张红云
- 作品数：13 被引量：54H指数：6
- 供职机构：深圳大学生命科学学院过敏反应与免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 荔枝果实中泛变应原profilin基因的克隆及序列分析被引量：10
- 2006年
- 目的克隆荔枝果实中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin)同源基因。方法采用生物信息学方法对多个植物泛变应原基因进行序列同源性比对,根据序列保守区域设计并合成简并性引物,通过RT-PCR和3'-RACE技术克隆荔枝果实中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。结果获得了一个全长的新基因(689bp)。该基因开放阅读框为396个碱基,编码131个氨基酸残基,经分析该蛋白等电点为4.98,分子量约为14060。此序列已被GenBank收录,登陆号为DQ309464。序列分析结果显示所克隆到的基因与许多水果和花粉的泛变应原profilin基因有很高的同源性(与桦树和橡胶花粉泛变应原profilin的同源性分别为80%和84%,与桃子profilin的同源性为85%),因此认定其为泛变应原基因。结论从荔枝果实中成功地克隆出了一个泛变应原基因,为进一步的蛋白表达奠定了基础。
- 张红云宋娟娟刘志刚康敏雄
- 关键词：荔枝PROFILIN基因克隆
- 一种检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原基因的方法
- 本发明涉及一种检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原基因的方法。过敏性疾病是由于各种接触或吸入变应原引起的，其中，尘螨引起的变态反应疾病占70％左右。引起变态反应疾病的尘螨主要包括户尘螨和粉尘螨。经过调查发现空调过滤网也是它们嗜...
- 刘志刚刑苗喻海琼吉坤美高波张红云洪旭肖勇
- 文献传递
- 王棕花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的克隆并表达王棕花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin）。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆王棕花粉中泛变应原profilin的全长基因，并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物，采用RT-PCR获得整个王棕花粉profilin的开放阅读框，将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，通过Ni2^＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化，采用Western blot检测其IgE结合活性。结果克隆获得了王棕花粉profilin的全长基因，由675个碱基组成，开放阅读框为396个碱基（包括终止密码子），编码131个氨基酸。经分析，这个序列编码的蛋白为小分子质量酸性蛋白，等电点为4．86，相对分子质量（Mr）约为14．2×10^3。此序列已被GenBank收录，登录号为EF173599。重组王棕花粉profilin在大肠杆菌中高效表达，进一步经Ni^2＋亲和层析柱纯化后经Western blot检测具有良好的免疫学活性。结论成功克隆和表达了王棕花粉profilin，为王棕过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。
- 姚敏孟光刘志刚邬玉兰张红云
- 关键词：基因表达纯化
- 芒果过敏原的鉴定、克隆表达及与荔枝过敏原的交叉反应研究
- 变态反应疾病长期以来一直是医学界的一大难题，世界各国变态反应疾病的总发病率达10％-30％，而且，随着人类生活方式和饮食习惯的变化以及因健康因素水果和蔬菜消费的增加，对植物性食物的过敏反应在过去的十年里迅速增加。
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- 张红云
- 关键词：芒果过敏反应基因克隆表达变态反应
- 文献传递
- 一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法
- 本发明涉及一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法。通过人工合成人脑利钠肽BNP活性部位32个氨基酸编码区相对应的基因与经突变改造的CMP－3－脱氧－D－甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中间含肠激酶识别切割位点，该融...
- 刘志刚吉坤美喻海琼高波张红云
- 文献传递
- 大豆泛变应原profilin基因的克隆、序列分析和表位预测被引量：3
- 2007年
- 通过生物信息学方法对多种植物性食物和花粉泛变应原proflin基因进行比对,利用其中的高度保守区域设计并合成简并引物,通过RT-PCR克隆得到一个新的大豆profilin基因(396bp,pI为5.21,MW为14,1kD),序列同源性分析发现该基因和已知的多种植物性食物、花粉变应原profilin有较高的同源性(>75%),因此认为其系大豆蛋白泛变应原profilin,命名为Gly m3.02,EMBL/GeneBank数据库登录号为DQ784852,这为进一步重组表达和抗原表位分析等奠定了实验基础。
- 吴凯威余晓刘志刚宋娟娟张红云
- 关键词：大豆PROFILIN基因克隆
- 芒果果实中泛变应原profilin的克隆、表达及免疫学活性鉴定被引量：8
- 2007年
- 目的 克隆并表达芒果果实中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin）并了解其免疫学活性。方法 利用RT-PCR结合RACE技术克隆芒果果实中泛变应原profilin的全长基因，并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物，采用RT-PCR获得整个芒果profilin的开放阅读框，将其与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Escherichia coli B121（DE3）进行诱导表达，通过Ni^2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化，采用Western blot检测其IgE结合活性。结果 克隆获得了芒果profilin的2个型。每个型的cDNA都包括一个编码131个氨基酸的开放阅读框。序列分析结果显示所克隆到的基因与许多水果和花粉的泛变应原profilin基因有很高的同源性（〉70％）。根据变应原的命名规则，将它们分别命名为Mani3．01和Mani3．02，并将这两个基因提交到GenBank数据库中，其登录号分别为DQ270547和DQ400579。重组芒果profilin在大肠杆菌中高效的表达，进一步经Ni^2＋亲和层析柱纯化后经Western blot检测具有良好的免疫学活性。结论成功地克隆和表达了芒果profilin，并证明与芒果过敏者血清有特异IgE应答。
- 张红云宋娟娟刘志刚康敏雄
- 关键词：芒果基因克隆
- 椰子花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆并表达椰子花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(Profilin)。方法:利用RT-PCR结合RACE技术克隆椰子花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个椰子花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性。结果:克隆获得了椰子花粉profilin的全长基因,由608个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。经分析,这个序列编码的蛋白为小分子量酸性蛋白,等电点为4.61,分子量约为14 kD。此序列已被GeneBank收录,登陆号为EF173598。重组椰子花粉profilin在大肠杆菌中高效的表达和纯化后,经Western blot检测具有良好的免疫学活性。结论:成功地克隆和表达了椰子花粉profilin,为该花粉profilin用于椰子花粉过敏诊断和免疫治疗提供了理论依据。
- 孟光姚敏刘志刚邬玉兰张红云
- 关键词：PROFILIN基因表达纯化
- 短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：9
- 2007年
- 目的克隆并表达短穗鱼尾葵花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin)。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆短穗鱼尾葵花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个短穗鱼尾葵花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性。结果克隆获得了短穗鱼尾葵花粉profilin的全长基因,由608个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。该序列编码的蛋白为小分子量酸性蛋白,等电点为4.52,相对分子质量约为14200。此序列已被GenBank收录,登陆号为EF173600。重组短穗鱼尾葵花粉profilin在大肠杆菌中高效的表达,进一步经Ni2+亲和层析柱纯化后经Western-blot检测具有良好的免疫学活性。结论成功地克隆和表达了短穗鱼尾葵花粉profilin,为短穗鱼尾葵花粉过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。
- 刘晓宇邬玉兰刘志刚孟光张红云
- 关键词：PROFILIN基因表达纯化
- 樟树花粉泛变应原基因的克隆与序列分析被引量：12
- 2006年
- 目的从樟树花粉中克隆泛变应原基因。方法通过对多个植物泛变应原基因进行序列同源性比对,根据保守区域序列设计简并性引物,利用RT-PCR结合RACE技术对樟树花粉中的泛变应原基因进行克隆。结果从樟树花粉中克隆到一个新的基因。序列分析显示:所克隆到的基因与其它植物的泛变应原肌动蛋白结合蛋白基因有很高的同源性,因此认为该基因为泛致敏原基因,命名为Cinc1。其在GenBank数据库中的登录号为DQ335252。结论采用简并引物从樟树花粉中克隆到一泛变应原基因,为进一步研究该变应原奠定了理论基础。
- 宋娟娟张红云刘志刚康敏雄
- 关键词：基因克隆
