张贺楠
- 作品数：23 被引量：75H指数：6
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- H5亚型禽流感病毒多肽疫苗的初步研制被引量：1
- 2008年
- 本试验利用生物软件对H5亚型禽流感病毒A/CK/GD/178/04的血凝素进行抗原特性分析,结合关于禽流感病毒血凝素抗原位点的文献报道,选定97～212位氨基酸和369～529位氨基酸两个区域作为多肽表位候选区域。利用本实验室自主研发的原核表达载体pBT载体,串联表达HA的两个区域,经SDS-PAGE和Western Blotting分析,证明重组产物得到表达,Ni2+柱纯化重组蛋白后,对2周龄SPF鸡进行免疫,经HI试验检测该重组蛋白可以刺激机体产生HI抗体。本研究为H5亚型AIV多肽疫苗的进一步研制奠定了基础。
- 柯艳坤齐岩叶贺佳张贺楠陈晓春李小康袁润余亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H5亚型HA多肽疫苗
- 血管瘤病变型J亚群禽白血病CHN株感染性克隆的构建
- 张贺楠赖汉漳梁雁萍张小桃曹伟胜廖明
- H9N2亚型禽流感病毒广东分离株的全基因克隆及序列分析
- 本研究以一株2006年广东省分离的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangdong/HL/2006 (H9N2)(简称Ck/GD/HL/06)为研究对象,用RT-PCR法扩增病毒基因组各片段,将各扩增片段分别...
- 齐岩袁润余张贺楠谢杰单芬胡月李小康陈晓春赵丽荣廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2
- 文献传递
- 血管瘤病变型J亚群禽白血病CHN株感染性克隆的构建
- 禽白血病病毒(ALV)属于禽C型反转录病毒属。传统的禽白血病主要是由外源性A亚群和B亚群ALV引起,C和D亚群很少引起自然发病。1989年,Payne首次从肉鸡群中分离出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)后,该亚群病毒在世...
- 张贺楠赖汉漳梁雁萍张小桃曹伟胜廖明
- 文献传递
- H9N2亚型禽流感病毒广东分离株的全基因克隆及序列分析被引量：6
- 2010年
- 本研究以一株2006年广东省分离的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangdong/HL/2006(H9N2)(简称Ck/GD/HL/06)为研究对象,用RT-PCR法扩增病毒基因组各片段(包括5′端和3′端的非编码区序列),将扩增片段进行克隆、测序并与参考毒株的相应序列进行比较分析,绘制各基因片段的系统发生树。分析结果表明,Ck/GD/HL/06株的HA基因同1997年中国香港鸭源毒株Dk/HK/Y280/97(H9N2)在同一进化分支,从HA的糖基化位点、受体结合位点等综合分析,该毒株HA基因未发生明显的变异,符合我国大陆H9亚型禽流感病毒的特点。HA的226位氨基酸残基为亮氨酸(Leu),具有同哺乳动物SAα,2-6受体结合的特性。Ck/GD/HL/06的PB1、PA和NP基因,同2004年越南分离的人源高致病性H5N1亚型流感病毒A/VietNam/1203/2004(H5N1)株(简写A/VN/1203/04)的核苷酸序列一致性分别是93.8%、95%和96.8%,在先前的研究中未见有类似特性毒株的报道,而这种特性H9N2亚型AIV的出现,是否会增加在重组过程中产生新的高致病性H5N1亚型AIV的可能性,是值得我们关注的一个问题,也提醒在我国华南地区应更加重视防控H9N2亚型AIV,做好长期对H9N2亚型AIV监控及分子流行病学调查的工作。
- 齐岩袁润余张贺楠亓文宝单芬胡玥李小康焦培荣廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型全基因
- 一种血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因及其感染性克隆的构建
- 本发明公开一种血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因及其感染性克隆的构建。本发明J亚群禽白血病病毒全长基因组序列如SEQ IDNO：1所示，然后采用特异性引物对SEQ ID NO：1所示血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因进行...
- 廖明张贺楠赖汉漳曹伟胜罗开健徐成刚辛朝安
- 文献传递
- 不同病变型J亚群禽白血病病毒LTR启动子序列分析及活性比较被引量：7
- 2010年
- 从ALV-J中国地方分离株SCAU-HN06株（血管瘤病变型）、NX0101株和JS-nt株（骨髓瘤病变型）病毒的细胞培养物提取前病毒DNA,通过PCR扩增各毒株的LTR并克隆,随后进行测序分析。与国内外ALV-J参考毒株LTR序列比较发现：国内地方分离株与英国ALV-J原型株HPRS-103和美国ALV-J原型株ADOL-7501的LTR核苷酸序列相似性为88.0%~97.2%;LTR中的U5区及R区具有较高的保守性,而U3区内存在较大差异。将不同病变型ALV-J的LTR片段分别插入pCAT-basic载体CAT报告基因5＇端。用所得的重组报告基因表达质粒转染DF-1细胞,48h后通过测定转染细胞中的CAT表达量来评价LTR启动子的活性。结果表明,SCAU-HN06株与骨髓瘤病变型ALV-J（JS-nt株,NX0101株）LTR启动子活性差异不显著。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘红波曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒长末端重复序列启动子活性
- 血管瘤相关J亚群禽白血病病毒ZH-08株的分离与全基因组序列测定被引量：11
- 2010年
- 本研究从临床表现为典型血管瘤型禽白血病病例的广东某肉种鸡场的病鸡中,分离到1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为ZH-08。利用ELISA抗原检测、PCR和间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定,结果都呈阳性。依据ALV-J原型株HPRS-103前病毒全基因组序列设计并合成3对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示该分离株基因组序列全长7 597 bp,与已公开的全基因组序列大小比较略有差异,但符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因。将该分离株的亚群特异性gp85基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较,发现ZH-08与YZ9901株相似性最高(93.7%)。基于gp85核苷酸序列的系统进化分析表明:ZH-08株与SD07LK1株的亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性以及致病机制研究奠定了基础。
- 张小桃史伟伟刘红波张贺楠廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：血管瘤J亚群禽白血病病毒全基因组序列
- 鸡IFN-α,-β,-γ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
- 根据GenBank上鸡α-、β-、γ-干扰素(ChIFN-α,-β,-γ)基因的序列,在保守区设计并合成各自特异引物,并以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)为内参,采用SYBR GreenI染料建立实时荧光定量PCR(R...
- 张贺楠赖汉漳齐岩孔留五张小桃曹伟胜廖明
- 关键词：Γ干扰素荧光定量特异引物
- 鸡IFN-α和IFN-β及IFN-γ基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：18
- 2009年
- 根据GenBank上鸡α-、β-、γ-干扰素（ChIFNα-、β-、γ-）基因的序列，在保守区设计并合成各自特异引物，并以鸡3-磷酸甘油脱氢酶（GAPDH）基因为内参，采用SYBRGreen工染料以建立实时荧光定量PCR检测方法。将IFNα-、β-、γ-基因克隆至pGEM-T载体上，以各阳性质粒作为标准品，构建标准曲线，并进行了熔解曲线分析。结果表明，鸡IFNα-、β-、γ-和GAPDH基因的C1值与标准品稀释度在1×10^2～1×10^8 copies／μL范围分别呈良好的线性关系，r^2均大于0．990。熔解曲线分析表明，产物为特异的单峰，检测周期从RNA提取到荧光定量PCR结束只需4h。建立的鸡IFNα-、β-、γ-基N实时荧光定量PCR灵敏度高、特异性强、检测周期短，为在mRNA水平对鸡IFN的定量分析奠定了基础。
- 张贺楠赖汉漳齐岩孔留五张小桃曹伟胜廖明
- 关键词：Α-干扰素Β-干扰素
