冯浩
- 作品数：11 被引量：30H指数：4
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PP242对人晶状体上皮细胞中Bcl-2表达的影响
- 目的：研究Bcl-2在PP242诱导的人晶状体上皮细胞凋亡中的作用。方法：不同浓度(0,100,250,500,750,1000,1500nmol/L)PP242处理经传代的永生系人晶状体上皮SRA01/04细胞系24、...
- 宁宏白雪冯浩张柳杨志博
- 关键词：人晶状体上皮细胞BCL-2
- 雷帕霉素对转化生长因子-β2诱导的人晶状体上皮细胞上皮-间叶样转化的抑制作用及其机制被引量：7
- 2013年
- 背景转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导的人晶状体上皮细胞（LECs）上皮细胞-肌成纤维细胞转化（EMT）过程是后发性白内障（PCO）的主要发病机制，因此寻求有效抑制这一作用的药物对于防治PCO有重要意义。目的观察雷帕霉素（RAPA）对人LECs增生和TGF-β2诱导的EMT的抑制作用。方法采用含质量分数10％胎牛血清的DMEM高糖细胞培养液对人LECs系SRA01／04进行体外培养，换以无血清培养液培养后分别用TGF-β2（5mg／L）、TGF-β2＋10nlg／LRAPA、TGF-β2＋100mg／LRAPA、TGF-β2＋1000mg／LRAPA、TGF-β2＋10000mg／LRAPA共培养SRA01／0472h，仅用无血清培养液培养的SRA01／04作为对照组。采用MTT法检测各组SRAOI／04的吸光度（A490）值以评估SRA01／04的增生情况，并计算RAPA对细胞生长的抑制率。各组细胞作用48h后，采用逆转录PCR（RT-PCR）法和Westernblot法分别检测LECsETM的标志物-α平滑肌肌动蛋白（d-SMA）和上皮性钙黏附蛋白（E-cad）的表达。选取TGF-β2＋400mg／LRAPA分别作用于培养的SRA01／0424、48、72h，采用Westernblot法检测SRA01／04中α-SMA、E-cad的表达水平。结果MTT法检测结果显示，对照组、TGF-β2组、TGF-β2＋10ing／LRAPA组、TGF-β2＋100mg／LRAPA组、TGF-β2＋1000ing／LRAPA组和TGF-β2＋10000mg／LRAPA组SRA01／04的A490值分别为0．680＋0．020、0．550±0．013、0．480＋0．014、0．400＋0．011和0．200＋0．019，表明随着RAPA质量浓度的增加，SRAOI／04增生值降低，差异有统计学意义（F=101．920，P=0．000），且RAPA的抑制率逐渐增加。RT-PCR和Westernblot检测结果表明，阴性对照组SRAOI／04中α-SMAmRNA（α-SMAmRNA／β-actinmRNA）及其蛋白（α-SMA／β-actin）仅有少量表达，TGF．B，组可见SRAOI／04中01．SMAmRNA及其蛋白表达量明显增加，但不同质量浓度的RAPA作用于SRA01／04后，随着RAPA质量浓度的增加，SRAOI／04中α-SMAmRNA及蛋白的表达�
- 林婷婷王思敏刘加勇冯浩宁宏
- 关键词：雷帕霉素转化生长因子-Β2人晶状体上皮细胞
- 干扰素／维甲酸诱导细胞凋亡相关基因19表达与紫外线诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的关系被引量：2
- 2013年
- 背景长期暴露于紫外线照射的环境中可通过破坏细胞线粒体的跨膜电位等机制促进相应组织中的细胞凋亡，包括人晶状体上皮细胞（LECs）。干扰素／维甲酸诱导细胞凋亡相关基因-19（GRIM-19）位于线粒体呼吸链Ⅰ上，与紫外线照射诱导的LECs凋亡过程是否有关尚不明确。目的探讨GRIM-19与长波紫外线照射诱导的人LECs损伤的关系。方法将人LECs系SRA01／04用常规培养方法在含质量分数10％胎牛血清的α-MEM培养液中进行培养，当细胞生长至对数生长期并达到80％融合时用长波紫外线照射，时间分别为5、10、15、20、25min，长波紫外线剂量分别为30、60、90、120、150mJ／cm^2，照射后继续培养1h，对照组细胞与实验组培养方法相同，但不用长波紫外线照射。采用流式细胞技术测定各组培养的凋亡率，应用Westernblot法检测各组培养上清液中GRIM-19蛋白的表达强度和相对表达量，采用单因素方差分析法对不同组间LECs凋亡率和GRIM-19蛋白相对表达量的差异进行比较，用Pearson积矩线性相关分析法评估LECs凋亡率与GRIM-19蛋白相对表达量的关系。结果不同剂量的紫外线照射培养的LECs后各组细胞凋亡率的总体比较差异有统计学意义（F=149．32，P〈0．01），其中60、90、120及150mJ／em。紫外线照射组与对照组比较，细胞凋亡率均明显增加，差异均有统计学意义（q=-17．02、-25．20、-29．41、-8．61，P〈0．01）。不同剂量的紫外线照射培养的LECs后细胞上清液中GRIM·19的表达明显增强，各组LECs上清液中GRIM-19的相对表达量（GRIM-19／β-actin）的总体差异有统计学意义（F=6．87，P〈0．05），其中60、90、120、150mJ／cm。紫外线照射组细胞上清液中GRIM-19的相对表达量分别为2．01±O．76、2．98±1．80、3．97±1．61和2．42±1．28，均明显高于对照组的0．56±0．23，差异均有统计学意义（q=-4．12�
- 王思敏冯浩林婷婷刘加勇宁宏
- 关键词：干扰素人晶状体上皮细胞细胞凋亡
- 国产羟基磷灰石义眼台在眼球严重扩张病例中植入方法的探讨
- 2012年
- 随着生活质量的提高,因各种原因无法保留完整眼球的患者,对眼窝成形的要求越来越高.目前,羟基磷灰石（hydroxyapatite, HA）义眼台已广泛应用于眼部整形和眼窝成形术中.义眼台植入的手术方法很多,手术操作较为复杂繁琐,对组织的创伤较大,并且,由于HA义眼台植入手术方法和技巧的不同,会导致术后不同并发症的发生.自2008年至2011年,我们在眼球严重扩张病例中,采用自体巩膜双层帽状遮盖国产HA义眼台植入术,获得了较好的临床效果.现报道如下.
- 张瑞君万超周赟孙一洲冯浩任红刘畅
- 关键词：羟基磷灰石义眼台植入眼窝成形术
- PP242对人晶状体上皮细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响被引量：5
- 2016年
- 目的探讨PP242对人晶状体上皮细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响。方法采用不同浓度PP242处理培养传代的永生系人晶状体上皮细胞系SRA01/04。采用MTT法检测处理24、48 h后的细胞生长抑制率,采用实时定量RT-PCR和免疫印迹法检测不同浓度PP242处理48 h后Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平的变化情况。结果 100、250、500、750、1 000、1 500 nmol/L PP242对人晶状体上皮细胞SRA01/04作用24、48 h后,细胞生长抑制率24 h组分别为7.55%、9.43%、16.98%、22.64%、26.42%、30.19%,48 h组分别为11.11%、23.81%、36.51%、42.86%、49.21%、63.49%,与对照组(0 nmol/L)比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。免疫印迹法检测结果显示:在相同作用时间内,随着PP242药物浓度的增加,Bcl-2蛋白的表达水平逐步下降,与对照组(0 nmol/L)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实时定量RT-PCR检测结果显示:在相同作用时间内,随着PP242药物浓度的增加,Bcl-2 mRNA表达水平亦逐步下降;m RNA相对表达量分别为0.723±0.039,0.517±0.028,0.353±0.052,0.167±0.046,与对照组(0 nmol/L)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PP242能够抑制体外培养的人晶状体上皮细胞的生长,呈浓度和时间依赖性。人晶状体上皮细胞中存在Bcl-2的表达,PP242可下调其表达。
- 白雪冯浩张柳杨志博宁宏
- 关键词：人晶状体上皮细胞BCL-2
- PP242对人晶状体上皮细胞增殖的抑制作用及GRIM-19表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察PP242对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLEC)增殖和GRIM-19表达的影响。方法对永生系人晶状体上皮细胞SRA01/04进行培养及传代,Cell Counting Kit-8比色法检测PP242(100,250,500,750,1 000 nmol/L)处理细胞株SRA01/04后12,24,48 h细胞生长情况;应用免疫印迹法及实时定量RT-PCR检测使用PP242(100,250,500 nmol/L)培养细胞48 h后GRIM-19及其mRNA的表达情况。结果 100,250,500,750,1 000 nmol/L PP242对人晶状体上皮细胞系SRA01/04作用12,24,48 h后,其抑制率12 h组分别为8.59%,14.53%,19.62%,23.01%,28.80%;24 h组分别为10.22%,19.67%,34.92%,42.90%,46.86%;48 h组分别为24.19%,48.13%,54.54%,61.36%,65.34%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);100,250,500 nmol/L PP242处理人晶状体上皮细胞48 h后,免疫印迹法检测结果显示GRIM-19蛋白的表达水平逐渐增强;实时定量RT-PCR检测结果显示,GRIM-19 mRNA表达增强,绝对定量mRNA结果分别为0.700±0.112,0.994±0.128,1.584±0.173,与正常对照组(0.456±0.177)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PP242对体外培养的人晶状体上皮细胞的增殖存在抑制作用,其作用强度呈浓度和时间依赖性;人晶状体上皮细胞中存在GRIM-19的表达;PP242在抑制人晶状体上皮细胞的增殖过程中可上调GRIM-19的表达。
- 冯浩林婷婷王思敏刘加勇宁宏
- 关键词：人晶状体上皮细胞GRIM-19
- miR-15b-5p靶向CDK4抑制脉络膜黑色素瘤细胞增殖被引量：5
- 2019年
- 目的探讨miR-15b-5p通过靶向抑制细胞周期素依赖性激酶4 (CDK4)的表达进而发挥负向调节脉络膜黑色素瘤细胞增殖的作用。方法使用荧光素酶报告分析检测miR-15b-5p与CDK4结合情况。体外培养人眼侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞系MUM-2B,分别转染negative control RNA、miR-15b-5p mimics、inhibitor nc RNA和miR-15b-5p inhibitor;采用实时定量PCR检测转染后miR-15b-5p的表达水平;采用Western blotting检测4组细胞中CDK4蛋白的表达量;采用CCK8检测4组细胞的增殖能力;采用流式细胞术检测4组细胞周期情况。结果荧光素酶报告基因分析验证miR-15b-5p能够与CDK4 m RNA 3’UTR结合。与阴性对照组相比,mimics组miR-15b-5p表达显著增加(t=25.01,P <0.000 1),CDK4的蛋白表达水平降低,细胞增殖能力降低,细胞G1期比例增高。而与inhibitor nc组相比,inhibitor组miR-15b-5p表达减少,CDK4表达水平升高,细胞增殖能力增强,细胞G1期比例降低。结论miR-15b-5p能够靶向抑制CDK4的表达,造成肿瘤细胞发生G1期阻滞,从而有效抑制脉络膜黑色素瘤细胞增殖。
- 张晓楠冯浩白雪应曼曼孙胜男宁宏
- 关键词：脉络膜黑色素瘤
- 甲基强的松龙治疗葡萄膜炎的疗效观察被引量：1
- 2011年
- 目的:评价全身及眼局部联合应用甲基强的松龙治疗葡萄膜炎的疗效。方法:回顾性分析于中国医科大学附属第一医院眼科就诊并诊断为葡萄膜炎的患者86例157眼,应用甲基强的松龙500～1000mg全身静点冲击3～5d,后改为强的松1mg/(kg.d)口服,并且逐渐减量;患眼局部应用甲基强的松龙40mg球后注射连续3～5d,并逐渐减量,依据患者病情调整用药,观察治疗前后患者最佳矫正视力(BCVA)、眼底镜下所见葡萄膜炎和渗出性视网膜脱离恢复情况、眼底血管荧光造影荧光渗漏情况及OCT检查后极部视网膜厚度变化情况。结果:至随访期末,BCVA提高>2行者128眼(81.5%),BCVA无变化16眼(10.2%),BCVA下降13眼(8.3%);葡萄膜炎及渗出性视网膜脱离完全或基本消退者149眼(94.9%);眼底荧光血管造影渗漏完全或基本消失者131眼(83.4%);OCT检查后极部视网膜厚度降低者134眼(85.4%),不变者14眼(8.9%),后极部视网膜厚度增加者9眼(5.7%)。结论:应用甲基强的松龙治疗葡萄膜炎疗效确切,可有效控制葡萄膜炎症,提高视功能。
- 万超柳力敏冯浩孙一洲才娜陈蕾
- 关键词：葡萄膜炎
- UBM指导下眼挫伤睫状体脱离缝合术的应用被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨超声生物显微镜(ultrasound biomicroscopic,UBM)指导下睫状体脱离缝合术的应用效果。方法:分析UBM指导下睫状体脱离缝合术治疗57例外伤性睫状体脱离的临床资料并评价其疗效。结果:睫状体脱离57眼缝合术后,53眼于术后眼压短暂增高后恢复正常;4眼经二次手术后眼压恢复正常。其中,术前UBM检查42眼发现房角漏,占74%。这部分患者,全部一次手术成功。15例未发现房角漏者,11例一次手术成功,4例二次手术成功。48例术后视力有不同程度提高。结论:UBM指导下睫状体缝合复位术是治疗眼挫伤后睫状体脱离的有效方法。
- 赵宁张瑞君冯浩张劲松任红刘畅
- 关键词：超声生物显微镜眼挫伤睫状体脱离手术
- GRIM-19在H_2O_2诱导的晶状体上皮细胞氧化应激中的表达
- 2014年
- 目的观察干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因19(GRIM-19)在不同浓度H2O2诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化应激中的表达变化。方法免疫荧光法检测GRIM-19在正常HLEC中的表达及定位;建立HLEC氧化损伤模型:分别用浓度为0、20、100、300、500和800μmol/L的H2O2处理HLEC 1 h后换液,继续孵育6、24 h;MTT法检测各浓度H2O2对HLEC的生长抑制作用;Western blot法检测6 h组HLEC中GRIM-19表达的变化。结果免疫荧光结果示:GRIM-19主要表达于HLEC细胞质中;MTT结果示:100~800μmol/L H2O2对HLEC有增殖抑制作用,且呈剂量依赖关系,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.01),20μmol/L组与空白对照组未见明显差异(P>0.05);Western blot结果显示:GRIM-19在各浓度组中相对表达量分别为1.466±0.018,1.509±0.038,1.599±0.014,1.709±0.058,1.813±0.010,1.583±0.021,实验组均显著高于空白对照组(P<0.05),正常对照组与空白对照组未见明显差异。结论正常HLEC中存在GRIM-19表达。在一定浓度H2O2诱导的氧化应激中,GRIM-19的表达显著增加。
- 刘加勇王思敏林婷婷冯浩宁宏
- 关键词：GRIM-19H2O2人晶状体上皮细胞氧化应激
