王方雨
- 作品数：135 被引量：117H指数：6
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程生物学更多>>
- 一种通用型单克隆抗体筛选的免疫层析检测试纸条及检测方法
- 本发明提供一种通用型单克隆抗体筛选的免疫层析检测试纸条及检测方法，所述免疫层析检测试纸条由试纸和抗原生物素探针两部分组成；所述试纸包括支撑底板、从测试端依次固定在支撑底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜及手柄端的吸水纸；...
- 孙亚宁杨苏珍刘胜男胡骁飞邢云瑞王方雨范璐张改平
- 猪流行性腹泻病毒E蛋白诱发细胞未折叠反应的分子机制
- 2022年
- 为阐明猪流行性腹泻病毒(PEDV) E蛋白诱导Vero-E6细胞内质网应激分子机制,采用RT-PCR方法扩增得到E蛋白基因,经XhoⅠ和BamHⅠ酶切后与同样酶切的p-EGFP-N1载体使用T4 DNA连接酶进行连接,成功构建了表达载体,与pCDNA 3.1-GRP78共转染Vero-E6细胞,通过激光共聚焦试验和Western blot验证E蛋白的细胞定位,并揭示其激活细胞内质网应激的分子机制。结果表明,通过共聚焦荧光显微镜证实E蛋白定位在细胞中,Western blot方法验证E蛋白可以上调Vero-E6细胞GRP78蛋白表达水平,诱导Vero细胞内质网应激。进一步采用Western blot验证E蛋白通过PERK-eIF2α信号通路激活未折叠蛋白反应。本研究为探究PEDV致病机制提供了新的思路。
- 邢广旭焦文强焦文强张改平
- 关键词：猪流行性腹泻病毒E蛋白信号通路
- 靶向识别恩诺沙星单链抗体的核心氨基酸序列及应用
- 本发明涉及一种靶向识别恩诺沙星单链抗体的核心氨基酸序列及应用，属于抗菌药物抗原检测领域。本发明借助于分子对接及虚拟筛选技术，在恩诺沙星单链抗体晶体结构的基础上，通过分子对接技术，搜寻虚拟多肽库中与靶标蛋白结合模式与亲和力...
- 张改平王方雨邓瑞广滕蔓魏啬牛艳张颍硕张运尚
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒感染小鼠原代神经元细胞的miRNA表达谱差异分析被引量：2
- 2020年
- 研究乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染后小鼠原代神经元细胞miRNA的表达谱差异,初步探讨JEV与宿主在miRNA水平的相互作用。分别提取JEV感染48 h后的小鼠原代神经元细胞和未染毒组细胞,高通量测序分析miRNA的表达谱并进行差异分析,选取显著差异表达的miRNA进行实时定量PCR验证。结果筛选出26个差异表达显著的miRNA,其中,18个表达上调,8个表达下调。小鼠原代脑神经元细胞中mmu-miR-21a-3p、mmu-miR-223-5p、mmu-miR-147-3p、mmu-miR-155-5p和mmu-miR-146a-5p的表达促进JEV-E基因在神经元细胞中表达,而mmu-miR-301a的表达抑制JEV-E基因的表达。神经元细胞中miRNA的表达影响JEV的复制,为进一步研究JEV致神经功能异常机制提供研究方向和理论支持。
- 杜加茹陈浩南王方雨张运尚樊剑鸣
- 关键词：乙型脑炎病毒MICRORNA
- 苏丹红Ⅳ和柠檬黄人工抗原的制备与鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的:制备并鉴定苏丹红Ⅳ和柠檬黄人工抗原。方法:琥珀酸酐法构建苏丹红Ⅳ半抗原;以牛血清蛋白(BSA)为载体,用活性脂法分别与苏丹红Ⅳ半抗原和柠檬黄进行偶联。并用紫外吸收色谱法和电泳凝胶色谱鉴定制备是否成功。结果:经紫外吸收和摩尔吸收系数法估算得到苏丹红Ⅳ与BSA的偶联比31∶1,柠檬黄与BSA的偶联比17∶1。结论:成功制备出苏丹红Ⅳ和柠檬黄的人工抗原。
- 刘珍张改平职爱民王方雨李青旺
- 关键词：柠檬黄人工抗原
- 分子对接技术研究热休克蛋白27与β受体激动剂的相互作用
- 2018年
- 利用分子对接技术,研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)与β受体激动剂类药物的结合能力,探究HSP27用于检测β受体激动剂的可能性。将人工表达的HSP27和β_2肾上腺素受体(β_2adrenergic receptor,β_2AR)分别与β受体激动剂类药物进行分子对接,比较它们的结合能力的差异性,并对对接结果进行酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)验证。对接结果显示,15种β受体激动剂类药物中有9种药物与HSP27对接的总评分值高于β_2AR。ELISA的结果显示,HSP27可以与HRP-克伦特罗、HRP-非诺特罗和HRP-莱克多巴胺特异性结合,OD值分别为0.685、0525、0.662,这与分子对接结果基本一致。结论:HSP27与β肾上腺素受体激动剂类药物具有较强的结合能力,可以用于检测β肾上腺素受体激动剂的可能性较大。
- 胡梦华王晶王方雨邓瑞广樊剑鸣
- 关键词：Β2肾上腺素受体Β受体激动剂
- 玉米赤霉醇完全抗原的制备及质量鉴定被引量：5
- 2016年
- 旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础。改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半抗原与载体蛋白BSA或OVA偶联,制备免疫原ZER-BSA和包被原ZER-OVA,并采用凝胶电泳、动物免疫对人工抗原进行质量鉴定,间接ELISA测定抗血清效价,间接竞争(阻断)ELISA测定抗血清的敏感性和特异性。结果表明,用制备的免疫原免疫小鼠血清效价均已达到1∶104以上。6号鼠的血清敏感性最高,对ZER的半数抑制质量浓度(IC50)达15.77ng/mL,获得的血清除与α-玉米赤霉醇特异性反应外,与其结构类似物β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮分别有12.5%、100%、12.5%、25%、100%的交叉反应,与其他霉菌毒素交叉反应性均小于0.5%。表明试验成功获得ZER人工抗原,通过动物免疫制备敏感性好、特异性强的ZER多克隆抗体,为ZER单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础。
- 胡骁飞邓歌柴书军姚静静孙亚宁王方雨邓瑞广张改平
- 关键词：玉米赤霉醇多克隆抗体ELISA
- 与猪病毒性腹泻病毒Nsp5蛋白结合的多肽序列
- 本发明借助于机器学习模型，针对PEDV Nsp5蛋白晶体结构的解析，通过多肽虚拟筛选技术，筛选到与靶标蛋白具备潜，其多肽序列为YYRKWP（168510）。人工固相合成168510序列，并利用人工表达的PEDV Nsp5...
- 王方雨张改平冯华邢广旭孙亚宁徐倩张颍硕
- 依诺沙星单链抗体核心氨基酸序列及其应用
- 本发明涉及一种依诺沙星单链抗体的核心氨基酸序列及应用，属于抗菌药物抗原检测领域。本发明借助于分子对接及虚拟筛选技术，在依诺沙星单链抗体晶体结构的基础上，通过分子对接技术，搜寻虚拟多肽库中与靶标蛋白结合模式与亲和力最佳的多...
- 张改平王方雨邢广旭刘运超杜加茹胡曼邓瑞广
- 文献传递
- 硫代磷酸酯类有机磷药物抗原设计及免疫分析被引量：1
- 2016年
- 半抗原的设计与合成是免疫分析方法的关键。本文介绍了硫代磷酸酯类有机磷药物半抗原的设计路线与合成方法,总结了各种免疫分析方法(如酶联免疫法、偏振荧光免疫法、胶体金免疫层析法和免疫传感器)在硫代磷酸酯类有机磷药物残留检测中的应用,并对未来免疫分析法的发展方向进行了展望。
- 王晶陈秀金王方雨李道敏李兆周张改平邓瑞广侯玉泽
- 关键词：免疫分析
