刘鑫 作品数:61 被引量:206 H指数:9 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 理学 更多>>
PMA诱导人中性粒细胞胞外诱捕网(NETS)形成的方法及其结构的研究 被引量:4 2016年 目的:建立佛波酯(PMA)诱导人中性粒细胞NETS形成的方法,并研究NETS的结构组成。方法:提取人中性粒细胞,使用10、30、90 n M的PMA分别刺激细胞2、3、4 h,采用核酸染料sytox green染色后,通过共聚焦显微镜检测和比较各组NETS的形成情况,并通过活性氧(ROS)探针对NETS进行荧光染色,对弹性蛋白酶(Elastase)、髓过氧化物酶(MPO)和组蛋白H3(Histone H3)进行免疫荧光染色。结果:PMA低于30 n M刺激细胞4 h都不会产生NETS,90 n M刺激3 h就会形成NETS,使用90 n M刺激中性粒细胞4 h后,其形成的NETS含量最高,显著高于30 n M刺激4 h及90 n M刺激3h(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示NETS结构上含有大量ROS和Elastase,含有少量MPO,几乎不含Histone H3。结论:90 n M PMA刺激中性粒细胞4 h可促进NETS形成,其含有大量ROS和Elastase。 祝元锋 陈晓丽 鲁永玲 范士郡 刘鑫关键词:佛波酯 大黄拮抗CpG DNA有效成分的分离制备及活性研究 2009年 目的:脓毒症是感染因素介导的全身炎症反应综合征,至今无有效的治疗手段。细菌Cp6DNA是引起脓毒症的主要病原分子。CpGDNA通过与TLR9结合,介导单核/巨噬细胞的活化,是介导脓毒症发生的重要途径。本研究以CpGDNA为靶点,从中药中定向分离具有拮抗CpGDNA和治疗脓毒症作用的活性物质。方法:(1)应用生物传感器技术、建立以CpGDNA为靶点的筛选抗炎中药的技术平台并对78种中药进行筛选;(2)利用生物传感器技术、硅胶柱层析、离子交换柱层析技术,从大黄中定向分离与CDGDNA具有较高结合活性的组分,并对得到的组分进行初步的活性评价,确定活性组分;(3)在体外实验中,测定活性组分与CpGDNA、lipidA的结合能力,观察活性组分对LPS、CpGDNA刺激小鼠RAW264.7细胞分泌炎症介质的抑制作用,在体内实验中,观察活性组分对致死剂量热灭活大肠杆菌攻击小鼠的保护作用。(4)利用反相HPLC技术对活性组分进行制备分离,获得活性单体化合物;(5)在体外实验中,检测单体化合物与CpGDNA和lipidA的结合能力.观察化合物对LPS、CpGDNA刺激小鼠RAW264.7细胞分泌炎症介质的抑制作用。结果:(1)建立了以CpGDNA为靶点应用生物传感器筛选抗炎中药的技术平台;从78种中药中筛选出大黄等14种中药与CpGDNA具有较高结合能力;(2)利用生物传感器技术、硅胶柱层析、离子交换柱层析等技术从大黄水提物中定向分离得到与CpGDNA有较高结合活性大黄D组分;(3)在体外,大黄D组分与CpGDNA、LipidA均具有较高的结合活性,对CpGDNA及LPS刺激小鼠RAW264.7细胞分泌TNF-α有显著的抑制活性,并呈现良好的量一效关系。在体内,大黄D组分对致死剂量的热灭活大肠杆菌攻击小鼠有显著的保护作用,并呈现良好的量-效关系;(4)通过反相HPLC从D组分中分离得到单体 刘鑫 郑江关键词:CPGDNA 活性物质 RAW264.7 心导管留置术后盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症动物模型的建立 被引量:18 2008年 目的采用留置心导管采血法检测盲肠穿孔术(CLP)后脓毒症模型大鼠血清学指标并观察肝肺组织病理学形态的变化,为用于治疗脓毒症药物的活性评价的动物模型的建立奠定了实验基础。方法采用改良的心导管留置术结合盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症大鼠模型,术前和术后2、6、12、24、48 h共6个时相点采血,动态浊度法鲎试验检测血浆内毒素(LPS)水平,ELISA法检测血浆TNF-α和IL-6值,全自动血细胞分析仪检测全血白细胞(WBC)及血小板(PLT)值,术后48 h观察大鼠肝、肠、肺的病理学形态改变。结果术后大鼠的血浆LPS、TNF-α、IL-6及全血WBC水平均于术后6 h后逐渐升高,12 h达到高峰,之后逐渐下降,于48 h达到正常水平;PLT水平6 h内无明显变化,随后逐渐下降,24 h达最低值,之后逐渐升高,于48 h接近正常水平;肝、肠、肺组织则呈现以肿胀、炎性细胞浸润为主的病理学改变。结论通过心导管留置术采血观察CLP模型大鼠血细胞和细胞因子、LPS的动态变化是一稳定可靠的实验方法。 王宁 周红 郭毅斌 刘鑫 曹红卫 郑江关键词:脓毒症 盲肠结扎穿孔术 一类多胺化合物及制备方法和用途 本发明涉及一类多胺化合物,其药物组合物及用于制备预防或治疗全身性炎症反应和自身免疫紊乱相关疾病药物的用途。此类化合物对介导全身性炎症反应和自身免疫紊乱相关疾病发生、发展的主要病原分子——内毒素和细菌基因组DNA具有拮抗作... 郑江 刘鑫 郑新川 周红 李彦 王宁 曹红卫 鲁永玲 赵苛岑血必净注射液对脓毒症模型大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究 刘鑫 王宁 鲁永玲 陈倩 祝元峰 范仕郡 郑江血清外泌体miRNA生物标志物及用于胃癌早期诊断的试剂盒 本发明涉及一种血清外泌体miRNA生物标志物及用于胃癌早期诊断的试剂盒,该血清外泌体miRNA生物标志物由miR‑19b和miR‑106a组成。本发明使用血清外泌体miRNA,特别是从与胃癌发生密切相关的两个miRNA(... 王宁 郑新川 汪莉娜 刘鑫文献传递 抗脓毒症新药苦柯胺B介导肝细胞清除LPS及缓解肝损伤的作用研究 刘鑫 王宁 郑新川 范仕郡 鲁永玲 郑江碘与人体健康 被引量:11 2004年 碘对健康有重要影响 ,碘缺乏病是全球普遍存在的地方病 ,已构成了严重的公共卫生问题。从碘的性质与存在、碘在医学上的应用、碘缺乏与过量产生的后果及原因以及碘预防方面进行综述。 李洋 刘鑫关键词:碘 小鼠肝脏细胞分离和原代培养技术研究进展 被引量:3 2015年 肝脏是机体主要的消化、代谢器官,同时也是重要的免疫器官;获得肝脏细胞[肝细胞(hepatocytes,HCs)、肝血窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)、肝星形细胞(hepatic stellate cells,HSCs)和枯否细胞(kupffer cells,KCs)等]并进行成功的原代培养,将有助于为研究肝脏的生物学特性(药物代谢、免疫及生理功能等)和“人工肝”工程等提供实验工具和材料;故探索和研究肝脏细胞的分离和原代培养技术具有重要意义。 杨东 刘鑫 郑新川 郑江关键词:肝细胞 细胞分离 原代培养 2’,5,6’,7-四羟基二氢黄酮醇用于制备治疗脓毒症的药物的用途 本发明涉及一种 2’,5,6’,7-四羟基二氢黄酮醇(2’,5,6’,7-tetrahydroxyflavanonol,THF)及其衍生物用于治疗脓毒症的用途。本发明从中药黄芩中提取与分离得到的二氢黄酮醇类化合物THF,... 郑江 伏建峰 周红 郑新川 刘鑫 曹红卫 王宁 鲁永玲文献传递