曾瑞霞
- 作品数：37 被引量：157H指数：7
- 供职机构：辽宁医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅基金辽宁省科技厅博士启动基金辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 密度梯度离心法结合贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞被引量：7
- 2012年
- 目的 研究密度梯度离心法结合贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)及不同首次换液时间对细胞增殖的影响,探索一种简单易行、扩增效率高的方法。方法 3月龄雄性SD大鼠提取原代BMSCs,密度梯度离心法结合贴壁法分离培养,并应用3组不同首次半量换液时间(24h,48h,72h)进行培养传代,测定生长曲线和细胞的存活率;免疫细胞化学染色分析细胞表面抗原CD44和CD166的表达。结果 分离的BMSCs48h后细胞完全贴壁生长,呈形态均一的纺锤形单核细胞状,第3代细胞培养1w后呈长梭型,呈平行排列生长。48h半量换液组细胞增殖活性及生存率最高,其次为24h和72h组;表面标志物CD44和CD166均呈阳性。结论 联合应用密度梯度离心法及贴壁筛选法可成功分离BMSCs,且效率高、纯度高,48h首次半量换液更适合BMSCs的生长繁殖。
- 曾瑞霞单伟房艳刘学
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 凝溶胶蛋白对小鼠成肌细胞分化及肌纤维形成的影响研究
- 2010年
- 为了研究凝溶胶蛋白(gelsolin,GSN)对成肌细胞分化及肌纤维形成的作用及其作用机制,试验采用蛋白导入试剂将人血浆凝溶胶蛋白导入C2C12细胞中;通过倒置显微镜定性观察细胞分化的形态学变化并应用间接免疫荧光染色法检测凝溶胶蛋白的导入情况;利用TaqMan实时定量RT-PCR方法定量分析分化前导入凝溶胶蛋白对细胞骨骼肌肌动蛋白表达水平的影响。结果表明:外源凝溶胶蛋白改变了C2C12小鼠成肌细胞的形态,使其形成发达的片状伪足或丝状伪足,分化形成的多核肌管更多;细胞分化前导入凝溶胶蛋白上调骨骼肌肌动蛋白的表达。体外试验证明C2C12小鼠成肌细胞分化前导入凝溶胶蛋白可促进肌细胞的分化及肌纤维的形成。
- 姜瑜苏玉虹曾瑞霞赵微Kin Chow Chang
- 关键词：凝溶胶蛋白分化
- HLAA2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
- 单伟陈奎秦书俭曾瑞霞房艳郑德宇李德华刘学
- 人脂肪源性干细胞多潜能分化特性被引量：5
- 2013年
- 目的原代分离培养人脂肪干细胞(ADSCs),探讨细胞增殖及多向分化,间充质干细胞相关特性。方法取人吸脂术的脂肪组织通过酶消化法分离培养ADSCs,观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和表面抗原的表达,用茜素红、甲苯胺蓝和油红O染色鉴定向骨、软骨及脂肪诱导分化。结果人ADSCs呈长梭形、旋涡状生长,传至第15代的ADSCs仍具较强的增殖能力,ADSCs具有干细胞特性,高表达标记CD90和CD44的间充质干细胞,不表达内皮细胞标记CD31,而CD49d低表达,CD106阴性。成骨诱导后可见钙结节形成并被茜素红染成紫红色,软骨诱导后分泌大量蛋白多糖,被甲苯胺蓝染成蓝色,成脂诱导后细胞内可见大量脂滴被油红O染色红色。结论人脂肪干细胞可分化成间充质干细胞,具有稳定增殖和成骨、成软骨和成脂等多向分化潜能。
- 房艳李德华倪伟民曾瑞霞单伟刘学元
- 关键词：人脂肪干细胞成骨细胞软骨细胞脂肪细胞
- 人体解剖学多媒体课件的制作及应用被引量：7
- 2009年
- 传统的解剖学理论教学一般以教师讲授、板书、绘图为主，借助挂图、模型等形式辅助教学。但由于书写板书、绘图要占用大量课堂时间，挂图图像大小、质量、携带等方面的限制，使得这种教学模式给学生的印象是孤立的、缺乏多元化体系。
- 曾瑞霞单伟李德华秦书俭
- 关键词：人体解剖学多媒体课件理论教学辅助教学教学模式板书
- 血管内皮细胞生长因子对人脐静脉间充质干细胞生长增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 背景:在体外构建组织工程材料的过程中,快速获得足够数量且纯度高的种子细胞极为重要,但目前人脐静脉间充质干细胞原代培养的增殖率仍较低。目的:观察血管内皮细胞生长因子对人脐静脉间充质干细胞原代生长、增殖的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/07在辽宁医学院解剖学实验室完成。材料:正常健康产妇顺产或剖宫产的新生儿脐带20条,由锦州市凌河区妇幼保健院及辽宁医学院附属第一医院提供。方法:采用胶原酶消化法分离人脐静脉间充质干细胞,以1×108L-1的密度接种于24孔培养板,设立2组,实验组加入150g/L血管内皮细胞生长因子,对照组不加入任何细胞因子。主要观察指标:观察细胞形态变化,MTT法检测细胞生长曲线,免疫细胞化学法鉴定细胞CD166的表达。结果:接种后6h细胞开始贴壁,48h后细胞完全贴壁生长,出现呈椭圆形、多角形的内皮细胞,以及呈梭形的成纤维样细胞,有的形成漩涡状生长集落;原代培养1周后细胞以梭形为主;传代后24h细胞基本完成贴壁,48h细胞开始分裂增殖,5～7d可见多核的成纤维样细胞贴壁,呈长杆状、三角形、梭形等。与对照组比较,实验组细胞生长状态较好,增殖较快,单位时间内获得的细胞数量明显增加(t=2.235,P<0.05),CD166阳性细胞率显著升高(t=1.638,P<0.01)。结论:血管内皮细胞生长因子可促进人脐静脉间充质干细胞贴壁,且更有利于间充质干细胞的增殖和纯化。
- 单伟秦书俭曾瑞霞张海锋李德华郑德宇
- 关键词：原代培养血管内皮细胞生长因子CD166
- 猪MAPK12基因cDNA的克隆及序列分析被引量：1
- 2006年
- 目的克隆新的猪MAPK12基因全长ORF,分析其生物特性,为进一步研究该酶的功能提供信息资料。方法:以已报道的人及小鼠MAPK12基因cDNA序列为依据,利用电脑克隆策略获得的ESTs设计引物,RT-PCR技术扩增新的猪MAPK12基因ORF序列,将PCR产物直接进行序列测定。分析此蛋白的特性并预测其结构。结果分离的ORF全长1101bp,编码367个氨基酸,与人鼠氨基酸序列92%同源;利用生物信息学软件分析出此蛋白的理化特性并预测了其一级、二级和高级结构。结论研究分离的基因片段可命名为猪ERK6,通过分析,获取了该酶的基本信息特征,并与现有的报道结果进行对比分析,为进一步开展猪MAPK12基因的结构功能、表达调控的相关研究奠定了基础。
- 曾瑞霞苏玉虹巴彩凤朱宝芹宋慧娟刘东鑫
- 关键词：ORF
- 猪CFL2b基因cDNA克隆初步分析被引量：4
- 2009年
- 利用基因表达谱芯片分析法筛选出与大白猪高肌肉产量-肌纤维形成有关的CFL2b基因.参考人和小鼠CFL2b基因序列,采用SMART-RACE技术结合EST序列拼接技术,从猪骨骼肌肌肉中首次克隆了猪CFL2b的全长cDNA序列(GenBank登录号EU561660,EU561661),Northern杂交检测CFL2b基因mRNA.结果表明,猪CFL2b基因含有2个转录本,长转录本3012bp,短转录本1466bp.CFL2b基因在多种真核生物中都有表达,且编码区序列非常保守,开放式读码框501bp编码了166个氨基酸的蛋白质.氨基酸序列分析表明,猪CFL2b基因与人和小鼠氨基酸同源性分别为100%和99.1%.核苷酸序列相似性分别为88.1%和74.9%.
- 赵微曾瑞霞巴彩凤宋慧娟苏玉虹
- 关键词：CDNASMARTRACENORTHERN杂交
- 人体解剖学教学数字化资源库的建立被引量：4
- 2013年
- 数字化教育资源库建设是开展信息化、网络化教育的基础，也是当前教育改革与素质教育的要求。教学实践表明，有效地利用数字化教学资源，对培养学生的学习能力、求知意识及探索精神具有重要意义。由于我校系统解剖学课程的数字化教育资源（互动教学平台）刚刚引进，目前还处于初步开发阶段，存在较多问题，唯有建立合理的数字化教育资源发展策略，才能更好地促进系统解剖学课程数字化教育资源建设，发挥其最大效益，
- 单伟秦书俭刘学曾瑞霞房艳李德华
- 关键词：人体解剖学教学资源库解剖学课程教育资源
- 海绵状的小肠粘膜下层促进成骨样细胞增殖分化被引量：4
- 2013年
- 目的:观察人脂肪干细胞(hADSCs)诱导分化的成骨样细胞在海绵状的猪小肠粘膜下层(SIS)表面的生长情况,探讨三维立体海绵状的SIS能否促进成骨样细胞的增殖和分化。方法:采用物理和化学结合的方法将猪近段空肠制备成脱细胞的SIS,再将薄膜状的SIS经液氮低温研磨制成微粒,交联后采用冷冻干燥技术重塑形为海绵状的SIS;原代培养hADSCs,流式术检测表面抗原,诱导其成骨、成软骨、成脂分化并染色鉴定;将诱导的成骨样细胞与海绵状SIS复合培养,扫描电镜观察细胞形态;应用SIS材料浸提液培养成骨样细胞,MTT法检测细胞增殖情况,ALP活度检测成骨分化情况。结果:脱细胞的SIS未见有核物质,海绵状的SIS呈三维立体状,具有大量均匀一致的孔隙;原代培养的hADSCs表达干细胞相关抗原,并可分化为成骨样细胞,茜素红将钙结节染成紫红色。成骨样细胞与海绵状SIS复合培养后,细胞生长旺盛增殖能力强,ALP表达量明显增加。结论:海绵状的SIS具有均匀的三维孔隙,细胞相容性好,能明显促进hADSCs来源的成骨样细胞的增殖及成骨分化,可成为骨组织工程新型的三维立体天然生物衍生材料。
- 房艳倪伟民单伟曾瑞霞刘学元
- 关键词：小肠粘膜下层成骨样细胞增殖分化
