李前
- 作品数：67 被引量：104H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 蛋白转导肽－对氧磷酶1融合蛋白及其制备方法和用途
- 本发明涉及蛋白转导肽－对氧磷酶1融合蛋白及其制备方法和用途。具体而言，本发明涉及蛋白转导肽对氧磷酶1(P11-PON1)融合蛋白的哺乳动物细胞和家蚕表达方法，该融合蛋白具有粘膜吸收进入体内并且可以透过血脑屏障的活性。该融...
- 赵宝全李前黄春倩孙曼霁
- 文献传递
- 一种新型表皮生长因子及其应用
- 本发明涉及突变的人源表皮生长因子及其应用。具体而言，本发明涉及三种突变的人源表皮生长因子的蛋白以及含有编码所述蛋白的核苷酸序列的核酸分子。本发明涉及含有上述核酸分子的表达载体。本发明的突变的人源表皮生长因子可治疗病毒感染...
- 赵宝全李前孙曼霁
- 文献传递
- GST-TAT-P53c融合蛋白的表达及对p53基因突变型肿瘤细胞的促凋亡作用被引量：1
- 2007年
- 目的研究P53蛋白C端(P53c)对p53基因突变型肿瘤细胞SW480的促凋亡作用。方法用人类免疫缺陷病毒TAT蛋白的蛋白转导域(TAT)将P53c运载进入肿瘤细胞,用氧依赖性降解区域(ODD)控制P53c在组织中的稳定性。通过PCR方法制备TAT-ODD-p53c(TOPc),TAT-p53c(TPc)及p53c基因,与pGEX4T载体连接后在大肠杆菌中表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-TAT-ODD-P53c(GST-TOPc),GST-TAT-P53c(GST-TPc)及GST-P53c等融合蛋白。免疫组化方法检测TAT蛋白运载融合蛋白穿过SW480细胞膜的作用,MTT法检测融合蛋白对SW480细胞活力的影响,流式细胞仪检测致SW480细胞凋亡作用。结果成功构建pGEX系列表达载体,并在大肠杆菌中可溶性表达。Western印迹结果表明,重组蛋白可以和GST单克隆抗体特异性结合。免疫组化显示GST-TPc,GST-TOPcm及GST-TOPc均能进入SW480细胞,GST-TPc能明显降低SW480细胞活性,导致SW480细胞凋亡。含ODD的融合蛋白在常氧环境中对肿瘤细胞有轻度促凋亡作用。结论TAT可以介导其融合蛋白跨越细胞膜。GST-TPc可引起p53突变型肿瘤细胞凋亡。
- 吴少平王玉霞武军华贾培媛王晨宇李前孙曼霁
- 关键词：蛋白质P53蛋白转导域
- 血红蛋白存在下胆碱酯酶活性的5,5′-二硫双-2-硝基苯甲酸分光光度测定法被引量：3
- 2001年
- 5 ,5′二硫双 - 2 -硝基苯甲酸 (DTNB)分光光度测定法是检测乙酰胆碱酯酶酶活性的最灵敏的方法。但血液样品如兔网织红细胞裂解物样品中血红蛋白的存在会极大地干扰呈色反应 ,因此我们采用蛋白质变性剂三氯乙酸沉淀血红蛋白 ,再用NaOH将上清液校回中性的方法 ,对原DTNB法进行改良。改进后的DTNB法较原DTNB法大大降低了背景干扰 ,提高了检测灵敏度。
- 李前刘伟李凤珍孙曼霁
- 关键词：血红蛋白乙酰胆碱酯酶三氯乙酸
- 特异识别人脑乙酰胆碱酯酶抗原表位的单克隆抗体1F9
- 2002年
- 目的 :为了进一步研究乙酰胆碱酯酶的功能和结构以及精确地确定抗体对位与抗原表位的关系 ,我们采用单克隆抗体对人脑AChE的肽库进行筛选 ,希望能找到一对一的表位对位关系。方法 :采用MGeyson的方法化学合成人脑乙酰胆碱酯酶的十肽肽库 ,十肽N端生物素化后用于ELISA检测。结果 :我们用鼠抗电鳐乙酰胆碱酯酶的单抗 1F9筛选人脑乙酰胆碱酯酶的十肽肽库 ,得到 1个抗原表位 111。结论 :抗原表位 111可以被兔抗人脑AChE的多抗和鼠抗电鳐乙酰胆碱酯酶的单抗 1F9识别 ,表明此表位序列在人脑AChE和电鳐AChE中是高度保守的。
- 李前刘伟武军华孙曼霁
- 关键词：表位酶联免疫分析单克隆抗体
- 重组人脑乙酰胆碱酯酶的基因表达和生化毒理学性质被引量：3
- 2002年
- 人脑乙酰胆碱酯酶的全长cDNA序列克隆到真核高效表达载体pcDNA3.1中 ,并将pcDNA AChE转染人胚肾细胞株 2 93细胞 ,进行rhAChE的暂时表达 .真核细胞表达的rhAChE的生化性质与天然人脑AChE十分相似 .rhAChE的Km 值约为 137μmol L ;有过量底物抑制现象 ;可被胆碱酯酶抑制剂huperzineA和eserine抑制 (IC50 分别为 2 5× 10 -8mol L和 1 0× 10 -7mol L) ;肟类化合物HI 6 (10 -4 mol L)可以有效地重活化被sarin(10 -6mol L及 10 -7mol L)抑制的rhAChE ,4h内重活化率分别达 86 %和 97% .rhAChE反复冻融 3次 ,酶活性没有损失 .
- 李前刘伟李凤珍孙曼霁
- 关键词：真核表达基因表达
- SARS冠状病毒的S蛋白的抗原表位、其抗体、编码核酸以及含有它们的组合物
- 本发明公开用于治疗和诊断SARS组合物和方法。说明性组合物含有一种或多种SARS肽、编码这些肽的多核苷酸、抗体、表达这些肽的抗原递呈细胞，和对于表达这些肽的细胞特异的T细胞。这些公开的组合物可以例如用于诊断、预防和/或治...
- 李前刘刚孙曼霁付爱玲董朝辉
- 文献传递
- SARS冠状病毒的S蛋白的抗原表位、其抗体、编码核酸以及含有它们的组合物
- 本发明公开用于治疗和诊断SARS组合物和方法。说明性组合物含有一种或多种SARS肽、编码这些肽的多核苷酸、抗体、表达这些肽的抗原递呈细胞，和对于表达这些肽的细胞特异的T细胞。这些公开的组合物可以例如用于诊断、预防和/或治...
- 李前刘刚孙曼霁付爱玲董朝辉
- 文献传递
- 特异结合蓖麻毒素的肽、其编码核酸以及检测和抑制蓖麻毒素的方法
- 本发明公开了特异结合蓖麻毒素的肽、编码它们的核酸以及检测和抑制蓖麻毒素的方法。优选地，本发明的肽具有SEQ ID NO：1－12任何一个所示的氨基酸序列。
- 王亚丽李前王玉霞邵宁生
- 文献传递
- 截短型人睫状神经营养因子活性片段及其融合蛋白
- 本发明涉及一种蛋白转导肽融合截短型人睫状神经营养因子活性片段的蛋白以及含有编码所述截短型活性片段的核苷酸序列的核酸分子。本发明涉及含有上述核酸分子的表达载体。本发明还涉及所述蛋白或核酸分子用于制备治疗神经退行性疾病(包括...
- 曲恒燕周建平李前孙曼霁
- 文献传递
