季雅琦
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠道病毒71型抗原ELISA定量检测方法的建立及应用被引量：10
- 2016年
- 目的建立肠道病毒71型（EV71）抗原ELISA定量检测方法,用于EV71疫苗生产工艺中抗原定量检测。方法选取抗EV71单克隆抗体作为包被抗体,HRP标记抗EV71多克隆抗体作为酶标二抗,建立EV71抗原ELISA定量检测方法。该方法经系统验证后,应用于定量检测2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的抗原含量。结果验证结果显示,该方法的线性范围为3.125~50.000 U/m L,样品回收率为92.0%~110.0%,变异系数小于8.8%;孵育时间及温度在一定范围内偏差的样品回收率为100.8%~113.8%;检测其他肠道病毒中抗原其A值均小于cut-off值;试剂于37℃孵育3 d后的检测样品回收率为101.4%~112.4%;2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的适用性检测中,抗原回收率为92.1%~114.9%。结论建立并验证EV71抗原ELISA定量检测方法,其准确度、精密度、耐用性均优良,特异性强、稳定性好,适用于不同细胞基质的EV71疫苗及多价手足口病疫苗生产工艺过程的质量控制。
- 陈晓琦王继麟季雅琦郭长福杨明游磊叶程肖慧明平刚张海峰李月影王泽鋆李秀玲申硕
- 关键词：肠道病毒71型抗原酶联免疫吸附试验手足口病
- 我国近期分离的6株狂犬病病毒的糖蛋白基因序列分析
- 2013年
- 目的分析我国近期分离的6株代表性狂犬病病毒（rabiesvirus，RV）的糖（G）蛋白基因序列，了解RV街毒株与疫苗株在核苷酸和氨基酸序列水平的差异。方法对6个RV街毒株G基因进行逆转录和PCR扩增，经纯化、克隆、测序后获得6条G基因全长序列，采用生物信息学软件对G基因序列进行分析。结果6个街毒株的G蛋白在核苷酸水平的同源性为97．7％－100％，在氨基酸水平的同源性为97．9％－100％；与CTN－181疫苗株的核苷酸序列同源性最高，为86．7％－87．2％，氨基酸序列同源性为92．7％～93．1％。结论6个RV街毒株的G蛋白在核苷酸及氨基酸水平上均有变异，但与CTN．181疫苗株关系最近，表明CTN－181疫苗株可能为我国境内流行的狂犬病提供良好的预防作用。
- 黄思佳解庭波吴杰王月季雅琦严家新徐葛林
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白类基因型DNA
- 一例人狂犬病病例的病毒分离及鉴定
- 2014年
- 目的对2013年武汉市新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行病毒分离及鉴定。方法采用直接荧光抗体法(DFA)和ELISA法检测狂犬病病毒(rabies virus,RABV)抗原;提取病毒RNA,设计12对引物,分段扩增全基因组,克隆后测序,应用DNAStar软件包中的MegAlign模块对基因所编码的氨基酸进行对位分析;Clustal X 1.83软件和GENEDOC软件用于序列比对;MEGA 4.1软件以Kimura two-parameter模型邻位相连法(Neighbor-Joining,NJ)构建系统进化树(Bootstrap-l000),并与国内外疫苗株及近期湖北省及周边地区分离的代表性街毒株进行同源性分析。结果分离的街毒株13WH10的RABV抗原呈阳性;13WH10街毒株基因组全长11 924 bp,属基因Ⅰ型狂犬病病毒;13WH10与湖北省及周边街毒株处于同一亚群,与CTN-1疫苗株及东南亚地区的街毒株同源性较高,高于欧美国家疫苗株。结论成功对武汉市2013年新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行了病毒分离及鉴定;CTN-1与RABV国内分离株同源性较高,系统进化关系较近,提示采用CTN-1疫苗株生产的狂犬病疫苗可有效预防中国狂犬病的流行。
- 王月任亮吴杰周亦武郑新雄解庭波黄思佳刘良王荣帅屈国强明平刚翟珑山王泽鋆霍玉奇季雅琦徐葛林严家新
- 关键词：狂犬病病毒同源性分析
