张伟英 作品数:17 被引量:39 H指数:4 供职机构: 南开大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家基础科学人才培养基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
原核细胞基因表达调控与产物纯化综合实验设计与教学实践 被引量:1 2020年 为了提升分子生物学实验教学效果和教学质量,课程组设计了"原核细胞基因表达调控与产物纯化综合实验"。在设定条件下,利用科研常用技术手段对原核细胞目的基因在转录和翻译水平上进行检测,分析启动子利用效率和蛋白表达水平变化情况,并对靶蛋白进行纯化。结果表明,经过1 mmol/L IPTG诱导,原核细胞模式生物大肠杆菌在转录水平上启动子活性明显提高,翻译水平上可见目的蛋白表达量显著增加,并最终通过填料法亲和层析获得良好的蛋白纯化效果。实验通过科学严谨的实验方案以及合理灵活的教学设计,强化了学生对基因表达调控的理解与掌握,拓展了实验教学的广度与深度,进一步推动了分子生物学实验教学的改革和创新。 李欣 赵玉红 赵立青 李小菊 张伟英 石建党关键词:基因表达调控 产物纯化 教学实践 基于学科交叉的维生素C含量测定实验教学改革 被引量:3 2020年 对维生素C含量测定进行改革与创新,教学内容增加了不同温度、作用时间、酸碱度、抗氧化剂、金属离子及络合剂等对维生素C稳定性影响的考察,并建立起稳定准确、安全便捷的紫外分光光度法测定维生素C含量变化。改进后的实验通过科学的实验方案以及合理的教学设计,提高了学生学习兴趣和实验教学效率,培养了学生跨学科运用生物学手段分析解决专业问题的能力。 李欣 赵玉红 张钧 周浩 李登文 赵立青 石建党 李小菊 张伟英 张翠竹关键词:实验教学 维生素C 紫外分光光度法 花生四烯酸诱导肌球蛋白磷酸化被抑制的平滑肌细胞迁移的信号传导途径 2006年 在应用肌球蛋白轻链激酶特异抑制剂ML-7抑制了肌球蛋白轻链磷酸化后,花生四烯酸(arachidonicacid,AA)仍可诱导兔血管平滑肌细胞(SM3)发生迁移.为了进一步阐明其信号传导途径,应用多种信号抑制剂,采用免疫印迹、Boyden小室和提取细胞膜蛋白等实验方法,对上述迁移作用的信号传导途径进行了深入的研究.结果显示,PTX(Gi蛋白抑制剂)、U73122(PLC抑制剂)、staurosporine(PKC抑制剂)、PD98059(ERK1/2抑制剂)和SB203580(p38抑制剂)分别可拮抗上述AA诱导的SM3细胞迁移作用,而SP600125(JNK抑制剂)的作用较弱.免疫印迹结果显示,AA可提高SM3细胞中PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK信号的磷酸化水平,呈时间依赖性,PTX或U73122可抑制上述作用;staurosporine可抑制由AA引起的ERK1/2和JNK的磷酸化水平增强,但对p38的磷酸化水平无影响.还发现AA可促进PLCβ2的细胞膜移位,PTX可抑制其作用.上述结果表明,当肌球蛋白轻链的磷酸化被抑制后,AA可通过Gi蛋白的活化促进PLCβ2向细胞膜移位,进而通过激活PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK等信号转导途径而诱导SM3细胞发生迁移. 吴晶辉 叶婷婷 王洪辉 周晓雷 米达 吴莲英 王长晔 郭威 张伟英 张晓东 叶丽虹关键词:花生四烯酸 平滑肌细胞 细胞迁移 信号传导途径 乙肝病毒X蛋白结合蛋白在肿瘤发生发展中的作用 被引量:3 2019年 乙肝病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B X-interacting protein, HBXIP)最早因其能够与乙肝病毒X蛋白结合而被命名. HBXIP能够通过影响肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成、细胞凋亡、代谢和免疫逃逸等过程,参与癌基因表达调控及细胞内多种信号途径,在肿瘤的发生发展中扮演非常重要的角色.本课题组多年来围绕HBXIP在肿瘤中的作用和机制进行了大量研究工作.本文针对HBXIP在肿瘤发生发展中发挥的作用及其分子机制进行综述. 叶丽虹 张伟英 靳天志 王雪 付学丽关键词:肿瘤 代谢 免疫逃逸 蛋白质免疫印迹技术在本科实验教学中的应用 被引量:7 2020年 蛋白质免疫印迹技术是生命科学研究领域的常用技术手段,尝试将其改造成适于本科教学实践的实验内容,即在基础性分子生物学实验的基础上开设"免疫印迹法检测目的基因在原核细胞中的表达"这一综合性实验。根据学生的理论和操作水平以及本科实验教学特点,对实验内容和实验方法进行了优化,并采取研讨式分组教学模式,使学生能够深入、全面、系统地理解和掌握蛋白质免疫印迹技术,提高了实验教学质量,并有助于培养学生的科学思维、科学素养以及综合实践能力。 李欣 赵玉红 石建党 赵立青 李小菊 张伟英关键词:分子生物学 实验教学 肌球蛋白轻链激酶对平滑肌细胞功能的基因调控作用 叶丽虹 张晓东 郭威 赵铁军 张伟英 为阐明在培养的平滑肌活细胞内存在“肌球蛋白轻链非链磷酸化”调节途径,研究了花生四烯酸(AA)等因子在肌球蛋白轻链非磷酸化状态下对平滑肌细胞迁移的影响及其相关的信号途径。主要发现当预先用肌球蛋白轻链激酶(MLCK)特异性抑...关键词:关键词:肌球蛋白轻链激酶 平滑肌细胞 基因调控 加强实验室建设 提高分子生物学实验教学质量 被引量:9 2016年 实验教学是高校实践型创新人才培养的重要途径,而实验室又承担着实验教学的重任,因此,加强实验室建设是提升实验教学水平和高校人才培养的必然要求。生物化学与分子生物学实验室为提高分子生物学实验课程的教学质量,在实验室试剂耗材条件、设备资源配置和实验环境安全建设上进行了不懈探究和努力实践,在推进实验教学改革和建立安全实验环境等方面取得了良好的效果。 李欣 赵玉红 李小菊 张伟英 张金红 赵立青 张宝珠 石建党关键词:分子生物学实验 教学质量 N^(6)-甲基腺苷修饰(m^(6)A)在乳腺癌中的研究进展 2021年 乳腺癌是女性最常见的癌症之一,也是导致女性癌症死亡的最主要原因.尽管早期乳腺癌的治疗已经取得了极大进展,但晚期伴转移乳腺癌治疗效果较差,具有高复发率和高死亡率.因此,鉴定新的用于诊断和预测乳腺癌转移的分子标记、开发新的治疗策略成为迫切需要.近年来,mRNA的异常N^(^(6))-甲基腺苷修饰(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)对癌基因功能和表达水平的表观遗传学调控逐渐成为恶性乳腺癌研究的焦点.本文分析和总结了m^(6)A甲基化修饰及其调节蛋白参与调控乳腺癌发生发展的最新研究进展,以期为乳腺癌中m^(6)A甲基化修饰研究提供新的思路和参考,进一步为乳腺癌的诊断、治疗、预后及监测提供新的有效策略. 方润平 许飞飞 赵路萍 于露 蔡晓丽 杨哲 张伟英 叶丽虹 史慧关键词:表观遗传 乳腺癌 稳定转染乙肝病毒X基因(HBx)导致人L-O2肝细胞转化实验研究 目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的持续感染与肝癌的发生具有十分密切的关系,乙肝病毒X基因在肝癌的发生中起重要作用。然而,HBx的致癌作用机理目前仍不十分清楚。为了进一步阐明HBx与肝癌发病... 张伟英关键词:乙型肝炎病毒X基因 基因组不稳定性 稳定转染 文献传递 乙肝病毒X蛋白通过CREB上调HBx结合蛋白促进肝癌细胞迁移 被引量:3 2015年 乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)对肝癌的发生发展具有十分重要的作用.HBx具有促进肝癌迁移的作用,但其作用的分子机制不清.本研究对HBx促进肝癌细胞迁移的分子机制进行了探讨.伤口愈合和Boyden’s chamber结果表明,HBx可明显促进肝癌Hep G2细胞迁移.在稳定转染HBx的Hep G2(Hep G2-X)细胞中转染HBx结合蛋白(hepatitis B X-interacting protein,HBXIP)的RNA干扰片段,可明显抑制HBx的促迁移作用.免疫组化和实时定量PCR结果表明,HBXIP在肝癌组织中显著高表达,并且与HBx表达成正相关.荧光素酶报告基因和免疫印迹结果表明,HBx显著增强HBXIP的启动子活性和蛋白质表达水平.应用HBx的RNA干扰处理Hep G2-X细胞,HBXIP的启动子活性和蛋白质表达水平明显下降.将HBXIP启动子区的c AMP效应元件结合因子(CREB)结合位点突变后,HBx上调HBXIP的作用消失.应用CREB的RNA干扰处理肝癌细胞,在启动子水平和蛋白质水平上,HBx对HBXIP的上调作用被显著抑制.染色质免疫共沉淀结果表明,HBx能够通过CREB结合到HBXIP的启动子上,进而发挥激活HBXIP的功能.本研究结果表明,HBx促进肝癌细胞迁移的作用是通过CREB上调HBXIP实现的.这一发现对进一步揭示HBx促进肝癌细胞迁移的分子机制具有重要意义. 张伟英 张晓东 叶丽虹关键词:乙型肝炎病毒X蛋白