- 异种骨移植时T淋巴细胞总数及亚群的变化被引量：16
- 1996年
- 以新鲜小牛松质骨（ＦＸ）、脱抗原处理的牛松质骨载体（ＢＣ）及不同复合比例的重组合异种骨（ＲＢＸ）植入Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股部肌袋内，正常小鼠模拟手术做为对照组。术后７、１４及２８天，取材做组织学检查，同时以间接免疫荧光法测定外周血及脾脏淋巴细胞中Ｔｈｙ１、Ｌ３Ｔ４、Ｌｙｔ２及Ｔａｃ阳性细胞百分数。结果示：脱抗原载体植入组与正常对照组无明显差异。ＦＸ组阳性淋巴细胞百分数均明显升高，以Ｔａｃ升高显著；组织学示局部免疫排斥而无骨诱导生成。ＲＢＸ植入组Ｔａｃ无增高，组织学见活跃的异位诱导成骨而无免疫排斥反应，但Ｔｈｙ１及Ｌｙｔ２细胞荧光染色阳性率增高，以Ｌｙｔ２增高明显，Ｔｈ／Ｔｓ比值下降或倒置，为ＲＢＸ中所含ＢＭＰ所致。这一现象可能与机体对异种ＢＭＰ及ＲＢＸ不引起明显免疫排斥有关。Ｔａｃ细胞阳性表达率对评价异种骨移植时免疫排斥反应有一定的意义。
- 桑宏勋胡蕴玉夏海滨夏海滨李雪冰杨光
- 关键词：骨移植移植免疫学T淋巴细胞
- 非洲爪蛙卵母细胞系统 TLSF_(JM)mRNA 体外翻译研究
- 1992年
- 应用酸性胍一步法从分泌 TLSF_(JM)的细胞系 JM 中提取总 RNA,进而纯化 mRNA,并应用微注射技术将纯化的 mRNA 注入非洲爪蛙卵母细胞中进行翻译表达。结果表明:非洲爪蛙卵母细胞能有效地翻译外源注入的 mRNA,翻译的 TLSF_(JM)产物主要滞留在卵母细胞内,仅有少量分泌到卵母细胞培养液中.TLSF_(JM) mRNA 体外翻译的成功为其 CDNA 文库的构建以及 TLSF_(JM)基因克隆和表达提供了重要的理论依据和实验基础.
- 夏海滨金伯泉李恩善许辉
- 关键词：RNA
- 9．1C3单克隆抗体轻、重链可变区基因克隆及序列分析被引量：3
- 1996年
- ９．１Ｃ３分子是一种参与ＮＫ、巨噬细胞及ＬＡＫ细胞杀伤过程的重要细胞表面分子，主要表达于外周血单个核细胞表面。本文运用分子生物学技术，从分泌９．１Ｃ３ＭＣＡｂ的杂交瘤细胞中提取总ＲＮＡ，经反转录、ＰＣＲ分另１１分离了９．１Ｃ３ＭｃＡｂ轻链可变区（ＶＬ）基因及重链可变区（ＶＨ）基因，并用全自动荧光ＤＮＡ序列分析仪对９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因序列进行了分析。结果表明：９．１Ｃ３ＶＨ基因为３５１ｂＰ，编码１１７ａａ残基，９．１３ＶＬ为３２４ｂＰ，编码１０８ａａ残基；从推导出的氨基酸序列分析证实９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ序列均符合小鼠ｌｇ可变区的氨基酸序列特征；根据Ｋａｂｂａｔ分类体系，９．１Ｃ３ＶＨ隶属Ｉｇ重链第Ⅱ（Ｃ）亚组，９．１Ｃ３ＶＬ隶属小鼠ＩｇＫ链第Ⅴ亚组。９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因的克隆成功为其单链抗体的构建、表达奠定了良好的物质基础。
- 夏海滨金伯泉田方张新海张建平
- 关键词：抗体单克隆可变区基因克隆
- T细胞活化机理研究的最新进展被引量：7
- 1992年
- T细胞活化过程及其机理的研究是细胞免疫学研究的热门课题。T 细胞活化是T细胞免疫应答早期的重要变化,T 细胞活化过程中的信号传递机理极为复杂。最近研究资料表明,T 细胞活化过程中信号传递除经典的磷脂酰肌醇代谢途径(Phosphatidylinositol metabolism pathway)外,还可通过酪氨酸激酶途径和T 细胞表面多分子参与的旁路途径,这些不同的信号传递途径相互之间存在着密切的关系。随着分子免疫学的发展,T 细胞活化过程中新的信号传递途径不断被发现。本文就T 细胞活化过程中的信号传递途径研究的最新进展作一综述。
- 夏海滨金伯泉
- 关键词：T细胞活化
- 全文增补中
- 细胞因子分子克隆方法的研究进展被引量：1
- 1995年
- 细胞因子是一种重要的免疫调节分子；随着分子生物学技术的迅猛发展，克隆某一新的细胞因子的手段也越来越多。本文就目前克隆新的细胞因子的不同方法加以综述，并分析其优缺点。
- 夏海滨金伯泉
- 关键词：细胞因子分子生物学免疫学克隆化
- 9.1C3胞内抗体基因的克隆及其对9.1C3分子表达的抑制作用
- 2001年
- 目的 获得 9 1C3胞内抗体基因的真核表达载体 ,观察胞内抗体对 9 1C3分子表达的抑制作用 ,为进一步研究 9 1C3分子对NK细胞功能的影响打下基础。方法 设计引物 ,以 9 1C3ScFv基因为模板进行PCR扩增 ,引入蛋白质内质网定位所需的信号肽、KDEL以及作为表达检测标记的E tag序列。回收纯化PCR产物 ,酶切后连接到pUC19载体上 ,并进行序列测定。序列正确后切下胞内抗体基因片段 ,重组到真核表达载体pRc/CMV中 ,酶切鉴定后用DEAE dextran方法瞬时转染真核细胞COS7,用胞内染色和Westernblot方法检测胞内抗体的表达。接着用Lipofectamine把胞内抗体基因转入 9 1C3阳性的Jurkat细胞 ,用FCM观察胞内抗体对 9 1C3分子表达的影响。结果 DNA序列测定证明 ,通过PCR成功地为 9 1C3ScFv引入了内质网定位所需的信号肽、KDEL及E tag序列 ,成功地构建了胞内抗体真核表达载体 ,通过胞内染色方法和Westernblot证明胞内抗体在COS7中得到表达。转入Jurkat细胞后发现胞内抗体能下调 9 1C3分子的表达水平。结论 以 9 1C3ScFv基因为模板PCR扩增得到 9 1C3胞内抗体基因 ,并构建了真核表达载体。
- 欧阳为明金伯泉夏海滨刘飞李德敏张建平
- 关键词：聚合酶链反应SCFV胞内抗体JURKAT细胞
- 9．1C3单克隆抗体可溶性单链抗体基因的表达及其初步鉴定
- 1996年
- 用噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ构建含９．１Ｃ３单链抗体基因片段的重组表达栽体，经ＩＰＴＧ诱导后可表达一分子量约为３０ｋＤａ的可溶性融合蛋白。体外生物学实验表明，诱导表达的９．１Ｃ３单链抗体，可阻断ＮＫ细胞对靶细胞Ｋ５６２的杀伤。此结果为临床应用９．１Ｃ３单链抗体治疗自身免疫性疾病和预防移植排异反应提供了基础。
- 夏海滨金伯泉马文煜田方
- 关键词：单链抗体NK细胞单克隆抗体基因
- 分泌抗rHuIL—3单克隆抗体杂交瘤的建株和初步鉴定
- 1995年
- 分泌抗ｒＨｕＩＬ—３单克隆抗体杂交瘤的建株和初步鉴定张新海，金伯泉，董邦权，孙凯，夏海滨，刘雪松（第四军医大学免疫学教研室，西安对ｈｏ３２）白细胞介素－３（ＩＬ—３）主要由活化Ｔ细胞或Ｔ细胞克隆产生．由于其可刺激多能干细胞和多种祖细胞的增殖与分化，又...
- 张新海金伯泉董邦权孙凯夏海滨刘雪松
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤建株
- TLSF_(JM)对T细胞IL-2R表达和蛋白酪氨酸磷酸化的调节作用被引量：6
- 1991年
- 应用免疫组化染色技术,研究了TLSF_(JM)对T细胞IL-2R表达和蛋白酪氨酸磷酸化的调节作用。结果表明:TLSF_(JM)对PHA或PA活化的人PBMC以及小鼠CTLL-2 IL-2R表达和蛋白酪氨酸磷酸化具有明显的抑制作用,但对在T淋巴细胞增殖、分化过程中起重要作用的细胞因子IL-1、IL-2和IL-6的产生无明显影响。
- 夏海滨金伯泉许辉赵宁刘雪松黄传书朱勇李恩善
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸化细胞
- TLSFjm生物学活性检测方法及产生最佳条件的选择
- 1993年
- 在建立三种简便、敏感的TLSFjm生物学活性检测方法的基础上,筛选出TLSFjm产生的最佳条件。结果表明,以细胞浓度1×10~6/ml,培养时间48h,TLSFjm产生活性最高,PHA和IL-1β对JM产生TLSFjm具有协同促进作用,A23187单独也可促进JM细胞产生TLSFjm,无血清RPMI1640培养条件产生的TLSFjm活性同10％NCS RPMI1640无明显差异,为纯化TLSFjm提供了实验依据。另外还发现1％BSA能很好保护TLSFjm活性,BSA还可保护TLSFjm,使之在冻融过程中避免活性丧失。TLSFjm活性在-20℃保存明显优于4℃。
- 夏海滨金伯泉李恩善许辉
- 关键词：血清增殖清蛋白
