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HTLV-1病毒Tax蛋白对T淋巴细胞DcR3基因表达的影响被引量：1: 2011年; 目的探讨H1]LV-1病毒Tax蛋白对T淋巴细胞DeR3基因表达的影响。方法构建pGL3-DeR3-luc（-1010bp-＋114bp）荧光素酶报告基因；利用脂质体介导的方法将pGL3-DcR3-luc转染到MT-2、TaxP、Jurkat细胞中，48h后检测DcR3荧光素酶报告基因的活性；利用脂质体介导的方法将梯度剂量的pCMV-Tax转染入Jurkat细胞，48h后提RNA逆转录，real-timePCR检测DeR3mRNA的表达的变化；选用流式细胞技术检测MT-2、TaxP、Jurkat细胞表面DeR3蛋白的表达。结果成功构建DcR3基因调控序列荧光素酶报告基因pGL3-DeR3．1ue；荧光素酶活性的检测显示，与对照组相比，MT2细胞荧光素酶活性升高了32．07±12．43倍，TaxP细胞荧光素酶活性升高了13．27＋4．04倍，Jurkat细胞荧光素酶活性升高了1．26_＋0．49倍。与Jurkat细胞相比，MT2细胞和TaxP细胞的相对荧光素酶活性明显升高（P〈0．01）；Real-timePCR结果显示，4组Ct内参／Ct目的基因的值依次是0．40±0．02、0．44±0．01、0．47±O．02、0．53±0．02；DeR3mRNA的表达与转染pCMV-Tax存在着剂量依赖性（P〈0．05）。流式细胞技术检测，MT2和TaxP细胞实验组DcR3蛋白的表达较对照组Jurkat细胞表达的高（P〈0．05）。MT2细胞的结果是33．1±9．9，Ta）‘P细胞的结果是35．1±4．8，Jurkat细胞的结果是16．9±2．3。结论Tax蛋白能够促进DeR3基因在T细胞中的表达。; 吕壮伟牛志国陈丽媛王金恒陈琳王辉; 关键词：DCR3

HMGB1对HTLV-1病毒Tax蛋白表达的T细胞中NF-κB活性的影响被引量：5: 2010年; 目的:构建人高迁移率组蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)的真核表达载体,转入TaxP及TaxN细胞进行表达,并研究其对Tax蛋白表达的T细胞中NF-κB活性的影响。方法:用RT-PCR方法扩增人T淋巴细胞系Jurkat细胞中HMGB1的cDNA,连接于真核表达载体pcDNA3.0;将pcDNA3.0-HMGB1转染TaxP及TaxN细胞,48小时后检测RT-PCR检测HMGB1和Tax mRNA的表达,HMGB1及p65蛋白的表达;将pcDNA3.0-HMGB1和NF-κB报告基因共转染TaxP及TaxN细胞48小时后检测荧光素酶活性。结果:成功构建了重组表达质粒pcDNA3.0-HMGB1;Tax可以促进HMGB1mRNA和蛋白的表达,HMGB1可以促进p65mRNA和蛋白的表达,并能上调NF-κB活性。结论:HMGB1能协同Tax蛋白激活NF-kB。; 刘苏慧牛志国李俊英胡新攀赵玲玲范勇利陈丽媛王辉; 关键词：NF-ΚB

T细胞白血病病毒1型Tax蛋白阳性细胞中早期生长反应基因-1对NF-κB活性的影响被引量：7: 2011年; 目的观察人T细胞白血病病毒1型（HTLV-1）的Tax蛋白阳性细胞中早期生长反应基因-1（EGR-1）与NF．KB的关系。方法RT—PCR扩增MT2细胞中EGR-1的cDNA全长，连接于真核表达载体pcDNA3．0；用脂质体介导的方法将pcDNA3．0-EGR-1转染TaxP／TaxN细胞，48h后PCR检测EGR．1和p65mRNA的表达，Westernblot检测EGR-1及p65蛋白的表达；将pcDNA3．0-EGR-1和NF．KB报告基因共转染TaxP及TaxN细胞48h后检测荧光素酶活性。结果成功构建了重组表达质粒pcDNA3．0-EGR-1，Tax可以促进EGR-1mRNA和蛋白的表达；EGR-1可以促进TaxP细胞p65mRNA和蛋白的表达，上调NF-κB活性。结论EGR-1可能通过促进NF-KB活化参与成人T淋巴细胞白血病（adult T-cellleukemia，ATL）的发病。; 牛志国余志豪陈丽媛黄青松高攀何钰辉王辉; 关键词：HTLV-1 EGR-1 TAX NF-ΚB

姜黄素对糖尿病大鼠脊髓背角TNF-α表达的影响被引量：3: 2011年; 目的:探讨糖尿病大鼠模型脊髓背角TNF-α表达变化以及姜黄素对该分子表达的影响。方法:30只SD雄性大鼠随机分为对照组(Con)、糖尿病组(DM)和姜黄素治疗组(DM+Cur),每组10只;利用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,DM+Cur组为糖尿病模型制备成功后给予姜黄素治疗,同时Con组和DM组给予等量的生理盐水。利用ELISA方法检测各组大鼠脊髓背角TNF-α分子的含量,利用RT-PCR方法比较各组大鼠脊髓背角TNF-αmRNA的表达。结果:成功制备Ⅰ型糖尿病(TIDM)大鼠模型,该模型具有高血糖、质量减轻、多饮、多食、多尿等特点,ELISA检测结果显示Con组、DM组和DM+Cur组大鼠脊髓背角TNF-α分子含量分别为:21±6 pg/mL、145±11 pg/mL以及80±7pg/mL,DM组TNF-α分子含量明显高于Con组(P<0.05),给予姜黄素治疗后,DM+Cur组TNF-α显著下降,但仍高于Con组(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示DM组大鼠脊髓背角TNF-αmRNA高于Con组,给予姜黄素治疗后,DM+Cur组TNF-αmRNA较DM组有所降低,这一趋势与ELISA结果相一致。结论:STZ诱导的TIDM大鼠脊髓背角TNF-α表达增加,中药姜黄素可以降低TIDM大鼠髓背角TNF-α的表达。; 王国霞陈丽媛刘素芳孙书明王辉; 关键词：姜黄素糖尿病

成人T细胞白血病细胞中Bcl-3过表达对NFκB通路的影响被引量：1: 2012年; 人类T淋巴细胞白血病病毒（HTLV-1）编码的Tax蛋白是其引起成人T细胞白血病（ATL）的重要致病蛋白，Tax蛋白也称转录激活蛋白，是一种反式作用因子，可通过反式作用元件激活病毒的转录，同时具有反式激活宿主细胞相关基因的作用，特别是持续激活NFKB通路，从而引起宿主细胞恶性转化，而发展为ATL。; 李俊英张文高琰陈丽媛王辉; 关键词：NFKB 人类T淋巴细胞白血病病毒白血病细胞过表达

蝎素组分Ⅲ对THP1细胞HMGB1表达的影响被引量：4: 2012年; 目的:研究蝎素组分Ⅲ(Scorpion venom crudeⅢ,SVC-Ⅲ)对THP1细胞HMGB1表达的影响,探讨蝎素与HMGB1相互作用的机制。方法:不同浓度SVC-Ⅲ(0.1、1.0、10和100 ng/ml)刺激培养THP1细胞48小时后,RT-PCR检测HMGB1 RNA水平表达差异;Western blot检测HMGB1蛋白水平表达情况;激光共聚焦检测HMGB1在细胞中的分布情况。结果:1.0 ng/ml SVC-Ⅲ刺激培养THP1细胞,HMGB1 RNA及蛋白表达水平升高最显著,随着SVC-Ⅲ浓度的增加,HMGB1 RNA及蛋白的表达水平反而下降;SVC-Ⅲ刺激培养THP1细胞可引起HMGB1从胞核转移入胞浆。结论:SVC-Ⅲ可以刺激或抑制THP1细胞HMGB1的表达,其作用效果与剂量密切相关。; 朱琳琳牛志国宋向凤陈丽媛张晨光王辉; 关键词：HMGB1

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陈丽媛

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