张清真
- 作品数：10 被引量：27H指数：4
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 含粘膜佐剂的鸡新城疫疫苗诱导雏鸡非特异性免疫应答的研究被引量：1
- 2014年
- 为研究分析重组大肠杆菌不耐热肠毒素(labile enterotoxin,LT)作为粘膜佐剂,配伍鸡新城疫疫苗的冻干样品对免疫鸡非特异性免疫应答的影响,在前期已经构建的LTR72/G192基础上,选择2、4μg LTRG蛋白作为每羽份疫苗添加量,及降低新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)50%抗原量等配伍条件。按照生产条件制备冻干疫苗,进行雏鸡免疫试验,免疫后24、48、72 h采集脾脏、胸腺淋巴结,检测几种非特异性细胞因子表达水平。结果表明:IL-6、INF-γ水平在各疫苗免疫后24h即升高,48 h达最高值;添加2、4μg LTRG蛋白的NDV疫苗组IFN-β、TNF-α水平在48 h左右显著升高,其中含4μg LTRG疫苗组与其他组差异具有极显著统计学意义(P<0.01);IL-6、IFN-γ转录水平有所增强,但各组间差异不具有显著统计学意义(P>0.05),72 h左右几种细胞因子水平均迅速下降,与NDV疫苗接种组相近。由此可见,LTRG能辅助抗原诱导免疫雏鸡的非特异性免疫应答,有利于对感染病毒的清除。
- 殷秀辰哈卓李星张清真刘惠莉
- 关键词：新城疫病毒佐剂
- 壳聚糖对鹅生产性能与小肠形态结构的影响被引量：3
- 2011年
- 选用160只28日龄的豁眼鹅,随机分为4组(1个对照组和3个试验组,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮的基础上添加0.10%、0.20%和0.30%的壳聚糖),每组设4个重复,每个重复10只,进行为期28 d的饲养试验,测定鹅生长性能与小肠绒毛高度与隐窝深度。结果表明,与对照组相比,0.10%和0.20%壳聚糖组鹅的平均日增重分别提高了12.45%(P<0.05)和13.32%(P<0.05),料重比则分别降低了8.89%(P<0.05)和8.17%(P<0.05);十二指肠、空肠和回肠绒毛高度分别提高了35.20%(P<0.05)、30.90%(P<0.05)和29.57%(P<0.05),37.71%(P<0.05)、32.31%(P<0.05)和30.20%(P<0.05);隐窝深则分别降低了31.20%(P<0.05)、23.98%(P<0.05)和21.94%(P<0.05),33.89%(P<0.05)、22.24%(P<0.05)和21.05%(P<0.05)。
- 苗志国李国旺谢红兵徐辉张清真
- 关键词：壳聚糖小肠绒毛高度隐窝深度
- 壳聚糖微粒对生长鹅免疫机能的影响被引量：4
- 2012年
- 研究壳聚糖微粒对生长鹅免疫机能的影响,选用120只28日龄的扬州白鹅,随机分为4组(设对照组和0.10%,0.20%和0.30%的壳聚糖微粒添加组),每组30只鹅,饲养试验持续28 d.试验结果表明:在整个试验期间,壳聚糖微粒0.10%和0.20%组鹅血清IgG、IgM、IgA浓度均显著高于对照组和0.30%壳聚糖微粒组(P<0.05),但各试验组与对照组血清IL-1、IL-2和TNF-α浓度间无显著性差异(P>0.05).表明壳聚糖微粒(0.20%和0.30%添加量)对扬州白鹅的免疫机能有显著性影响.
- 乔波徐辉任利敏张清真郑盼盼苗志国
- 关键词：免疫机能
- 猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- 以乳化灭活的猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为抗原,免疫大白兔,制备兔抗PEDV高免血清,纯化抗PEDV IgG并进行生物素标记。以体外表达的PEDV S蛋白作为抗原,商品化的PEDV单克隆抗体作为捕获抗体,生物素标记的IgG作为检测抗体,建立了检测PEDV的生物素-亲和素系统的双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法最低检测限量为20 ng/μL,且稳定性和特异性较好。对25份临床猪腹泻样品进行检测,3份检出PEDV阳性,与RT-PCR法的符合率为100%。本研究为PEDV临床检测提供了新方法,也为猪腹泻病原的多重检测技术研究奠定了基础。
- 张清真陶洁殷秀辰熊年年李星刘惠莉
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 猪流感病毒分离株A/Swine/Shanghai/3/2014 (H1N1)分子特性研究
- 采用套式PCR检测方法,结合鸡胚分离鉴定,从20份临床有呼吸道症状的猪鼻咽拭子样品中分离到一株流感病毒.经亚型鉴定及全基因组序列分析,证实该分离株为H1N1亚型猪流感病毒,命名为A/Swine/Shanghai/3/20...
- 陶洁殷秀辰李星张清真熊年年常宏赏刘惠莉
- 关键词：猪流感病毒
- 河南省2株副猪嗜血杆菌基因组DNA ERIC-PCR指纹图谱分析被引量：1
- 2010年
- 从12例疑似副猪嗜血杆菌病患病猪的关节液和腹膜中分离2株革兰氏阴性细小杆菌,经PCR鉴定,确定分离的2株菌为副猪嗜血杆菌.根据肠杆菌基因间保守重复序列(EnterobacterialRepetitive Intergenic Consensus,ERIC),设计一对特异性引物,应用ERIC-PCR技术研究了副猪嗜血杆菌2个分离菌株的指纹图谱.结果表明,2个分离株的PCR指纹图谱基本一致,应为同一基因型;与已知15个标准血清型指纹图谱相比较可分辨出2分离株可能为血清5型.该研究可为副猪嗜血杆菌的流行病学调查及基因分子分型快速诊断方法提供基础.
- 余燕刘俊伟尚田田张清真
- 关键词：副猪嗜血杆菌基因分型指纹图谱ERIC-PCR
- 猪瘟疫苗冻干保护剂的筛选及免疫效果评价被引量：3
- 2016年
- 为了筛选耐热性能好、能提高猪瘟病毒(SFV)疫苗经口服途径免疫效果的冻干保护剂,配比不同组分的冻干保护剂与黏膜佐剂LTRG蛋白、SFV按比例混合,通过对冻干工艺的优化,制备了4种.SFV的冻干苗;口服免疫小鼠,测定血清IgG和粘膜IgA抗体效价。结果表明:试验2组即甘氨酸+明胶组和试验4组即明胶组的外观形态较好,水溶后呈现澄清的状态;试验2组和试验4组的冻干苗经口服免疫,诱导小鼠产生的IgG抗体水平显著高于SFV组、SFV+LT组及其他试验组(P<0.01)。二免7 d试验2组小鼠肛试子IgA抗体显著高于其他组(P<0.01),且小鼠脾脏IFN-γ和IL-4细胞因子的表达量也极显著高于其他组(P<0.01)。研究初步筛选出第2组配方,即以甘氨酸和明胶配伍作为猪瘟口服疫苗冻干保护剂,为研制口服途径免疫的猪瘟疫苗奠定了基础。
- 李星陶洁殷秀辰张清真熊年年刘惠莉
- 关键词：猪瘟疫苗冻干保护剂口服免疫
- 猪流感病毒分离株A/swine/Shanghai/3/2014(H1N1)分子特性研究被引量：5
- 2016年
- 采用套式PCR检测方法,结合鸡胚分离鉴定,从20份患呼吸道疾病猪的鼻咽拭子样品中分离到1株流感病毒。经亚型鉴定及全基因组序列分析,证实该分离株为H1N1流感病毒,命名为A/swine/Shanghai/3/2014（H1N1）。遗传进化分析表明该分离株与类禽猪流感病毒（Avian-Like H1N1）相似性最高。蛋白序列分析发现,该分离株具有低致病性流感病毒特征,即其HA蛋白的裂解位点为PSIQSR↓GLFGAI。此外,该基因中有7个潜在的糖基化位点,受体结合位点为108（Y）、148~152（GVTAA）、167（W）、197（H）、204~212（DQQ SLYQNA）和238~243（RDQEGR）;其中225~228EQAG显示该分离株具有结合SAα2,6Gal受体的能力,证明该分离株具有感染哺乳动物的能力。同时PB2蛋白的627E、701N及NS蛋白的92D位点均证明了该分离株的低致病性和感染哺乳动物的能力。
- 陶洁殷秀辰李星张清真熊年年常宏赏刘惠莉
- 关键词：猪流感病毒
- 大肠杆菌热敏性肠毒素LTRG增强猪瘟病毒E2蛋白口服免疫效果研究
- 引言大肠杆菌热敏性肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT)具有良好的黏膜佐剂功能,与抗原联合免疫,能诱导机体产生局部黏膜免疫和系统免疫应答。前期采用突变技术获得重组突变体蛋白LTRG,并证实具有良好...
- 殷秀辰张磊峰陶洁李星张清真刘惠莉
- 猪四种病毒性腹泻病原多重PCR检测方法的建立及应用被引量：7
- 2016年
- 分别以猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因、猪轮状病毒(Po RV)VP6基因、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因、猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Npro基因为靶基因,参照Gen Bank上登录的基因序列,利用DNAStar和Oligo7软件设计了4对引物。采用PCR分别扩增各病毒基因,并克隆至p MD18-T载体,获得4个阳性重组质粒。以重组质粒为模板,进行多重PCR方法的优化。特异性试验检测可分别扩增出相应的病毒基因片段;敏感性试验结果显示,检测PEDV、TGEV、Po RV及BVDV质粒的最低拷贝数分别为730copies/L、547 copies/L、6.47×103copies/L、705 copies/L。应用该方法对猪场44份猪腹泻样品进行检测,结果检出15份PEDV样品,3份TGEV样品,2份BVDV样品,其中PEDV与TGEV混合感染样品2份,TGEV与BVDV混合感染样品1份。随机抽取其中2份PEDV阳性样品进行病毒分离,病毒经细胞传3代以上PCR检测均为阳性,对PCR产物测序证实为PEDV。结果表明,本研究建立的多重PCR方法具有快速、简便、特异性强、敏感度高的特点,能够对PEDV、Po RV、TGEV和BVDV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
- 熊年年陶洁张清真张春玲李本强常宏赏刘惠莉
- 关键词：PEDVTGEVRVBVDV
