于婉莹
- 作品数：24 被引量：75H指数：4
- 供职机构：唐山市妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金河北省医学科学研究重点课题更多>>
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- 新生鼠肺成纤维细胞原代培养方法的比较与体外肌成纤维细胞分化模型的建立被引量：10
- 2014年
- 目的肌成纤维细胞(fibroblasts,FB)是器官纤维化形成过程中关键的靶细胞,以特异表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和细胞基质沉积为特征。文中比较胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB的优缺点,并报道体外肌FB分化模型的建立。方法分别采用胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB,倒置相差显微镜观察原代培养,MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学染色法鉴定细胞来源,采用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导FB向肌FB分化。结果采用胰蛋白酶消化法和组织块贴壁法均可以成功原代培养鼠胚肺FB,2种方法无论在形态、细胞增殖水平还是在细胞鉴定方面均无差异,但胰蛋白酶消化法在相同条件下能够快速获得较组织贴壁法更多的细胞,且2种方法获得的FB在4代之内均不表达α-SMA,需经TGF-β1诱导分化为肌FB。随TGF-β1诱导时间的延长,α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达上调。结论胰酶消化法较组织贴壁法能快速、大量获得纯度较高的FB,4代以内的乳鼠FB适合建立肌FB分化模型。
- 孙月徐洪徐丁洁魏中秋于婉莹邓海静薛新新杜世璞杨方
- 关键词：成纤维细胞原代培养肌成纤维细胞
- microRNA-325-3p在体外受精-胚胎移植反复自然流产中的作用及机制
- 2021年
- 目的研究在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者中,microRNA-325-3p(miR-325-3p)是否参与反复自然流产的发生和发展,以及在其中的作用机制。方法选取2015年1月至2019年6月在唐山市妇幼保健院就诊的89例IVF-ET反复自然流产患者和202例正常妊娠行人工流产患者作为研究对象。获取其妊娠4~12周的流产组织。通过原位杂交及实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)比较IVF-ET反复自然流产患者组织与正常人工流产患者组织中miR-325-3p表达差异;通过生物信息学网站预测miR-325-3p的可能靶基因,采用免疫印迹(Western blot)、qRT-PCR技术在细胞及组织水平对其进行验证,探究两者在IVF-ET反复自然流产患者中的作用机制。结果原位杂交显示,IVF-ET反复自然流产患者组织均表达miR-325-3p强信号,而正常人工流产患者组织仅存在miR-325-3p弱表达(P<0.01),qRT-PCR进一步证实该结果。Western blot、qRT-PCR检测miR-325-3p模拟物、抑制物转染的细胞,证实叉头框转录因子p3(Foxp3)为miR-325-3p的靶基因之一,且Foxp3蛋白及mRNA水平的表达量被miR-325-3p模拟物显著降调,被抑制物显著上调。与正常人工流产患者组织比较,IVF-ET反复自然流产患者组织Foxp3蛋白及mRNA表达均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MiR-325-3p的其中一个靶基因是Foxp3,通过miR-325-3p增高进而降调Foxp3的表达,来实现免疫耐受降低,可能是IVF-ET患者发生反复自然流产的机制之一。
- 于婉莹曾彬梁雨苏兴崔静赵天祺
- 关键词：MICRORNA体外受精-胚胎移植反复自然流产
- TGF-β_1介导的RhoA/ROCK通路在大鼠肺肌成纤维细胞分化中的调节作用被引量：21
- 2013年
- 目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)介导的RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路在调控肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化过程中的作用。方法:胰酶消化法获得原代培养的肺成纤维细胞,进行以下实验:(1)观察TGF-β1诱导肺成纤维细胞不同时间后p-RhoA、ROCK、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基(pMBS)、血清应答因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型和III型胶原蛋白表达变化;(2)将细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组和Y-27632(ROCK通路阻滞剂)干预组,免疫细胞化学染色与Western blotting法分别观察与检测ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白在细胞内的定位分布与表达。结果:(1)经TGF-β1诱导24 h后,大鼠肺成纤维细胞胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝。随着TGF-β1诱导刺激时间的延长,p-RhoA、ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达逐渐增高,其中RhoA/ROCK信号(p-RhoA、ROCK、p-MBS)、SRF和α-SMA蛋白分别在诱导后6 h、12 h和24 h达到高峰。I型胶原和III型胶原蛋白表达均在24 h达高峰,分别为诱导前的2.19和3.04倍(P<0.05)。(2)与TGF-β1诱导分化组比较,当给予Y-27632干预后,在相应时点ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1通过ROCK信号转导通路的活化,刺激了大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,进而促进了胶原蛋白的合成,可能在(矽)肺纤维化形成过程中发挥着重要作用。
- 马文东袁媛杨奕徐洪邓海静于婉莹孙月魏中秋杨方
- 关键词：转化生长因子Β肌成纤维细胞肺纤维化
- 胚胎培养液中表皮生长因子、转化生长因子、血管内皮生长因子与胚胎发育、妊娠结局的关系
- 2023年
- 目的分析胚胎培养液中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)、血管内皮生长因子(VEGF)与胚胎发育及体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后妊娠结局的关系。方法选取2020年2月至2021年6月在唐山市妇幼保健院就诊并接受IVF-ET的92例病人为研究对象,根据妊娠结局将其分为妊娠组54例和非妊娠组38例;采用Wetzels胚胎评分系统进行胚胎评级,根据评分将胚胎分为Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级+Ⅳ级组。留取胚胎培养液,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测胚胎培养液中EGF、TGF-β1、VEGF表达水平;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析胚胎培养液EGF、TGF-β1、VEGF水平对妊娠结局的预测价值;采用logistic回归分析影响IVF-ET后妊娠结局的因素。结果Ⅲ级+Ⅳ级组、Ⅱ级组、Ⅰ级组EGF[(0.46±0.19)、(1.14±0.21)、(2.68±0.81)μg/L]、TGF-β1[(58.72±15.13)、(80.68±19.12)、(98.74±23.75)ng/L]表达水平依次升高,VEGF[(39.66±12.71)、(22.85±4.79)、(13.86±3.32)ng/L]表达水平依次降低(P<0.05)。与妊娠组[(2.54±0.73)μg/L、(85.44±19.87)ng/L、(15.94±3.61)ng/L]相比,非妊娠组EGF[(1.49±0.43)μg/L]、TGF-β1[(60.42±15.76)ng/L]表达水平较低,VEGF[(24.75±7.94)ng/L]表达水平较高(P<0.05)。EGF、TGF-β1、VEGF水平及三者联合预测妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.88[95%CI:(0.78,0.97)]、0.88[95%CI:(0.78,0.98)]、0.81[95%CI:(0.68,0.95)]、0.96[95%CI:(0.90,1.00)],特异度分别为82.4%、82.4%、94.1%、88.2%,灵敏度分别为83.3%、94.4%、66.7%、96.4%。VEGF是IVF-ET后妊娠失败的独立危险因素(P<0.05),TGF-β1是IVF-ET后妊娠失败的保护因素(P<0.05)。结论胚胎培养液中EGF、TGF-β1、VEGF表达水平可能对评估胚胎质量及预测妊娠结局有重要价值。
- 曾彬苏兴崔静于婉莹
- 关键词：体外受精表皮生长因子转化生长因子血管内皮生长因子类胚胎发育
- Ac-SDKP对ROCK通路介导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用被引量：6
- 2013年
- 目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是否能够通过对转化生长因子-β1（TGF-β1）介导的ROCK通路的调节,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化.方法 胰酶消化法原代培养肺成纤维细胞,取4代肺成纤维细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组、Y-27632干预组和Ac-SDKP干预组.激光共聚焦扫描显微镜观察ROCK、SRF以及d-SMA在细胞内的定位与分布情况;蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测ROCK、SFR、α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白在肺成纤维细胞的表达;实时定量荧光聚合酶链反应法（Real time PCR）检测ROCK、SFR、α-SMA mRNA的表达.结果 与对照组相比较,给予TGF-β1诱导刺激后,激光共聚焦扫描显微镜显示胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝,诱导刺激6、12、24 h后,ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增强,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与TGF-β1诱导分化组比较,给予Y-27632干预后,在相应时间点ROCK、SRF、d-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.给予Ac-SDKP干预后,在相应时间点ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达也较TGF-β1诱导分化组明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑大鼠成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化和抑制胶原蛋白的合成,可能是Ac-SDKP发挥其抗（矽）肺纤维化的作用机制之一.
- 袁媛杨方徐洪于婉莹孙月邓海静马文东魏中秋王瑞敏
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸
- 体外受精-胚胎移植时胚胎培养液HCG、sHLA-G和LIF水平对不孕症患者妊娠结局的预测价值被引量：2
- 2023年
- 目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)时胚胎培养液人绒毛膜促性腺激素(HCG)、人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)、白血病抑制因子(LIF)水平对不孕症患者妊娠结局的预测价值。方法选择接受IVF-ET的不孕症患者103例,其中妊娠成功49例(成功组)、妊娠失败54例(失败组),取受精第3天胚胎培养液,采用ELISA法检测胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF。收集所有不孕症患者临床资料,采用多因素Logistic回归模型分析不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平对不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的预测价值。结果失败组胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平均显著低于成功组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,高龄、基础FSH水平下降、基础E2水平下降、无优质胚胎、移植胚胎1个以及胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF低水平均为不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的影响因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平单独和联合预测不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的曲线下面积分别为0.858、0.872、0.898、0.904,胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平对不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败均有一定预测价值,三者联合预测价值更高(P均<0.05)。结论不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败者胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平均显著降低;IVF-ET时胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平对不孕症患者妊娠结局均有一定预测价值,三者联合预测价值更高。
- 崔静于婉莹曾彬韩宝生
- 关键词：体外受精-胚胎移植白血病抑制因子
- 低评分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的结局分析被引量：2
- 2016年
- 目的分析低胚胎评分患者行卵裂期(D_3)或囊胚期(D_5)移植的结局。方法选取接受IVF-ET治疗的低评分胚胎患者222例,根据患者意向分为卵裂期移植组(A组)和囊胚培养组(B组)。比较2组临床妊娠率、继续妊娠率及种植率。结果 2组的取卵周期临床妊娠率无显著差异(P>0.05),2组移植周期临床妊娠率、继续妊娠率及种植率有显著差异(P<0.05)。结论继续囊胚培养能有效筛选出低评分胚胎中具有发育潜能的胚胎,降低无效移植。
- 李宜学郭剑宁艳春于婉莹郭婉茹刘恒冯玉环
- 关键词：体外受精-胚胎移植囊胚
- 辅助生殖过程中血糖控制情况对2型糖尿病患者妊娠结局的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨糖尿病患者在辅助生殖过程中血糖控制情况对卵子质量和妊娠结局的影响。方法选择2013年9月—2017年6月在本中心接受体外受精(in-vitro fertilization,IVF)技术治疗的159例2型糖尿病女性不孕患者,根据其空腹血糖和糖化血红蛋白(HbA1c)值分为血糖控制不佳组、控制尚可组、控制良好组,并选取对照组183例,经促排卵和授精后分析受精率、优质胚胎率等实验室数据,并对临床妊娠和流产情况进行随访统计,以评价血糖控制情况对卵子质量和妊娠结局的影响。结果控制不佳组的第二次减数分裂中期(MII)卵率、优质胚胎率和囊胚形成率均最低,其中优质胚胎率和囊胚形成率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);临床妊娠率和流产率:控制不佳组临床妊娠率低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),流产率高,但比较差异无统计学意义。控制尚可组、控制良好组各项结果均接近对照组水平。结论在辅助生殖过程中,2型糖尿病女性的血糖控制良好或尚可则妊娠结局接近对照组水平,而血糖控制不佳会影响卵子和胚胎质量,并且降低临床妊娠率和增加流产可能性。
- 罗萌萌于婉莹崔静雷金梅刘东婷韩宝生
- 关键词：2型糖尿病受精率
- 复发性流产患者血清RAGE、IL-35、VCAM-1变化及与预后相关性分析被引量：1
- 2020年
- 目的探究复发性流产患者血清晚期糖基化终产物受体(RAGE)、白细胞介素-35(IL-35)、血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)变化及与预后相关性分析。方法选取2017年8月至2019年2月我院收治的53例复发性流产且出现先兆流产表现患者作为观察组,纳入68例正常妊娠者作为对照组。比较两组孕5~10周血清RAGE、IL-35、VCAM-1水平,随访所有患者至妊娠12周,统计保胎成功及失败患者血清各指标水平,Pearson分析血清各指标水平间及与预后关系,受试者工作曲线(ROC)分析血清各指标单纯及联合预测效能。结果①观察组孕5~6周、7~8周、9~10周血清RAGE高于对照组,IL-35、VCAM-1水平低于对照组(P<0.05);②孕7~8周三者联合预测复发性流产的曲线下面积(AUC)最大,为0.896(95%CI:0.827~0.944),预测敏感度及特异度为75.47%、95.35%;③观察组保胎成功者孕5~6周、7~8周、9~10周血清RAGE低于保胎失败者,IL-35、VCAM-1水平高于保胎失败者(P<0.05);④血清RAGE(r1=-0.612)与预后呈负相关,IL-35(r2=0.712)、VCAM-1(r3=0.801)与预后呈正相关(P均<0.05);⑤血清RAGE与IL-35(r1=0.645)、VCAM-1(r2=0.671)呈负相关,IL-35与VCAM-1(r3=-0.711)呈正相关(P均<0.05)。结论复发性流产患者血清RAGE、IL-35、VCAM-1水平异常与预后密切相关,有助于早期鉴别复发性流产,确定合理预防措施。
- 曾彬于婉莹李翠梁雨张鸥樊桂玲韩宝生
- 关键词：复发性流产RAGEIL-35VCAM-1
- 不良IVF结局患者NK细胞信号通路调节FoxP3细胞表达的研究被引量：4
- 2020年
- 目的探讨IVF不良结局患者叉头样转录因子P3(FoxP3)细胞表达情况及NK细胞信号通路调节机制。方法选取我院自2018年1月至2019年1月间收治的75例IVF不良结局患者作为研究对象,依据失败类型分成3组:实施IVF≥3次均未获得妊娠者(反复失败组)25例、实施IVF后仅生化妊娠患者(生化妊娠组)25例、实施IVF后妊娠12周内胚胎停止发育/自然流产者(流产胚停组)25例;选取同期生育1次健康未孕女性25例作为对照组。所有受检者均于卵泡末期采集静脉血液,EDTA抗凝后密度梯度离心法分离血液中的单个核细胞(PBMC),再用免疫磁珠法分离血液中的NK细胞、CD4+CD25-Treg细胞,流式细胞分析各组NK细胞亚群活性;实时定量PCR检测4组受检者CD4+CD25-Treg细胞中FoxP3 mRNA表达情况,并分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的NK细胞对于CD4+CD25-Treg细胞表达FoxP3的影响。结果与健康对照组比较,IVF不良结局各组CD56+、CD56+CD16+NK细胞水平均显著升高(P<0.05);IVF不良结局组中流产胚停组CD56+NK细胞水平显著高于其他两组(P<0.05)。IVF不良结局各组CD4+CD25-Treg细胞FoxP3 mRNA表达水平均显著低于健康对照组(P<0.05),且不良结局组中反复失败组、生化妊娠组CD4+CD25-Treg细胞FoxP3 mRNA表达水平显著低于流产胚停组(P<0.05)。体外刺激实验显示TNF-α诱导NK细胞下调CD4+CD25-Treg细胞FoxP3的表达(P<0.05)。结论IVF不良结局患者外周血中CD56+、CD56+CD16+NK细胞水平显著升高,而Treg细胞中Fox3 mRNA水平显著降低,且NK细胞能够下调Treg细胞中FoxP3的表达。
- 梁雨曾彬于婉莹李翠
- 关键词：体外受精自然杀伤细胞
