张文平
- 作品数:6 被引量:5H指数:1
- 供职机构:青岛农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 一种在EPG实验中观察叶片背面昆虫行为的装置
- 一种在EPG实验中观察叶片背面昆虫行为的装置,包括支架和设置在支架上的观察装置,所述观察装置包括镜筒和三个平面镜片,所述镜筒包括采光口和观察口,所述三个平面镜片设置在镜筒内的不同位置,通过三个平面镜片的相互配合使进入采光...
- 褚栋张文平陶云荔姜德锋郑晓敏李洪冉
- 文献传递
- 共生菌Cardinium对Q烟粉虱适合度与取食行为的影响
- 烟粉虱(Bemisia tabaci)(Gennadius)是一种世界性农业害虫。山东地区的田间的调查结果表明,Q烟粉虱的Cardinium的感染率一直处于较低的状态。已有研究表明, Cardinium的未感染品系(C-...
- 张文平
- 关键词:取食行为适合度共生菌
- 电穿孔法介导抗猪瘟病毒质粒DNA转染仔猪成纤维细胞研究
- 2013年
- 本研究旨在用电穿孔法介导抗猪瘟病毒基因质粒转染仔猪成纤维细胞,优化电穿孔法转染条件。采用本实验培养的P6代仔猪成纤维细胞,用电穿孔法介导转染抗猪瘟病毒质粒,在电压、脉冲时间、脉冲次数、质粒DNA用量、电击后温度、电击缓冲液、质粒DNA构型等方面进行了转染条件优化的探索。结果显示,当电压为220V、脉冲时间25ms、脉冲1次,环形DNA用量为12μg,电击缓冲液为限定电转液时,细胞转染率高达47.49%。这些结果表明,用电穿孔法介导抗猪瘟病毒基因质粒转染仔猪成纤维细胞,可获得比较理想的细胞转染率。
- 张文平周婧李方正宋学雄
- 关键词:电穿孔转染
- 猪骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性被引量:5
- 2013年
- 采集健康猪股骨骨髓,利用percoll梯度离心法分离单个核细胞,进行体外原代和传代培养,并用不同代数细胞进行了细胞生长能力、膜表面抗原(CD105、CD90、CD45)及诱导分化能力的检测。结果显示分离培养的单个核细胞贴壁生长,形态呈成纤维细胞样及涡旋状克隆团;细胞传代至第17代生长状况仍然良好;用F 3代细胞进行膜表面抗原标记显示,CD90和CD105阳性表达率分别为(97.4±1.8)%和(99.6±0.9)%,而CD45阳性表达率仅为(1.8±0.55)%,证实这些细胞具有猪骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem Cells,MSCs)表面抗原;经地塞米松、维生素C和β-磷酸甘油等诱导F 3代细胞,21d后出现钙物质沉积细胞群,用茜素红和Von kossa染色呈阳性,证实这些细胞已分化形成成骨细胞;经地塞米松、IBMX、胰岛素及吲哚美辛等诱导F 3代细胞,21d后细胞质出现脂滴样结构,用油红O染色呈阳性,证实已分化形成成脂细胞;冷冻-解冻细胞的膜表面抗原及多能分化能力与未冻存细胞的检测结果基本一致。结果证实,从猪骨髓中分离培养及经传代扩增获得的贴壁细胞是纯化的MSCs。
- 高健梁桂金朴英姬李方正张文平宋学雄
- 关键词:骨髓间充质干细胞诱导分化
- 脂质体介导抗乙脑病毒载体转染猪胎儿成纤维细胞条件的优化
- 2013年
- 本试验旨在探索脂质体Lipofectamine TM2000介导抗猪乙脑病毒(Anti-JEV)载体转染猪胎儿成纤维细胞(PFF)的最适条件,为构建Anti-JEV转基因胚胎提供供核细胞。从妊娠大白母猪获取10~15cm猪胎儿,采集背部皮肤用于组织块法培养分离PFF。结果显示,细胞培养至P7代,生长曲线正常;P5-7代细胞用于抗猪乙脑病毒载体转染,当质粒DNA量设定为0.35、0.7、1.05μg和1.4μg时,转染率分别为12.75%、36.82%、24.12%和8.85%;当脂质体量设定为0.7、1.4、2.1、2.8μL和3.5μL时,转染率分别为13.08%、21.71%、37.15%、24.21%和9.21%;当转染时间设定为2.5、4.5、6.5h和8.5h时,转染率分别为3.97%、38.48%、17.54%和12.47%。这些结果表明,2.1μL脂质体介导0.7μg质粒DNA转染4.5h转染效率最高。
- 唐元凤李方正张莉平周婧曲洪磊张文平宋学雄
- 关键词:脂质体转染
- 抗猪瘟病毒基因转染仔猪皮肤成纤维细胞研究
- 张文平
- 文献传递