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刘洪娜: 作品数：25 被引量：32H指数：4; 供职机构：湖南工业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：生物学医药卫生理学农业科学更多>>

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一种实用的基于化学发光和磁性纳米颗粒的E.coli O157:H7免疫鉴定方法被引量：12: 2010年; 化学发光磁酶免疫已经被应用于检测病原体,但是由于针对相应病原体的抗体筛选和修饰等的步骤耗时费力,不适于对多种病原体进行筛查.制备了兔抗大肠杆菌(E.coli)O157:H7的免疫磁性纳米颗粒,富集病原菌后与鼠抗E.coli O157:H7的单克隆抗体形成双抗夹心,采用碱性磷酸酶标记的马抗鼠IgG与单抗结合,加入碱性磷酸酶的化学发光底物试剂3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3''-羟基)苯-1,2-二氧杂环丁烷磷酸检测化学发光.实验研究了底物缓冲液、碱性磷酸酶浓度对化学发光强度的影响,比较了NaBH4和甘氨酸对免疫磁珠剩余活性醛基的封闭效果以及本方法检测E.coli O157:H7的特异性和敏感性.结果表明,碱性磷酸酶与底物在c缓冲液中反应的化学发光强度最高,碱性磷酸酶浓度决定了化学发光的强度和持续时间,NaBH4对活性醛基的封闭效果优于甘氨酸,以D群宋内氏志贺氏菌、B群福氏志贺氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和霍乱弧菌及E.coli Top10f'为对照的比较实验显示,该检测方法具有良好的特异性,以1mL的菌液为检测体积时对E.coli O157:H7的检测灵敏度为103cell/mL,整个方法的检测时间约为3h.该方法适用于对多样本进行筛查.; 李智洋何磊何农跃史智扬汪华李松刘洪娜戴亚斌; 关键词：E.COLI O157:H7 化学发光磁性纳米颗粒

一种基于磁性纳米粒子PCR的高通量SNP分型方法被引量：9: 2007年; 利用磁性纳米粒子PCR扩增(MNPs-PCR)和等位基因特异性双色荧光探针(Cy3,Cy5)杂交,建立了一种单核苷酸多态性(SNP)分型的新方法.应用该方法对9个样本MTHFR基因的C677T多态进行检测,野生和突变型样本正错配信号比大于9·0,杂合型正错配信号比接近1·0,分型结果经测序验证.此方法无须产物纯化、浓缩,扫描分型结果快速、直观,是一种操作简单、快速、高通量、高灵敏度的分型方法.; 刘洪娜李松王志飞何农跃贺全国; 关键词：磁性纳米粒子 PCR SNP分型

基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交的单核苷酸多态性分型方法研究被引量：3: 2010年; 基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交,建立了单核苷酸多态性(Single nucleoitide polymorphism,SNP)分型方法。将利用不对称扩增得到的含有待检测位点生物素标记的单链PCR产物固定在链亲和素修饰的金磁纳米颗粒(Gold magnetic nanoparticles,GMNPs)表面;将ssDNA-GMNPs混合物点样在底部固定有磁铁的载玻片上构建磁性颗粒微阵列,然后在基因框中与双色荧光探针杂交;杂交完全后,充分洗涤,通过扫描获得分型结果。通过优化不对称PCR的扩增条件,直接扩增出产量较高的单链DNA作为靶序列用于分型。利用本方法对24个样本MTHFR基因的C677T位点多态性进行了检测。实验证明,本方法步骤简单,易实现自动化操作、非常适用于分子诊断与法医鉴定。; 刘洪娜李松刘丽赏田岚贾英英李智洋邓燕何农跃; 关键词：单核苷酸多态性

高通量检测生物大分子的磁性颗粒微阵列装置及其使用方法: 本发明公开了一种将磁性纳米颗粒、生物芯片与微流体技术相结合，所建立的一种磁性颗粒微阵列生物大分子检测平台。该种磁性颗粒微阵列应用磁性纳米颗粒作为生物大分子载体。通过在磁性颗粒表面固定DNA探针或者抗体，然后将磁性颗粒与待...; 李松刘洪娜何农跃李智洋; 文献传递

基于磁性纳米粒子PCR的高通量单核苷酸多态性分型方法: 单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)是人类基因序列中最常见的变异,对其研究有助于解释个体的表型差异、不同群体和个体对复杂疾病的易感性、以及对各种药物的耐受性和对环境因...; 刘洪娜; 关键词：磁性纳米粒子 PCR SNP分型; 文献传递

基于磁性纳米颗粒技术的高通量单核苷酸多态性分型方法研究: 李松何农跃刘洪娜王志飞邓燕; 单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs)是人类基因序列中最常见的变异，对其研究有助于解释个体的表型差异、不同群体和个体对复杂疾病的易感性、以及对各种药物的耐受性和对环境因...; 关键词：; 关键词：单核苷酸纳米材料自动检测系统

基于纳米技术的高通量自动化单碱基差异检测方法研究: 单核苷酸多态性(SNPs)是人类基因序列中最常见的变异，也是医学诊断或生物信息与疾病及药效关联的研究重点，对其研究有助于解释个体的表型差异、不同群体和个体对复杂疾病的易感性以及对各种药物的耐受性和对环境因子的反应等，对其...; 刘洪娜; 关键词：单核苷酸多态性; 文献传递

高通量检测生物大分子的磁性颗粒微阵列装置: 本实用新型公开了一种将磁性纳米颗粒、生物芯片与微流体技术相结合，所建立的一种磁性颗粒微阵列生物大分子检测平台。该种磁性颗粒微阵列应用磁性纳米颗粒作为生物大分子载体。通过在磁性颗粒表面固定DNA探针或者抗体，然后将磁性颗粒...; 李松刘洪娜何农跃李智洋; 文献传递

一种基于磁富集靶序列PCR的扩增方法及其灵敏度检测: 2012年; 以亲和素修饰的磁性纳米颗粒γ-Fe2O3为载体,提出了基于磁富集靶序列PCR扩增方法。首先将结合有生物素标记特异性引物的靶序列富集到亲和素修饰的γ-Fe2O3纳米颗粒表面,然后通过变性获取单链的靶序列,再进行PCR扩增。同时,优化了靶序列和特异性引物杂交的最适温度和磁性纳米颗粒γ-Fe2O3的最佳用量,并对该方法的灵敏度进行了检测。通过实验得出:该方法中,最适的杂交温度为53℃,磁性纳米颗粒的最佳用量为90μg,靶序列的最低检出浓度为5×10-10ng/mL。; 牟贤波刘洪娜李松刘丽赏; 关键词：Γ-FE2O3 杂交 PCR

一种基于磁性颗粒和通用连接子扩增技术的单核苷酸多态性分型方法: 2009年; 提出了一种应用磁性颗粒和通用连接子扩增技术(Linker-PCR)的多位点单核苷酸多态性(SNP)分型方法.该方法首先通过酶切将样本基因组DNA打断,然后将通用连接子通过T4DNA连接酶与各个酶切片段连接,利用生物素标记的通用引物将样本进行全基因组扩增.扩增后,将生物素标记的Linker-PCR扩增产物固定到亲合素修饰的磁性颗粒表面,通过与双色荧光标记的等位基因特异性探针杂交,对待测位点进行分型.利用该方法,我们对10个样本MTHFR基因上的2个SNP位点进行了分型,分型结果准确、正错配信号比大于3.由于利用Linker-PCR技术来实现对靶序列的全基因组扩增,该方法非常适用于大量样本的多基因多位点的SNP分型研究.; 刘洪娜李松刘丽赏田岚邓燕李智洋戴亚斌何农跃; 关键词：磁性颗粒 SNP分型

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