 缴克华 丁俊丽 贺婕 银广悦 李战永关键词:L-精氨酸 脑缺血-再灌注 IΚBΑ 5-氮胞苷与HGF因子体外联合诱导人骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞实验探讨 2012年 目的探讨5-氮胞苷(5-Aza)与肝细胞生长因子(HGF)作为诱导剂,对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化为心肌样细胞的影响。方法采用密度梯度培养法与贴壁培养法相结合分离培养hMSCs,取第3代hMSCs随机分为3组,分别为HGF因子诱导分化组、5-Aza诱导分化组、HGF因子与5-Aza联合诱导分化组,诱导后培养4周,采用免疫细胞化学法对分化的心肌样细胞进行鉴定。结果结果表明hMSCs贴壁呈集落生长,有成纤维细胞样外观。各组诱导后细胞均呈梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成。免疫细胞化学法检测心肌特异性蛋白结蛋白(Desmin)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)表达阳性,未经诱导的同培养天数的hMSCs中均未见表达。HGF不能诱导hMSCs向心肌细胞转化,但HGF因子与5-Aza联合诱导分化组心肌样细胞分化率明显高于其他两组。结论 hMSCs体外在HGF诱导下可定向分化为心肌样细胞,5-Aza与HGF体外联合应用可以提高hMSCs的诱导分化效率。 银广悦 陈素萍 王文红 张继领 张龙 张明关键词:人骨髓间充质干细胞 心肌样细胞 5-氮胞苷 肝细胞生长因子 分化 全血超敏C反应蛋白联合血白细胞及便常规检测对小儿急性胃肠炎的临床意义 被引量:9 2016年 小儿急性胃肠炎是一种常见的消化道疾病。小儿胃肠道功能比较差,对外界感染的抵抗低,容易发病。不同病原体所致的肠炎,临床表现具有相似之处,特别是夏秋季节发病率更高,给疾病的早期诊疗及鉴别带来更大的困难。另外病原体不同,治疗方法也不同。因此,运用何种简便、快速的检测方法对于小儿急性胃肠炎诊断及治疗具有重要的临床价值。 龚庆辉 张龙 银广悦 钱成荣 王保亚关键词:超敏C反应蛋白 血白细胞 消化道疾病 全血 低颅压综合征6例分析 被引量:1 2016年 目的分析总结低颅压综合征的临床表现、诊断和治疗方法。方法报道6例低颅压综合征病人,并回顾文献报道分析其临床特征、影像学表现、治疗和发病机制。结果 6例低颅压综合征病人中2例为原发性,4例为继发性,表现为起立时即出现头痛、呕吐及颈强直,卧位时症状消失,脑脊液压力均低于60 mm H2O。结论了解低颅压综合征的临床、脑脊液和磁共振成像(MRI)表现至关重要,可以提高疾病的诊断符合率,减少误诊和漏诊。 丁俊丽 贺婕 李尔曼 缴克华 肖丽萍 银广悦关键词:低颅压综合征 脑脊液漏 磁共振成像 可溶性E-钙粘蛋白(SE-CAD)在系统性红斑狼疮中的临床研究 被引量:3 2016年 目的探讨血清可溶性E-钙粘蛋白(soluble E-cadherin,SE-CAD)在系统性红斑狼疮(SLE)中的表达,并分析其与SLE患者一些临床指标的相关性。方法 95例SLE患者(均为女性)作为实验组,35名健康体检女性作为对照组,检测血清SE-CAD、ESR、甘油三酯等的水平。结果 SLE患者血清SE-CAD水平高于健康对照组,将SE-CAD作为因变量,患者年龄、ESR、血肌酐、GFR、胆固醇、甘油三酯、白细胞介素6(IL-6)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)作为自变量,多元回归分析,SLE患者血清SE-CAD水平与年龄、ESR、血肌酐、胆固醇、甘油三酯、IL-6和MMP-3呈正相关,其中血肌酐、年龄、ESR和甘油三酯为主要影响因素。在血肌酐﹥90μmol/L、GFR<50ml/min或者合并肾炎的SLE患者中血清SE-CAD水平显著升高。结论血清SE-CAD水平可以反映SLE患者的活动性。而且在SLE患者合并肾炎时显著升高,提示血清SE-CAD水平可以作为诊断狼疮性肾炎的一个标志物。 武彩虹 银广悦 钱成荣 张龙 龚庆辉 郭煜关键词:系统性红斑狼疮 ESR 肌酐 甘油三酯 P53蛋白在乳腺癌中表达的META分析 2019年 目的评价P53蛋白表达与乳腺癌发生的相关性。方法计算机检索中国知网、万方、维普数据库在国内公开发表的关于乳腺癌组织中P53表达的病例-对照研究,以此作为基础文献,数据以Revman5.3和R3.4.1软件进行meta分析。结果共搜集到符合要求的文献16篇,Meta分析结果显示,乳腺癌患者P53蛋白阳性率高于乳腺良性病变和正常组织(P<0.05),淋巴结转移组高于淋巴结未转移组(P<0.05),Begg法和Egger法证实文献无明显发表偏倚。结论P53蛋白在乳腺癌患者中的阳性率高于乳腺良性病变和正常组织,淋巴结转移组阳性率高于未转移组。 周志伟 刘继勇 银广悦 王凌凌 尹志辉关键词:乳腺癌 P53蛋白 META分析