张彦明
- 作品数：4 被引量：37H指数：3
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- 树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养对白血病耐药细胞杀伤作用的实验研究被引量：6
- 2006年
- 目的探讨负载P-糖蛋白(P-gp)高表达的多药耐药(MDR)白血病K562/A02细胞冻融抗原的树突状细胞(DC)与同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养对MDRK562/A02杀伤作用的影响。方法提取健康人骨髓单个核细胞,常规诱导出DC及CIK,将K562/A02细胞冻融物作为抗原冲击的DC,与CIK共培养作为实验组,抗原不冲击的DC与CIK共培养作为对照组,以CIK及DC单独培养分别作为空白对照组1和空白对照组2。光镜下观察细胞形态,流式细胞术分析细胞表型,MTT法检测杀伤活性。结果实验组、对照组细胞增殖活性均大于CIK组(P<0.05)。实验组对K562/A02、K562的杀伤活性在效靶比5∶1、10∶1、20∶1时分别为(42.90±0.67)%、(49.85±0.28)%、(63.36±0.46)%和(23.56±0.43)%、(26.11±0.34)%、(34.46±0.35)%,均高于对照组及空白对照组1(P<0.05);实验组对K562/A02的杀伤活性高于K562和MCF7(P<0.05)。结论DC与CIK共培养物是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK的免疫活性细胞,而经冻融抗原冲击的DC与CIK共培养能明显提高对MDRK562/A02的杀伤活性。
- 岳玲玲张连生张玉芳柴晔张彦明曾鹏云吴重阳宋飞雪刘瑛
- 关键词：树突状细胞多药耐药P-糖蛋白
- 流感疫苗对急性髓系白血病患者骨髓细胞来源树突细胞功能的影响被引量：1
- 2006年
- 树突细胞（DC）因其强大的抗原呈递功能，具有激活针对肿瘤抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的作用，已成为白血病及肿瘤生物治疗的重要研究领域。白血病细胞来源的DC携带有自体已知或未知的多个肿瘤抗原，在HLA限制性和肿瘤特异性上具有独特的优势。将白血病DC作为疫苗回输体内以清除微量残留病（MRD）已显示出可喜的临床效果。但DC的抗原呈递功能依赖其成熟，应用有效佐剂组合对DC进行成熟调控从而增强其抗肿瘤效应是目前需要解决的重要问题之一。我们应用流感疫苗作为成熟诱导剂，观察对白血病细胞源性DC表面分子、细胞因子分泌及CTL效应等功能的影响，为DC培养寻找一种新的佐剂。
- 曾鹏云张连生柴晔张彦明刘瑛李莉娟
- 关键词：白血病患者流感疫苗细胞来源树突细胞急性髓系细胞毒性T淋巴细胞
- 多药耐药K562/A02和敏感K562细胞来源的树突状细胞介导抗白血病效应对比研究被引量：3
- 2005年
- 本研究探讨多药耐药(MDR)白血病K562/A02细胞和敏感K562细胞诱导树突状细胞(DC)分化及介导的抗白血病效应。采用慢性粒细胞白血病(CML)P170糖蛋白(Pgp)高表达的MDRK562/A02细胞、敏感K562细胞在含细胞因子GMCSF(1000U/ml)、IL4(500U/ml)和TNFα(100ng/ml)的RPMI1640完全培养液中诱导分化成DC,以光镜观察细胞形态、流式细胞术检测细胞表型,异基因混合淋巴细胞反应(alloMLR)检测T细胞增殖活性,MTT法测定细胞毒作用。结果表明:培养14天的K562/A02细胞和K562细胞均出现典型的DC形态特征,表达DC的相关分化抗原及共刺激分子CD1a、CD83、HLADR、CD80、CD86。alloMLR检测中,K562/A02DC较K562DC具有更强的刺激异基因T细胞增殖能力(P<0.05)。两种DC激活的CTL分别对K562/A02和K562细胞较HL60细胞具有显著的杀伤活性(P<0.01);更重要的是,K562/A02DC较K562DC激活的CTL对Pgp高表达的MDRK562/A02细胞、HL60/VCR细胞具有更强的细胞毒作用,杀伤活性分别为(40.7±1.3)%、(28.4±0.9)%(P<0.01)和(24.9±1.1)%、(8.2±0.7)%(P<0.01)。结论:Pgp高表达的MDR白血病细胞K562/A02和敏感K562细胞都可在GMCSF、IL4和TNFα作用下诱导分化为成熟DC,均可活化CTL产生特异的抗白血病效应;尤其K562/A02细胞来源的DC可介导针对Pgp高表达的多药耐药白血病的特异细胞毒作用。
- 张彦明张连生张玉芳易良才柴晔宋飞雪曾鹏云刘瑛
- 关键词：树突状细胞K562/A02细胞多药耐药抗白血病效应
- 树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养对多药耐药肿瘤细胞系的杀伤活性被引量：28
- 2007年
- 目的探讨在细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)表达特异性抗原的肿瘤细胞过程中,是否存在抗原特异性杀伤。方法分离健康人骨髓获得单个核细胞,分别诱导为树突状细胞(DC)和CIK细胞,将人类乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR细胞的冻融物抗原冲击或未冲击DC与CIK细胞共培养(pulsed-DC+CIK、DC+CIK),CIK细胞单独培养作对照。用流式细胞仪分析细胞表型,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-12、和IFN-γ分泌水平,用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法测定细胞毒效应。结果DC与CIK共育后,两组DC成熟表型较共育前明显提高(P=0.003、P=0.001);pulsed- DC+CIK组与DC+CIK组、CIK组比较,细胞表型(CD3、CD8、CD56)明显提高(P=0.003、P= 0.011),CD3+CD56+细胞明显增多(P=0.001,P<0.001),CD3+CD8+细胞亦明显增多(P=0.002, P=0.002);CD45RA表型则明显降低(P<0.001,P=0.004)。IL-12和IFN-γ水平在pulsed-DC+ CIK组表达最高,分别为(254±14.5)pg/ml和(3100±286)pg/ml。对有耐药抗原表达的MCF-7/ADR细胞,pulsed-DC+CIK组杀伤效应最强,pulsed-DC+CIK组、DC+CIK组和CIK组比较,差异均有统计学意义(pulsed-DC+CIK组与DC+CIK组比较,P=0.039;pulsed-DC+CIK组与CIK组比较,P= 0.002;DC+CIK组与CIK组比较,P=0.049);而对于无P-gp抗原表达的MCF-7细胞的杀伤效应,pulsed- DC+CIK组和DC+CIK组之间无明显差异,但均高于CIK组,差异有统计学意义(pulsed-DC+CIK组与CIK组比较,P=0.007;DC+CIK组与CIK组比较,P=0.048)。结论从人骨髓培养得到DC和CIK细胞共培养后,能促进各自特征性表面标志的表达上调,并分泌大量相关细胞因子。细胞杀伤效应的明显提高及可能的特异性细胞杀伤效应,为多药耐药肿瘤的临床生物免疫治疗提供实验基础。
- 李世俊张连生柴晔张玉芳张彦明曾鹏云吴重阳
- 关键词：树突状细胞杀伤细胞P-GP
