吴玮玮
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 供职机构：北京世纪坛医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金苏州市科技计划项目(应用基础研究计划)更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三氧化二砷协同柔红霉素对K562/A02细胞株的作用被引量：1
- 2008年
- 目的:研究三氧化二砷(As2O3)及柔红霉素(DNR)联合应用后对人白血病耐药细胞株K562/A02的作用,探讨其应用于临床的可能性。方法:采用MTT比色法测定单用DNR及DNR与不同浓度As2O3合用时的生长抑制效果,用流式细胞术检测胞内DNR浓度及凋亡。结果:DNR对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50)为15.4 mg/L,加用0.25,0.5,1.0μmol/L As2O3时的IC50分别为1.73,0.78,1.42 mg/L。1 mg/L DNR作用于K562/A02 48 h后的凋亡率为(17.4±2.19)%,0.5μmol/L As2O3作用于K562/A02 48 h后的凋亡率为(53.8±5.6)%,而两药合用后凋亡率为(65.5±6.2)%,但合用后胞内DNR浓度并未增加。结论:低浓度的As2O3与DNR联合应用对K562/A02细胞的抑制为协同作用,其效应与增加药物的诱导凋亡作用有关,而非通过增加胞内DNR浓度。
- 王珂丁家华吴玮玮陈宝安顾炎袁鹏
- 关键词：药物疗法多药耐药三氧化二砷柔红霉素
- 慢性中性粒细胞白血病一例被引量：4
- 2015年
- 患者，女，65岁。主因“间断全身皮肤瘀斑2年余，加重伴乏力1个月余”就诊。患者近2年无明显诱因出现间断皮肤“瘀斑”，无其他特殊不适，瘀斑可自行缓解，未予诊治。近1个月皮肤瘀斑明显加重，伴乏力，不发热，无盗汗，无明显体重减轻，无骨关节肿痛，无腹胀腹痛，纳差，尿便如常。
- 吴玮玮吴学宾王轩周越李佳贾茹于阳
- 关键词：慢性中性粒细胞白血病皮肤瘀斑体重减轻腹胀腹痛乏力
- Mdr-1基因siRNA表达载体联合磁性纳米Fe_3O_4对转染率的影响
- 2010年
- 目的探讨磁性纳米Fe3O4颗粒(Fe3O4-MNPs)对Mdr-1基因siRNA表达载体转染白血病耐药细胞株K562/A02细胞转染效率的影响。方法构建靶向Mdr-1基因的PGCsilencer-U6-neo-GFPsiRNA表达载体(PGY1-1),分别与10、15、20μg/mlFe3O4-MNP置于37℃、5%CO2条件下共孵育,荧光显微镜下计数48h细胞的转染效率。结果 PGY1-1对K562/A02细胞转染率未见明显变化。结论 PGY1-1对K562/A02细胞的转染效率不能通过共孵育的方法得到提高。
- 程坚毛沛沛陈宝安高峰丁家华高冲张伟吴玮玮夏国华王雪梅许文林李小毛
- 关键词：转染效率
- 磁性纳米Fe_3O_4颗粒对藤黄酸诱导的U937细胞凋亡效应的影响(英文)被引量：5
- 2010年
- 本研究探讨联合应用藤黄酸(GA)和磁性纳米Fe3O4颗粒(MNP-Fe3O4)治疗白血病的潜在可能性。采用MTT法检测GA对U937的细胞毒作用及GA联合MNP-Fe3O4对U937细胞生长抑制的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;应用Wright及DAPI染色观察凋亡细胞的形态学变化;采用实时定量RT-PCR及Western blot法分别检测细胞的caspase-3、bcl-2、bax、NF-κB和survivin基因及相应蛋白的表达。结果表明:GA对U937细胞的生长抑制作用呈现时间及剂量依赖性;MNP-Fe3O4本身无细胞毒作用,但能使GA对U937细胞的生长抑制作用增强;联合应用GA和MNP-Fe3O4诱导的细胞凋亡率较单用GA明显增加,细胞呈现典型的凋亡形态改变,同时可见caspase-3及bax表达上调,而凋亡抑制基因如bcl-2、NF-κB和survivin表达下调。结论:MNP-Fe3O4能增强GA对U937细胞的凋亡诱导作用,两者联合应用可能是一种新型而安全有效的白血病治疗方法。
- 梁艺琼陈宝安吴玮玮高峰夏国华邵泽叶程坚丁家华高冲李国宏陈文姬陈宁娜许文林孙新臣刘莉洁李小毛王雪梅
- 关键词：藤黄酸细胞凋亡U937细胞
- 低氧诱导因子抑制剂对白血病细胞株HIF-1α和VEGF表达及诱导细胞凋亡作用的研究被引量：6
- 2010年
- 本研究探讨低氧诱导因子抑制剂3-(5′-hydroxymethyl-2′-furyl)-1-benzylindazole(YC-1)对人急性白血病病细胞低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)和血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的调节及诱导细胞凋亡作用。应用DAPI染色检查凋亡细胞的形态;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测K562、U937、Jurkat白血病细胞株hif-1α和vegf mRNA表达以及YC-1对U937细胞hif-1α、vegf mRNA表达影响;Western blot检测YC-1对U937细胞HIF-1α和VEGF蛋白表达,以及BAX、BCL-2、caspase-3蛋白变化,分析YC-1诱导U937细胞凋亡的可能机制。结果表明:在3种白血病细胞株均可见hif-1α和vegf mRNA表达。4μmol/L YC-1处理U937细胞(0、8、16和24小时)后,可见凋亡细胞出现的典型凋亡形态特征;流式细胞术检测的细胞0、8、16和24小时凋亡率分别为(4.87±0.70)%、(27.27±2.00)%、(51.53±2.81)%及(60.5±3.20)%;vegf mRNA表达下调,而hif-1αmRNA表达无明显变化;HIF-1α蛋白、VEGF蛋白和BCL-2蛋白表达下调,而BAX和caspase-3蛋白表达上调,BAX/BCL-2比率升高并呈时间依赖性(r=0.973,p<0.01)。结论:3种白血病细胞株均显示hif-1α和vegf mRNA表达,YC-1可以抑制白血病细胞HIF-1α蛋白表达,进而下调VEGF,并通过上调BAX/BCL-2比率、caspase-3蛋白表达诱导细胞凋亡。
- 王飞陈宝安程坚许文林王雪梅丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚鲍文宋慧慧高峰张伟夏国华裴孝平吴玮玮殷莉单学赟
- 关键词：白血病YC-1U937细胞
- 葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂PDMP对K562/A02细胞柔红霉素耐药逆转的研究被引量：4
- 2010年
- 本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)hydrochloride对K562/A02细胞株柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的逆转作用及其逆转机制。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度PDMP对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应及其对K562/A02细胞DNR耐药逆转作用;用流式细胞术检测PDMP对K562/A02细胞内DNR浓度及细胞凋亡率的影响;半定量RT-PCR和Western blot方法检测K562及K562/A02细胞mdr1、GCS基因的表达以及PDMP对K562/A02细胞两种基因表达的影响。结果表明:DNR对K562和K562/A02细胞的IC50分别为0.23±0.02和7.15±0.24μg/ml,当PDMP≤20μmol/L时,对K562及K562/A02细胞株无明显生长抑制作用;20μmol/L和10μmol/L PDMP均能增加K562/A02细胞对DNR的敏感性,其耐药逆转倍数分别为2.59和1.69;两种浓度PDMP作用于耐药株48小时后能增加细胞内DNR浓度(p<0.05)和细胞凋亡率(p<0.01)。20μmol/L PDMP处理K562/A02细胞48小时后可在mRNA和蛋白水平下调GCS和mdr1基因的表达(p<0.01)。结论:PDMP可以增强K562/A02细胞对DNR的敏感性,其机制可能与增加细胞内药物浓度及细胞凋亡率、下调GCS和mdr1基因表达有关。
- 殷莉陈宝安程坚丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚高峰宋慧慧鲍文吴玮玮王飞梁艺琼夏国华王雪梅
- 关键词：PDMPK562/A02细胞多药耐药
- 靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
- 2010年
- 本研究构建并鉴定靶向mdr-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。根据Genbank数据库提供的mRNA序列,选择设计3个能转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,体外分别合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经BamHI和HindⅢ双酶切线性化的pGCsilencer人U6启动子质粒载体中;为了确定利用酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,采用脂质体转染的方法将构建好的3个重组载体(pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3)导入慢性髓系白血病耐药细胞株K562/A02,采用实时PCR方法检测转染细胞的mdr-1基因表达,Western-blot检测P-gp表达量的变化。结果表明:应用PCR电泳图谱和测序证实了克隆RNAi打靶序列完全正确,而且该载体又同时表达GFP标记基因,用于测定转染效率。分别转染pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3后K562/A02细胞的mdr-1基因表达和P-gp表达水平下降,证明shRNA可以特异性沉默mdr-1基因。结论:靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体构建成功,为进一步研究mdr-1基因在K562/A02细胞中的作用奠定了实验基础。
- 毛沛沛陈宝安程坚高峰丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚鲍文宋慧慧张伟吴玮玮夏国华许文林王雪梅
- 关键词：MDR-1基因短发夹RNAK562/A02细胞
- 慢性中性粒细胞白血病的研究进展被引量：1
- 2016年
- 慢性中性粒细胞白血病（chronic neutrophilic leukemia,CNL）是一种非常罕见的骨髓增殖性肿瘤（myeloproliferative neoplasm,MPN）。由于此前对该病缺乏足够、统一的认识和切实有效的治疗措施,对其预后并不乐观。近年来,对本病的研究取得许多新的进展,深入了解这些进展,将有助于我们更加深刻地认识本病和指导临床实践。
- 吴学宾吴玮玮
- 关键词：慢性中性粒细胞白血病基因突变骨髓增殖性肿瘤
- 新型纳米纤维固相萃取柱制备及其用于组织样品中柔红霉素测定研究被引量：7
- 2011年
- 研制出一种新型纳米纤维固相萃取柱,并将其用于大鼠心、肝、脾、肺、肾组织及血浆中柔红霉素的净化、浓缩处理,建立了生物样品中柔红霉素的高效液相荧光检测法。以10%(V/V)HClO4为溶剂,对组织样进行匀浆和离心处理,上清液用纳米纤维小柱净化富集,以50 mL含1%(V/V)冰醋酸的甲醇洗脱,进样20 mL检测。流动相为甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶0.25,V/V,pH 5.5),流速为1.0 mL/min。在5种组织中,方法的定量线性范围为0.02～20 mg/g,在血浆中为0.01～1 mg/L。方法的回收率为82.7%～112.3%,日内RSD为2.0%～9.9%,日间RSD为5.2%～11.9%。本方法具有快速、灵敏等优点,可应用于动物的各组织样中柔红霉素检测。
- 曲子健康学军吴玮玮陈宝安顾忠泽
- 关键词：柔红霉素纳米纤维高效液相色谱
