马米玲 作品数:150 被引量:315 H指数:11 供职机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
鉴定和检测多种羊泰勒虫的试剂盒及制备方法 本发明公开一种用于检测和鉴定对羊吕氏泰勒虫、羊尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫的多重PCR鉴定试剂盒。本发明的鉴定和检测多种羊泰勒虫的试剂盒中包括有三对特异性引物,它们分别是:羊吕氏泰勒虫上、下游引物,羊尤氏泰勒虫上、下游物和绵羊... 殷宏 罗见勋 李有全 张晓 刘志杰 陈泽 杨吉飞 关贵全 牛庆丽 任巧云 刘爱红 刘军龙 马米玲 岺双庆 何海宁羊源巴贝斯虫未定种甘肃敦煌株的发现 被引量:1 2011年 采用动物接种法将采自甘肃敦煌的15只绵羊血液混合后感染1只除脾绵羊,感染后逐日做血涂片检查。结果显示,在感染后第10天的血片上出现了1种大型巴贝斯虫。虫体形态以双梨子形、单梨子形、圆形及卵圆形为主。在感染后第12天,感染羊体温升至41.1℃。染虫率达到0.125%,之后逐渐下降。无菌采集该羊血液,提取全血基因组,用梨形虫通用引物进行PCR扩增全长18SrRNA基因,得到长约1 700bp的片段,将其克隆并测序(登录号:HQ730762),与GenBank中的其他巴贝斯虫的序列进行比较,发现其与新疆巴贝斯虫未定种的同源性最高,达到99.8%。本研究发现甘肃敦煌又是一个新疆羊巴贝斯虫未定种的疫源地。 马米玲 关贵全 苟惠天 杨吉飞 万玉林 李有全 刘爱红 任巧云 陈泽 王朝文 刘志杰 罗建勋 殷宏关键词:绵羊血液 RRNA 聚合酶链反应 一种杀蜱生防制剂及其制备方法 一种杀蜱生防制剂,以白僵菌孢子粉与苦皮藤素为主要原料,按白僵菌孢子粉90-99%、苦皮藤素1-10%的质量比配制而成悬乳剂或粉剂。本发明的杀蜱生防制剂采用白僵菌通过液固两相发酵获得的分生孢子,经真空干燥、粉碎、120-2... 罗建勋 殷宏 任巧云 关贵全 马米玲 刘志杰 刘爱红 李有全鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达 被引量:6 2006年 参照Digby发表的鸡γ-干扰素的核苷酸序列,设计一对引物,应用RT-PCR技术,从ConA诱导过的鸡脾淋巴细胞中特异性地扩增出大小约为500bp的基因片段。将该扩增基因进行克隆测序,结果表明其序列与Digby报道的CHIFN-γ基因序列的同源性达100%。将该基因插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建成重组表达载体pGEX-CHIFN-γ,并将其导入大肠杆菌BL21中,诱导表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,分子量约为43ku,表明所克隆的CHIFN-γ基因在原核细胞中得到了表达。 史耀旭 关贵全 高金亮 党志胜 刘志杰 刘爱红 马米玲 任巧云 罗建勋 殷宏 曾巧英关键词:Γ-干扰素 克隆 对蜱致病性球孢白僵菌培养条件的优化 被引量:12 2011年 对前期筛选得到的具有生防潜力的杀蜱真菌Beauveria bassiana AT17菌株进行相关生物学性状的研究,建立一套规范的实验室培养的技术和方法,同时对其液固双相发酵技术进行优化,在于提供优质高效的生防材料,为其真菌制剂的规模化生产提供实践和理论基础。通过采用单因素筛选方案对其最适基础培养基、温度、pH值、碳源、氮源、微量元素及液固双相发酵配方进行研究,发现该菌株在PDA、PPDA、PDAY、SDAY、SMAY 5种培养基上均能较好生长,在PDA上生长最快,在PDAY上产孢量最大。温度对菌丝的生长和产孢影响显著,25°C菌丝生长最快,且产孢量最大。B.bassiana AT17菌株在pH 4-10范围内均可生长,在偏碱性环境内生长最快,在pH 5-6的偏酸性环境内产孢量最大。综合评价真菌各项指标后,葡萄糖和酵母粉为菌丝生长和产孢的最佳碳源和氮源,固体物料麦麸+玉米粉+米粉与基础培养液3/4 SDAY按2:1均匀混合后,添加0.05%K+可作为菌株固体发酵的最佳物料配方组合。 孙明 任巧云 关贵全 刘志杰 李有全 马米玲 刘爱红 牛庆丽 杨吉飞 殷宏 罗建勋关键词:球孢白僵菌 八种杀蜱药物与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性 被引量:3 2009年 为探索绿色高效的杀蜱新制剂,采用营养液萌发法和平板生长法测定了8种杀蜱药物与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性。结果显示,这8种药物与白僵菌的相容性和药物浓度呈负相关,次亚致死剂量的苦皮藤素、灭幼脲和溴氰菊酯与白僵菌的相容性良好,萌发率均在85%以上;用浸渍法测得白僵菌孢子浓度在1×107/mL时对蜱的致死率可达100%。结果表明,所试验的8种药物中,苦皮藤素、灭幼脲和溴氰菊酯可与白僵菌配伍使用;白僵菌的最佳使用浓度为1×107/mL。 任巧云 关贵全 李有全 马米玲 刘爱红 刘军龙 牛庆丽 金玉荣 王子坚 罗建勋 殷宏关键词:球孢白僵菌 生物相容性 莱姆病间接ELISA诊断方法的建立及应用 2011年 使用培养的狭义伯氏疏螺旋体B31菌株制备可溶性抗原,建立羊莱姆病血清抗体的间接ELISA诊断方法。应用伯氏疏螺旋体阴性、阳性血清评价该方法的特异性和敏感性。根据所建立的方法对从甘肃省甘南地区采集的450份羊血清进行检测。结果显示,该方法对羊莱姆病的阳性检出率和阴性符合率分别为90.1%和90.0%,与羊霉形体、布鲁氏菌、弓形虫以及羊无浆体、巴贝斯虫、泰勒虫等常见蜱传播病原的阳性血清之间没有交叉反应。甘肃省甘南地区夏河县、临潭县和卓尼县羊莱姆病的感染率分别为3.3%、6.1%和4.1%,甘南地区的平均感染率为5.1%。结果表明,本研究所建立的方法能够用于羊莱姆病的血清学诊断,甘南地区可能存在莱姆病的自然疫源地。 杨吉飞 关贵全 牛庆丽 刘志杰 李有全 刘军龙 马米玲 任巧云 刘爱红 罗建勋 殷宏关键词:莱姆病 伯氏疏螺旋体 可溶性抗原 间接酶联免疫吸附试验 实验室条件下对青海血蜱生活史的观察 研究青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)的生活习性对防治蜱及蜱传病具有重要意义,笔者在实验室对其生活史作了观察.结果显示,青海血蜱生活史较长,为三宿主蜱,在实验室条件下,一个生活周期平均为17... 马米玲 罗建勋 关贵全 陈泽 刘志杰 李有全 任巧云 刘爱红 杨吉飞 殷宏关键词:青海血蜱 生活史 建立在PCR-RFLP方法基础上的羊梨形虫的种类鉴定 被引量:2 2011年 羊的梨形虫病在世界范围内广泛分布,由多种泰勒虫和巴贝斯虫引起。在我国主要有莫氏巴贝斯虫、羊巴贝斯虫未定种、吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫,给我国畜牧业造成了巨大的经济损失。为了快速准确地鉴定羊梨形虫,作者运用PCR技术扩增了梨形虫的18 S rRNA基因,然后再分别用内切酶ClaⅠ、Sau96Ⅰ和MboⅡ酶切扩增产物,根据酶切后限制性片段多态性的不同,建立了PCR-RFLP方法,达到了鉴定莫氏巴贝斯虫、巴贝斯虫未定种、吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫的目的,为梨形虫的分类和流行病学调查提供了新的方法。 徐宗可 关贵全 刘爱红 马米玲 任巧云 殷宏 罗建勋关键词:梨形虫 泰勒虫 微小牛蜱雌蜱唾液腺消减cDNA文库的构建与分析 被引量:1 2010年 以我国微小牛蜱半饱血雌性成蜱唾液腺cDNA为检测子Tester),饥饿雌性成蜱cDNA为驱动子(Driver),采用抑制消减杂交技术和T/A克隆技术构建了微小牛蜱半饱血雌性成蜱唾液腺消减cDNA文库。对获得的158个阳性克隆进行PCR鉴定,显示插入片段主要集中在200-550bp之间,挑取60个阳性克隆进行测序,共获得了14个有效ESTs,生物信息学分析推测,它们所编码的功能性蛋白包括卵黄蛋白原、基质蛋白、富含脯氨酸蛋白质、OTM-3假定蛋白等。根据基因序列设计引物,以微小牛蜱DNA为模板,对所得ESTs进行鉴定,证明它们都是微小牛蜱所固有的。该项工作为进一步研究微小牛蜱唾液腺差异表达基因奠定了基础。 杨朝霞 关贵全 马米玲 刘军龙 殷宏 罗建勋关键词:微小牛蜱 抑制消减杂交 表达序列标签