黄钢
- 作品数：29 被引量：81H指数：5
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 临床医学八年制遗传学与基因组学课程构建的探索与体会被引量：4
- 2010年
- 文章介绍了在临床医学八年制遗传学与基因组学教学实践中的经验及体会,提出了整合课程、联合使用传统讲授式教学与案例讨论式教学方法、培养学生创新能力和优化考核指标等方法能够提高教学效果,激发学生学习的主动性,为八年制医学生的培养提供参考。
- 王艳艳王燕白云徐小峰黄钢
- 关键词：医学八年制课程构建
- 人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达
- 2004年
- 目的 克隆人LIGHT分子的全长cDNA ,构建重组真核表达质粒pCI neo LIGHT并在 2 93T细胞上获得稳定表达。方法 从人T细胞cDNA文库中用PCR技术克隆人LIGHT全长cDNA ,装入T Easy载体 ,测序证实后 ,将LIGHTcDNA装入质粒pCI neo中构建真核表达载体。用电穿孔法转染 2 93T细胞 ,经G418筛选后 ,用流式细胞仪检测LIGHT分子的表达。结果 测序证实克隆的LIGHT全长cDNA阅读框正确完整 ,酶切证实LIGHT pCI neo中LIGHT插入方向正确。转染的2 93T细胞经G418筛选 3个月后 ,流式细胞仪检测有 78 69%的细胞表达人LIGHT分子。结论 成功克隆LIGHT基因并获得稳定表达膜型LIGHT分子的 2 93T细胞系。
- 姜曼黄钢黎万玲白云
- 关键词：LIGHT293T细胞基因克隆真核表达
- 密切联系医学实践,提高医学遗传学教学效果被引量：5
- 2008年
- 针对医学本科生的特点，紧密联系医学实践，在医学遗传学教学中有意识地改进教学方法和手段，激发了学生学习的积极性，提高了学生联系医学实践综合分析问题的能力，取得了良好的教学效果。
- 黄钢宋敏白云
- 关键词：医学遗传学教学方法医学生
- 人RANK cDNA的克隆策略及其腺病毒表达研究
- OPG/RANKL/RANK信号系统是调节破骨细胞分化与功能的一个关键信号转导通路,通过调控三者之间的比例,可介导破骨细胞的分化和功能改变进而达到治疗代谢性骨病的效果,而借助腺病毒表达系统可使外源基因在破骨细胞获得高效表...
- 黄钢白云
- 关键词：腺病毒表达
- 人pri-miR-155重组腺病毒的制备及其表达与活性鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备表达人成熟miR-155的重组腺病毒,检测该免疫调控分子在肺癌细胞A549的表达及其生物学活性。方法以正常人基因组DNA为模板,PCR扩增约1000bp完整的pri-miR-155基因序列,克隆到T载体pTA2上,测序证实后,正向亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建pAdTrack-CMV/pri-miR-155重组质粒,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒重组并扩增后转染293FT细胞,进行重组腺病毒的包装、扩增,对其进行安全性、滴度的测定。用此腺病毒感染A549细胞,采用RT-PCR法检测成熟miR-155的表达,双报告基因法检测其干扰活性。结果构建的人pAdTrack-CMV/pri-miR-155重组质粒经酶切及测序鉴定正确;用此腺病毒感染A549细胞后,RT-PCR检测成熟miR-155表达较无关序列病毒感染对照组显著增强。腺病毒感染A549细胞后,通过转染后双报告基因检测相对萤光素酶活性较对照组降低,显示此腺病毒感染A549细胞后,可有效表达成熟miR-155,并具有生物学活性。结论成功制备人pri-miR-155重组腺病毒,并在感染肺腺癌细胞A549后高效表达成熟有活性miR-155。
- 黄钢王海燕王凯蒋建新白云
- 关键词：MIR-155重组腺病毒免疫调控
- 遗传咨询教学在医学遗传学中的应用实践被引量：3
- 2010年
- 在医学遗传学改革中采用开放式的遗传咨询教学,构建课外学习与课堂教学有机结合,师生互动和学生求索融合的立体化教学体系,实践过程中充分发挥其便于灵活互动的优势,调动学生的求知欲和主观能动性,促使学生主动收集资料和拓展知识面,培养其活学活用医学遗传学理论知识独立发现、分析和解决相关临床问题的能力,锻炼提高学生的语言表达能力,培养团队精神并增强集体荣誉感。实践证明有利于提高学生综合素质,并有助于全面提升教师的教学素养,达到教学相长的目的。
- 黄钢王燕白云
- 关键词：医学遗传学教学改革
- 新型钙增敏剂MCI-154对失血性休克动物心肌的保护作用被引量：5
- 2000年
- 目的 研究新型钙增敏剂MCI- 15 4对失血性休克动物心肌功能与结构改变的影响 ,明确MCI- 15 4对失血性休克的治疗作用。 方法 用家兔和大鼠两种动物制作失血性休克模型 ,设立MCI- 15 4治疗组和等渗盐水对照组 ,监测家兔心肌血流动力学指标 ,测定大鼠血浆CK-MB和LDH并观察大鼠心肌细胞结构的变化。 结果 MCI - 15 4治疗后LVSP、+dp/dtmax、Lo和Vpm等较对照组均有非常显著的升高、LVEDP显著降低 ;CK -MB、LDH的活性非常显著地低于对照组 ;心肌细胞结构损伤程度明显轻于对照组。 结论 MCI - 15 4可显著改善失血性休克兔和大鼠的心肌功能 ,减轻心肌细胞的损伤程度 ,对失血性休克心肌具有显著的保护作用。
- 殷作明胡德耀刘良明卢儒权陈艳黄钢
- 关键词：出血性休克心肌钙增敏剂心肌保护
- T细胞表达CD137L分子介导对血管内皮细胞的活化刺激效应
- 2005年
- 目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响。方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-CD137L共刺激通路后内皮细胞分泌细胞因子的变化。结果活化的T细胞刺激了内皮细胞活化,诱导了内皮细胞合成和分泌细胞因子IL-1、IL-8以及粘附分子ICAM-1的表达;可溶性融合蛋白CD137-Fc成功地阻断了CD137-CD137L的相互作用,内皮细胞合成和分泌细胞因子的能力降低。结论证明CD137-CD137L的相互作用在内皮细胞与T细胞的相互作用中发挥了重要的作用,提示CD137与其配体交联具有刺激内皮细胞活化的生物学功能。
- 张利永傅晓岚肖宇宏黄钢张立群白云
- 关键词：CD137CD137L共刺激分子
- 一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法
- 本发明涉及一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法，包括如下步骤：将包含6个串联重复TCF4转录因子的7TFP质粒采用慢病毒转移的方式转染宿主细胞形成稳定细胞株，并种植于96孔培养板，过夜贴壁后更换培养基，并加入待测样品，取...
- 章波庞学利黄钢何刚徐小峰宋敏
- 文献传递
- 融合蛋白mTSLPR-Ig的表达、纯化及其鉴定
- 2011年
- 目的:构建含小鼠TSLPR胞外段与小鼠Ig Fc段融合基因的腺病毒表达载体(Ad-mTSLPR-Ig),体外表达、纯化并鉴定可溶性融合蛋白mTSLPR-Ig。方法:运用PCR方法从小鼠胸腺cDNA文库中扩增mTSLPR胞外段基因,构建并鉴定mTSLPR胞外段与小鼠Ig Fc段融合基因的腺病毒表达载体(Ad-mTSLPR-Ig);将Ad-TSLPR-mIg转染COS-7细胞,收集细胞上清液;采用双抗体ELISA夹心法检测上清中融合蛋白表达;经蛋白A亲和层析,制备纯化可溶性融合蛋白mTSL-PR-Ig。结果:经测序证实,所构建表达载体的目的基因片段mTSLPR-Ig序列正确,成功包装出腺病毒表达载体Ad-mTSL-PR-Ig;ELISA法检测到上清中融合蛋白mTSLPR-Ig的表达;通过亲和层析法获得纯化的融合蛋白,经Western blot鉴定融合蛋白表达无误。结论:成功获得可溶性融合蛋白mTSLPR-Ig,为进一步研究其生物学特性奠定基础。
- 张方施毅黄钢李子玲胡波宋勇
- 关键词：可溶性受体TSLP哮喘
