刘鑫
- 作品数：17 被引量：4H指数：2
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- 小鼠短散布核元件B1反义RNA的药代动力学分析
- 2023年
- 目的分析小鼠短散布核元件B1反义RNA(B1 antisense RNA,B1as RNA)静脉注射正常小鼠后,在小鼠血液及不同组织中的生物分布;以及转染培养的正常小鼠胚胎细胞后,细胞摄取B1as RNA的效率。方法取6只8~12周龄BALB/c小鼠,雌雄各3只,经尾静脉注射20μg B1as RNA,分别于注射后不同时间经眼眶静脉丛采血;取54只8~12周龄BALB/c小鼠,经尾静脉注射20μg B1as RNA,注射后不同时间分别安乐处死6只小鼠,雌雄各3只,解剖后取心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏和胸腺;将B1as RNA转染入培养的小鼠胚胎细胞,转染后不同时间取一定量的细胞,采用RT-q PCR法检测B1as RNA在小鼠血液及不同组织的生物分布以及胚胎培养细胞中B1as RNA的存留水平。将30只自然衰老的BALB/c小鼠(≥14月龄)分成3组:治疗组(经尾静脉注射20μg B1as RNA,每周1次)、无关RNA对照组(经尾静脉注射20μg Lac Z3F3R RNA,每周1次)和盐水对照组(注射相同体积的盐水),每组10只,另设年轻对照组(正常年轻的8~12周龄BALB/c小鼠,雌雄各5只),给药4周后,安乐处死各组小鼠,取肝脏组织,RT-q PCR法检测衰老相关基因(Sirt1、p21、p16INK4a、p15INK4b、p19Arf)的表达水平。结果尾静脉注射后,B1as RNA在小鼠血液中可存留约30 min,在大多数检测到的组织中可存留2~4 h,在肺中可存留约48 h;B1as RNA转染小鼠胚胎培养细胞后45 min,细胞摄取B1as RNA的效率约为每个细胞摄取400个B1as RNA分子。与盐水对照组比较,B1as RNA处理可显著下调p21、p16Ink4a、p15Ink4b、p19Arf基因m RNA的表达(t分别为10.01、4.461、4.420和5.309,P均<0.05),显著上调Sirt1基因mRNA的表达(t=4.579,P<0.05)。结论B1as RNA转染细胞可被细胞有效摄取。静脉注射小鼠后,B1as RNA可在血液和组织中停留一定时间,并调节衰老相关基因的表达,使其接近年轻正常小鼠的表达水平。
- 吴沛园王晓蝶刘鑫武崇光吉宁王秀芳吕占军
- 关键词：生物分布细胞摄取
- 一种外泌体在治疗肺纤维化药物中的应用
- 本发明涉及外泌体研发技术领域，尤其是一种外泌体在治疗肺纤维化药物中的应用，包括脐带间充质干细胞的制备及细胞培养液的收集、超速离心法提取外泌体、BLM诱导肺纤维化小鼠模型的建立以及实验分析；本发明中该外泌体在治疗肺纤维化药...
- 马隽崔慧先冯宝峰刘博鑫郭瑞云刘鑫杜晓峰张金玉周紫荆
- 神经干细胞联合脐带间充质干细胞在脊髓损伤中的应用
- 本发明将人诱导多能干细胞体外分化为NSC、人脐带分离培养为MSC辅以辅料，按照1:1的比例使用的，溶媒物用的是PBS，将获得的细胞生物产品联合原位移植到急性脊髓损伤(胸髓T10阶段)的小鼠脊髓，有效促进神经损伤修复、改善...
- 马隽崔慧先孔德胜杜晓峰何晶晶冯宝峰刘博鑫马振环刘鑫郭瑞云张金玉
- 无内毒素污染的基因工程鼠源SINE RNA的制备被引量：2
- 2020年
- 目的研究从大肠埃希菌宿主提取基因工程RNA同时去除内毒素的条件。方法将串联的小鼠短散布核元件(short interspersed nuclear elements,SINE)B1插入pET-28a(pET)构建pET-B1×16反序质粒(pET-B1as),转化大肠埃希菌BL21(DE3),获得pET-B1as-DE3菌。用TRlzol法、SDS-热酚法、SDS-NaCl离心法和SDS-NaCl过滤法从p ET-B1as-DE3菌制备基因工程RNA,Triton X-114相分离法进一步去除内毒素,检测制备的RNA中内毒素含量及RNA产量、纯度、完整性,并进行小鼠体内毒性试验和家兔热源试验。结果TRlzol法制备的RNA产量低;SDS-热酚法制备的RNA中内毒素含量高;SDS-NaCl过滤法去除内毒素的效果优于SDS-NaCl离心法,同时具有较高的RNA产量及较好的RNA完整性。小鼠静脉注射用SDS-热酚法和SDS-NaCl过滤法制备的RNA,前者引起小鼠不良反应,后者未引起小鼠不良反应。用Triton X-114相分离能进一步去除由SDS-NaCl过滤法制备的RNA中的内毒素,家兔热源试验证明SDS-NaCl过滤法联合Triton X-114相分离法制备的RNA,其热原符合动物体内试验要求。结论建立了用SDS-NaCl过滤法联合Triton X-114相分离法制备基因工程RNA的方法,可有效去除RNA中污染的内毒素。
- 杨爽爽曹洪益闫丽芳KHAN Murad吉宁刘鑫宋志学张东明王秀芳吕占军
- 关键词：反义RNA内毒素
- 小细胞肺癌肿瘤标志物差异表达与临床特征及预后的关系
- 目的：探讨血清胃泌素释放肽前体（proGRP）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）不同水平在小细胞肺癌（SmallCellLungCancer，SCLC）患者的临床特征方面的差异以及与患者预后的相关性。 方法：我们回顾性收...
- 刘鑫
- 关键词：小细胞肺癌肿瘤标志物预后
- 同时测定冠心静胶囊中16个活性成分含量的方法
- 本发明涉及一种同时测定冠心静胶囊中16个活性成分含量的方法，具体步骤如下：S1制备供试品溶液；S2制备得到一系列分别具有不同已知浓度的16个活性成分的混合对照品溶液；S3采用HPLC‑QTRAP‑MS/MS法，在确定的色...
- 王巧刘鑫蒋午峻张冠华律涛穆成林高艳华
- 文献传递
- 冠心静胶囊指纹图谱及体内代谢研究
- 目的：建立冠心静胶囊UHPLC指纹图谱分析方法;鉴定冠心静胶囊在大鼠体内的吸收组分及代谢产物。 方法：经样品前处理与检测条件考察，确定冠心静胶囊UHPLC指纹图谱分析方法：样品采用60%甲醇超声提取，色谱分离采用Phe...
- 刘鑫
- 关键词：指纹图谱代谢产物
- 文献传递
- 环状RNA hsa_circ_0072688通过调控NID1基因促进食管鳞状细胞癌进展作用机制的初步研究
- 第一部分食管鳞状细胞癌中环状RNAhsa_circ_0072688的表达及预后意义研究 目的： 探究环状RNAhsa_circ_0072688在食管鳞状细胞癌（EsophagealSquamousCellCarcin...
- 刘鑫
- 关键词：食管鳞状细胞癌生物学功能
- 人参皂苷对斑马鱼胚胎circRNA表达的影响及SINE元件对斑马鱼胚胎和HeLa细胞中EGFP表达的调控
- 本文主要从以下几个部分展开论述： 第一部分 人参皂苷对斑马鱼胚胎circRNA表达的影响 目的：人参皂苷是一种固醇类化合物，主要存在于人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中的活性成分，因为人参皂苷影响多重代谢通路，其作...
- 刘鑫
- 关键词：人参皂苷HELA细胞EGFP基因
- 北豆根总碱对Hela细胞抑制作用及其机制研究
- 目的：研究北豆根总碱对宫颈癌细胞Hela凋亡、细胞周期及侵袭性的影响，探讨北豆根总碱抗肿瘤作用机制，为抗肿瘤新药的研究和开发提供科学依据。
方法：
1.采用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度北豆根总碱（3...
- 刘鑫
- 关键词：北豆根总碱ERK信号通路肿瘤细胞凋亡肿瘤侵袭
- 文献传递
